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广州管圆线虫cDNA文库的构建分析及广州管圆线虫病疗效考核抗原的筛选鉴定

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-15页
缩写第15-17页
前言第17-26页
第一章 广州管圆线虫幼虫cDNA文库的构建与幼虫、成虫基因表达模式分析第26-45页
   ·材料第27-30页
     ·菌株及质粒第27页
     ·主要试剂第27-28页
     ·溶液及培养基配制第28-29页
     ·主要实验仪器第29-30页
     ·实验动物第30页
     ·广州管圆线虫感染大鼠血清第30页
   ·方法第30-33页
     ·广州管圆线虫幼虫cDNA文库的建立第30-31页
     ·广州管圆线虫成虫表达模式的分析第31-33页
   ·结果第33-36页
     ·广州管圆线虫总RNA的质和量第33页
     ·所建文库的特性第33-35页
     ·广州管圆线虫幼虫和成虫cDNA文库表达谱的分析第35-36页
   ·讨论第36-45页
     ·广州管圆线虫幼虫cDNA文库的评价第36页
     ·GenBank中广州管圆线虫基因的数据情况第36-39页
  附表1. 91个广州管圆线虫幼虫EST序列的BLAST分析第39-42页
  附表2. 54个广州管圆线虫成虫EST序列的BLAST分析第42-45页
第二章 广州管圆线虫新基因的发现第45-62页
   ·材料第46-49页
     ·细菌菌株及质粒第46页
     ·文库第46页
     ·主要试剂第46-48页
     ·主要实验仪器第48-49页
   ·实验方法第49-51页
     ·全长基因和发现和鉴定第49-50页
       ·G40、G172克隆全长cDNA的序列测定第49-50页
       ·对全长ORF序列进行蛋白质功能预测第50页
       ·G40、G172全长cds cDNA序列登录GenBank第50页
     ·目标基因的克隆、表达、鉴定、纯化及免疫反应性的评价第50-51页
       ·表达质粒的构建第50页
       ·目标基因的表达第50-51页
       ·目标蛋白的鉴定第51页
   ·结果第51-60页
     ·G40克隆第51-57页
       ·G40基因序列所编码的蛋白质分析第52-53页
       ·G40基因同源性搜索结果第53-55页
       ·利用CD-Search程序对G40蛋白进行保守区域的搜索结果第55-56页
       ·G4D基因在大肠杆菌中的表达及产物的鉴定结果第56-57页
     ·G172克隆第57-60页
       ·G172基因序列及氨基酸序列第57-58页
       ·G172基因同源性搜索结果第58-60页
       ·利用CD-Search程序对G40蛋白进行保守区域的搜索结果第60页
   ·讨论第60-62页
第三章 广州管圆线虫病疗效考核大鼠模型的建立第62-70页
   ·材料与方法第63-64页
     ·仪器、试剂、动物第63页
     ·动物分组第63-64页
     ·广州管圆线虫的人工感染第64页
     ·广州管圆线虫感染大鼠的药物治疗第64页
     ·大鼠血清的收集第64页
     ·感染大鼠的治疗效果观察第64页
   ·结果第64-69页
     ·大鼠的感染情况第64-65页
     ·大鼠的体内广州管圆线虫检获结果第65-69页
   ·讨论第69-70页
第四章 广州管圆线虫病疗效考核抗原的筛选与鉴定第70-77页
   ·材料与方法第70-72页
     ·仪器试剂与动物第70页
     ·广州管圆线虫可溶性抗原的制备第70-71页
     ·治疗前后广州管圆线虫感染大鼠血清的制备第71页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第71页
     ·Western-blot第71页
     ·广州管圆线虫Mr 32 000抗原(AC32)的切胶纯化与鉴定第71页
     ·酶联免疫吸附试验(ELISA)第71-72页
   ·结果第72-75页
     ·Western blot结果第72-73页
     ·抗原纯化与活性鉴定结果第73页
     ·ELISA结果第73-75页
   ·讨论第75-77页
参考文献第77-82页
附录1 表达序列标签注册用E-Mail通讯格式第82-84页
附录2 EST序列整理第84-146页
附录3 已登录的包含全长ORF的广州管圆线虫cDNA第146-149页
博士生期间发表的与本研究相关的论文第149-150页
致谢第150-151页
原创性声明和版权使用授权书第151页

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