摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-15页 |
缩写 | 第15-17页 |
前言 | 第17-26页 |
第一章 广州管圆线虫幼虫cDNA文库的构建与幼虫、成虫基因表达模式分析 | 第26-45页 |
·材料 | 第27-30页 |
·菌株及质粒 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27-28页 |
·溶液及培养基配制 | 第28-29页 |
·主要实验仪器 | 第29-30页 |
·实验动物 | 第30页 |
·广州管圆线虫感染大鼠血清 | 第30页 |
·方法 | 第30-33页 |
·广州管圆线虫幼虫cDNA文库的建立 | 第30-31页 |
·广州管圆线虫成虫表达模式的分析 | 第31-33页 |
·结果 | 第33-36页 |
·广州管圆线虫总RNA的质和量 | 第33页 |
·所建文库的特性 | 第33-35页 |
·广州管圆线虫幼虫和成虫cDNA文库表达谱的分析 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-45页 |
·广州管圆线虫幼虫cDNA文库的评价 | 第36页 |
·GenBank中广州管圆线虫基因的数据情况 | 第36-39页 |
附表1. 91个广州管圆线虫幼虫EST序列的BLAST分析 | 第39-42页 |
附表2. 54个广州管圆线虫成虫EST序列的BLAST分析 | 第42-45页 |
第二章 广州管圆线虫新基因的发现 | 第45-62页 |
·材料 | 第46-49页 |
·细菌菌株及质粒 | 第46页 |
·文库 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46-48页 |
·主要实验仪器 | 第48-49页 |
·实验方法 | 第49-51页 |
·全长基因和发现和鉴定 | 第49-50页 |
·G40、G172克隆全长cDNA的序列测定 | 第49-50页 |
·对全长ORF序列进行蛋白质功能预测 | 第50页 |
·G40、G172全长cds cDNA序列登录GenBank | 第50页 |
·目标基因的克隆、表达、鉴定、纯化及免疫反应性的评价 | 第50-51页 |
·表达质粒的构建 | 第50页 |
·目标基因的表达 | 第50-51页 |
·目标蛋白的鉴定 | 第51页 |
·结果 | 第51-60页 |
·G40克隆 | 第51-57页 |
·G40基因序列所编码的蛋白质分析 | 第52-53页 |
·G40基因同源性搜索结果 | 第53-55页 |
·利用CD-Search程序对G40蛋白进行保守区域的搜索结果 | 第55-56页 |
·G4D基因在大肠杆菌中的表达及产物的鉴定结果 | 第56-57页 |
·G172克隆 | 第57-60页 |
·G172基因序列及氨基酸序列 | 第57-58页 |
·G172基因同源性搜索结果 | 第58-60页 |
·利用CD-Search程序对G40蛋白进行保守区域的搜索结果 | 第60页 |
·讨论 | 第60-62页 |
第三章 广州管圆线虫病疗效考核大鼠模型的建立 | 第62-70页 |
·材料与方法 | 第63-64页 |
·仪器、试剂、动物 | 第63页 |
·动物分组 | 第63-64页 |
·广州管圆线虫的人工感染 | 第64页 |
·广州管圆线虫感染大鼠的药物治疗 | 第64页 |
·大鼠血清的收集 | 第64页 |
·感染大鼠的治疗效果观察 | 第64页 |
·结果 | 第64-69页 |
·大鼠的感染情况 | 第64-65页 |
·大鼠的体内广州管圆线虫检获结果 | 第65-69页 |
·讨论 | 第69-70页 |
第四章 广州管圆线虫病疗效考核抗原的筛选与鉴定 | 第70-77页 |
·材料与方法 | 第70-72页 |
·仪器试剂与动物 | 第70页 |
·广州管圆线虫可溶性抗原的制备 | 第70-71页 |
·治疗前后广州管圆线虫感染大鼠血清的制备 | 第71页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第71页 |
·Western-blot | 第71页 |
·广州管圆线虫Mr 32 000抗原(AC32)的切胶纯化与鉴定 | 第71页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第71-72页 |
·结果 | 第72-75页 |
·Western blot结果 | 第72-73页 |
·抗原纯化与活性鉴定结果 | 第73页 |
·ELISA结果 | 第73-75页 |
·讨论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-82页 |
附录1 表达序列标签注册用E-Mail通讯格式 | 第82-84页 |
附录2 EST序列整理 | 第84-146页 |
附录3 已登录的包含全长ORF的广州管圆线虫cDNA | 第146-149页 |
博士生期间发表的与本研究相关的论文 | 第149-150页 |
致谢 | 第150-151页 |
原创性声明和版权使用授权书 | 第151页 |