| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-19页 |
| 第二章 新基因的克隆 | 第19-53页 |
| 1 材料和方法 | 第19-24页 |
| ·材料与试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·人睾丸组织总RNA的抽提 | 第20-21页 |
| ·数据库消减杂交 | 第21-22页 |
| ·设计PCR引物以扩增新基因阅读框全长 | 第22页 |
| ·新基因完整编码区的cDNA克隆 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第23页 |
| ·新基因阅读框全长PCR产物连接转化 | 第23页 |
| ·阳性克隆的确定 | 第23-24页 |
| ·PUCm-T／新基因重组质粒DNA的提取 | 第24页 |
| 2 结果 | 第24-49页 |
| ·新基因序列分析 | 第24-46页 |
| ·新基因完整编码区的cDNA克隆 | 第46-49页 |
| 3 讨论 | 第49-53页 |
| 第三章 新基因在人多种组织RT-PCR分析 | 第53-62页 |
| 1 材料和方法 | 第53-56页 |
| ·材料与试剂 | 第53-54页 |
| ·主要仪器 | 第54页 |
| ·人各组织总RNA的抽提 | 第54-55页 |
| ·开放阅读框全长引物 | 第55页 |
| ·RNA样品的浓度测定及质量鉴定 | 第55页 |
| ·PCR扩增 | 第55-56页 |
| 2 结果 | 第56页 |
| 3 讨论 | 第56-62页 |
| 第四章 新基因多组织Northern杂交分析 | 第62-71页 |
| 1 材料和方法 | 第62-67页 |
| ·材料与试剂 | 第62-63页 |
| ·主要仪器 | 第63页 |
| ·人各种组织RNA的抽提 | 第63-64页 |
| ·RNA样品的浓度测定及质量鉴定 | 第64页 |
| ·Northern膜的制备 | 第64-65页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第65-66页 |
| ·PUCm-T／新基因重组质粒DNA的提取 | 第66页 |
| ·Northern杂交检测新基因的组织表达谱 | 第66-67页 |
| 2 结果 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-71页 |
| 第五章 新基因序列和蛋白质结构的生物信息学分析 | 第71-100页 |
| 1 材料和方法 | 第71-72页 |
| ·主要仪器 | 第71页 |
| ·TDRG1基因的染色体定位 | 第71页 |
| ·酶切位点分析 | 第71页 |
| ·蛋白理化性质分析 | 第71页 |
| ·跨膜区分析 | 第71页 |
| ·信号肽分析 | 第71页 |
| ·蛋白细胞内定位预测 | 第71页 |
| ·蛋白基序分析 | 第71页 |
| ·核酸和蛋白序列及空间结构相似性比较和结构功能域分析 | 第71-72页 |
| 2 结果 | 第72-95页 |
| ·染色体定位 | 第72-80页 |
| ·酶切位点分析 | 第80-83页 |
| ·蛋白质性质分析 | 第83-86页 |
| ·蛋白质一级结构分析 | 第86-95页 |
| 3 讨论 | 第95-100页 |
| 第六章 TDRG1基因功能的初步研究 | 第100-114页 |
| 1 材料和方法 | 第100-106页 |
| ·材料与试剂 | 第100-102页 |
| ·主要仪器 | 第102-103页 |
| ·人睾丸组织总RNA的抽提 | 第103页 |
| ·TDRG1基因PCR引物及原位杂交探针 | 第103-104页 |
| ·RNA样品的浓度测定及质量鉴定 | 第104页 |
| ·不同发育时期人睾丸组织RT-PCR扩增TDRG1阅读框片断 | 第104页 |
| ·睾丸组织的多聚甲醛固定和石蜡包埋 | 第104-105页 |
| ·组织石蜡切片的制备 | 第105页 |
| ·不同发育时期人睾丸组织切片原位杂交检测TDRG1基因表达 | 第105-106页 |
| 2 结果 | 第106-111页 |
| ·不同发育时期人睾丸组织RT-PCR | 第106-107页 |
| ·原位杂交 | 第107-111页 |
| 3 讨论 | 第111-114页 |
| 结论 | 第114-115页 |
| 参考文献 | 第115-124页 |
| 附录 | 第124-126页 |
| 综述 | 第126-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第138页 |
