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抗稻瘟病Pib基因启动区结构、功能分析和转基因验证研究

原创性声明第1页
学位论文版权使用授权书第3-7页
中文摘要第7-9页
英文摘要第9-11页
缩略语第11-14页
第一章 文献综述第14-37页
 第一节 水稻稻瘟病的研究进展第14-22页
  1 稻瘟病抗病育种基础理论研究第15-16页
  2 稻瘟病的症状及发病规律第16页
  3 稻瘟病菌侵染与为害机理第16页
  4 稻瘟病造成的危害第16-17页
  5 抗稻瘟病基因研究进展第17-22页
   ·分子标记技术在抗稻瘟病过程中的应用第17-20页
   ·水稻稻瘟病及其它抗病基因的克隆第20-22页
     ·图位克隆及其它基因克隆的方法第20-21页
     ·pib基因的克隆及研究第21-22页
 第二节 水稻遗传转化研究第22-30页
  1 水稻转化受体系统第23-24页
   ·原生质体再生系统第23页
   ·愈伤组织再生系统第23-24页
   ·幼嫩子房、花粉、卵细胞、幼胚再生系统第24页
  2 常用的基因转化方法第24-27页
   ·农杆菌介导法(Agrobacterium-mediation)第24-25页
   ·基因枪转化法(Biolistics)第25-26页
   ·聚乙二醇法(PEG,Polyethylene Glycol)第26页
   ·电激法(Elect roporation)第26页
   ·花粉管通道法(pollen tube—pathway transformation)第26-27页
   ·其他方法第27页
  3 水稻转化中报告基因的选择第27-28页
  4 存在的问题与展望第28-30页
   ·基因沉默第28-29页
   ·外源基因在转基因植物中的最佳表达及其遗传稳定性第29页
   ·选择标记基因的去除第29页
   ·转基因品种与常规品种的安全性差异第29-30页
 第三节 植物启动子的研究第30-37页
  1 植物基因启动子核心结构及其功能第31页
  2 植物启动子的类型以及在基因工程中的研究和应用第31-35页
   ·组成型启动子及其研究利用第32-33页
   ·组织特异型启动子及其研究利用第33页
   ·诱导型启动子及其研究利用第33-35页
     ·光诱导表达启动子第33-34页
     ·热诱导表达启动子第34页
     ·创伤诱导表达启动子第34页
     ·激素诱导表达启动子第34页
     ·真菌和共生菌诱导表达启动子第34-35页
  3.启动子的选择和改造第35-37页
第二章 pib基因的纯化鉴定及启动元件分析第37-46页
 1 材料和方法第38-39页
   ·试验材料第38页
   ·实验方法第38-39页
 2 结果与分析第39-45页
   ·pib基因的序列分析和酶切位点检测第39-43页
   ·pib基因的质粒纯化与正反鉴定第43-44页
   ·pib基因启动子的预测分析第44-45页
 3 讨论第45-46页
第三章 pib基因启动子驱动gus基因植物表达载体的构建第46-58页
 1 材料和方法第46-50页
   ·材料第46-47页
   ·方法第47-50页
 2 结果与分析第50-58页
   ·对双元载体pCAMBIA1301的分析第50-51页
   ·pNAR601的构建第51页
   ·pNAR602的构建第51-52页
   ·pNAR603的构建过程第52页
   ·pNAR604的构建第52-57页
   ·双元载体转化农杆菌EHA101第57-58页
第四章 农杆菌介导转化获得转基因水稻植株第58-70页
 1 材料与方法第58-65页
   ·实验材料第58-61页
   ·实验方法第61-65页
 2 结果与分析第65-70页
   ·转基因水稻植株的获得第65-66页
   ·转基因植株的叶片抗潮霉素鉴定第66-67页
   ·转基因植株的PCR鉴定第67-68页
   ·转基因T_0代水稻种子的潮霉素发芽第68-69页
   ·转基因植株的Southern blot第69-70页
第五章 pib基因启动子驱动gus基因在转基因植株中的表达分析第70-80页
 1.材料和方法第71-73页
   ·实验材料第71-72页
   ·实验方法第72-73页
 2 结果与分析第73-78页
   ·含pNAR604转化子的GUS产物检测第73-75页
   ·其他质粒转化体的GUS分析第75-78页
   ·对照pCAMBIA1301转基因植株荧光定量分析第78页
 3 讨论第78-80页
全文结论第80-81页
参考文献第81-91页
附录:第91-92页
攻读硕士期间发表的论文第92-93页
致谢第93页

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