原创性声明 | 第1页 |
学位论文版权使用授权书 | 第3-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
缩略语 | 第11-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-37页 |
第一节 水稻稻瘟病的研究进展 | 第14-22页 |
1 稻瘟病抗病育种基础理论研究 | 第15-16页 |
2 稻瘟病的症状及发病规律 | 第16页 |
3 稻瘟病菌侵染与为害机理 | 第16页 |
4 稻瘟病造成的危害 | 第16-17页 |
5 抗稻瘟病基因研究进展 | 第17-22页 |
·分子标记技术在抗稻瘟病过程中的应用 | 第17-20页 |
·水稻稻瘟病及其它抗病基因的克隆 | 第20-22页 |
·图位克隆及其它基因克隆的方法 | 第20-21页 |
·pib基因的克隆及研究 | 第21-22页 |
第二节 水稻遗传转化研究 | 第22-30页 |
1 水稻转化受体系统 | 第23-24页 |
·原生质体再生系统 | 第23页 |
·愈伤组织再生系统 | 第23-24页 |
·幼嫩子房、花粉、卵细胞、幼胚再生系统 | 第24页 |
2 常用的基因转化方法 | 第24-27页 |
·农杆菌介导法(Agrobacterium-mediation) | 第24-25页 |
·基因枪转化法(Biolistics) | 第25-26页 |
·聚乙二醇法(PEG,Polyethylene Glycol) | 第26页 |
·电激法(Elect roporation) | 第26页 |
·花粉管通道法(pollen tube—pathway transformation) | 第26-27页 |
·其他方法 | 第27页 |
3 水稻转化中报告基因的选择 | 第27-28页 |
4 存在的问题与展望 | 第28-30页 |
·基因沉默 | 第28-29页 |
·外源基因在转基因植物中的最佳表达及其遗传稳定性 | 第29页 |
·选择标记基因的去除 | 第29页 |
·转基因品种与常规品种的安全性差异 | 第29-30页 |
第三节 植物启动子的研究 | 第30-37页 |
1 植物基因启动子核心结构及其功能 | 第31页 |
2 植物启动子的类型以及在基因工程中的研究和应用 | 第31-35页 |
·组成型启动子及其研究利用 | 第32-33页 |
·组织特异型启动子及其研究利用 | 第33页 |
·诱导型启动子及其研究利用 | 第33-35页 |
·光诱导表达启动子 | 第33-34页 |
·热诱导表达启动子 | 第34页 |
·创伤诱导表达启动子 | 第34页 |
·激素诱导表达启动子 | 第34页 |
·真菌和共生菌诱导表达启动子 | 第34-35页 |
3.启动子的选择和改造 | 第35-37页 |
第二章 pib基因的纯化鉴定及启动元件分析 | 第37-46页 |
1 材料和方法 | 第38-39页 |
·试验材料 | 第38页 |
·实验方法 | 第38-39页 |
2 结果与分析 | 第39-45页 |
·pib基因的序列分析和酶切位点检测 | 第39-43页 |
·pib基因的质粒纯化与正反鉴定 | 第43-44页 |
·pib基因启动子的预测分析 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-46页 |
第三章 pib基因启动子驱动gus基因植物表达载体的构建 | 第46-58页 |
1 材料和方法 | 第46-50页 |
·材料 | 第46-47页 |
·方法 | 第47-50页 |
2 结果与分析 | 第50-58页 |
·对双元载体pCAMBIA1301的分析 | 第50-51页 |
·pNAR601的构建 | 第51页 |
·pNAR602的构建 | 第51-52页 |
·pNAR603的构建过程 | 第52页 |
·pNAR604的构建 | 第52-57页 |
·双元载体转化农杆菌EHA101 | 第57-58页 |
第四章 农杆菌介导转化获得转基因水稻植株 | 第58-70页 |
1 材料与方法 | 第58-65页 |
·实验材料 | 第58-61页 |
·实验方法 | 第61-65页 |
2 结果与分析 | 第65-70页 |
·转基因水稻植株的获得 | 第65-66页 |
·转基因植株的叶片抗潮霉素鉴定 | 第66-67页 |
·转基因植株的PCR鉴定 | 第67-68页 |
·转基因T_0代水稻种子的潮霉素发芽 | 第68-69页 |
·转基因植株的Southern blot | 第69-70页 |
第五章 pib基因启动子驱动gus基因在转基因植株中的表达分析 | 第70-80页 |
1.材料和方法 | 第71-73页 |
·实验材料 | 第71-72页 |
·实验方法 | 第72-73页 |
2 结果与分析 | 第73-78页 |
·含pNAR604转化子的GUS产物检测 | 第73-75页 |
·其他质粒转化体的GUS分析 | 第75-78页 |
·对照pCAMBIA1301转基因植株荧光定量分析 | 第78页 |
3 讨论 | 第78-80页 |
全文结论 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-91页 |
附录: | 第91-92页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第92-93页 |
致谢 | 第93页 |