第一章 文献综述 | 第1-24页 |
1.双生病毒的分类与基因组结构: | 第11-14页 |
·Mastrevirus属 | 第11-12页 |
·Curtovirus属 | 第12页 |
·Topocuvirus属 | 第12页 |
·Begomovirus属 | 第12-14页 |
·双生病毒种的划分标准 | 第14页 |
2 双生病毒的复制、转录与运动 | 第14-17页 |
·双生病毒的复制与转录 | 第14-15页 |
·双生病毒的转录 | 第15-16页 |
·双生病毒的移动 | 第16-17页 |
3 双生病毒致病相关因子 | 第17-20页 |
·C2/AC2 | 第17-19页 |
·C4 | 第19页 |
·BC1 | 第19-20页 |
·BV1 | 第20页 |
4 DNAβ的发现和在双生病毒致病性中的作用 | 第20-22页 |
5 双生病毒的复合侵染 | 第22页 |
6 番木瓜上双生病毒的研究进展 | 第22-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-35页 |
1 材料 | 第24页 |
·植物材料 | 第24页 |
·菌株和质粒 | 第24页 |
·试剂与仪器 | 第24页 |
·常用缓冲液的配制 | 第24页 |
2 方法 | 第24-35页 |
·PCR技术 | 第24-25页 |
·普通PCR反应 | 第24-25页 |
·PCR产物纯化 | 第25-26页 |
·DNA克隆技术 | 第26-27页 |
·载体的去磷酸化 | 第26页 |
·连接 | 第26-27页 |
·感受态细胞制备 | 第27页 |
·转化 | 第27页 |
·重组质粒的提取与鉴定 | 第27-29页 |
·碱裂解法 | 第27-28页 |
·质粒微量提取试剂盒 | 第28-29页 |
·PCR鉴定 | 第29页 |
·酶切鉴定 | 第29页 |
·植物总DNA提取 | 第29-30页 |
·Southern印迹分析 | 第30-35页 |
·同位素法 | 第30-32页 |
·电泳和转膜 | 第30-31页 |
·探针标记 | 第31页 |
·预杂交和杂交 | 第31-32页 |
·地高辛法 | 第32-35页 |
·植物探针标记 | 第32页 |
·真空转膜 | 第32-33页 |
·杂交 | 第33页 |
·免疫显色检测 | 第33-35页 |
第三章 广西番木瓜曲叶症状伴随着中国番木瓜曲叶病毒、中国番茄曲叶病毒以及中国番茄曲叶病毒DNAβ | 第35-47页 |
1 材料和方法 | 第35-39页 |
·毒源 | 第35-36页 |
·植物总DNA的提取(CTAB法) | 第36页 |
·PaLCCNV、ToLCCNV和ToLCCNV DNAβ基因组克隆和序列测定 | 第36页 |
·PaLCCNV-G4、ToLCCNV-G18和ToLCCNV-G18 DNAβ侵染性克隆构建 | 第36-39页 |
·农杆菌介导的植株接种 | 第39页 |
·病毒的Southern印迹检测 | 第39页 |
2 结果与分析 | 第39-45页 |
·番木瓜样品中PaLCCNV、ToLCCNV和ToLCCNV DNAβ复合侵染鉴定 | 第39-41页 |
·PaLCCNV-G4全长侵染性克隆的构建 | 第41页 |
·PaLCCNV-G4的致病性检测 | 第41-43页 |
·PaLCCNV-G4和ToLCCNV-G18 DNAβ在植物组织中的累积。 | 第43-44页 |
·PaLCCNV、ToLCCNV和ToLCCNV DNAβ致病性测定。 | 第44-45页 |
3 讨论: | 第45-47页 |
第四章 中国番茄曲叶病毒DNAβ的重组分子以及缺失分子的致病性测定 | 第47-58页 |
1 材料与方法 | 第47-51页 |
·毒源 | 第47-48页 |
·ToLCCNV RecDNAβ分子和ToLCCNV DelDNAβ分子的检测 | 第48页 |
·ToLCCNV RecDNAβ侵染性克隆的构建 | 第48页 |
·ToLCCNV DNAβA-Rich缺失分子的侵染性克隆构建 | 第48-50页 |
·农杆菌接种 | 第50页 |
·接种植株中病毒的检测 | 第50-51页 |
2 结果与分析 | 第51-52页 |
·ToLCCNV DNAβ重组分子和A-Rich缺失分子的发现和序列分析 | 第51页 |
·ToLCCNV DNAβ重组分子和A-Rich缺失分子致病性测定 | 第51-52页 |
3 讨论 | 第52-58页 |
第五章 侵染番木瓜的赛葵曲叶病毒基因组结构 | 第58-64页 |
1 材料与方法 | 第58-59页 |
·病毒分离物 | 第58页 |
·植物总DNA提取 | 第58页 |
·DNA-A全长基因组的克隆和序列测定 | 第58页 |
·序列分析 | 第58-59页 |
2 结果与分析 | 第59-62页 |
·病毒基因组DNA-A的结构 | 第59-60页 |
·病毒基因组DNA-A与其它双生病毒的比较 | 第60-62页 |
3 讨论 | 第62-64页 |
全文总结 | 第64-65页 |
全文参考文献 | 第65-71页 |
附录A:本论文所用缩写词及中英文对照 | 第71-73页 |
附录B:本论文所用病毒缩写及中英文对照 | 第73-75页 |
附录C:常用试剂的配制 | 第75-82页 |
附录D:常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第82-83页 |
附录E:地高辛杂交方法试剂和仪器 | 第83-86页 |