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猪Ⅱ型圆环病毒—伪狂犬重组病毒活疫苗SA215(C)株的构建及其部分生物学特性研究

第一章 文献综述第1-42页
 1 猪圆环病毒的生物学特性第12-13页
   ·分类地位第12页
   ·病毒的结构和组成第12页
   ·病毒的理化性质第12-13页
   ·病毒的培养第13页
 2 猪圆环病毒的基因组第13-17页
   ·病毒基因组构成第13-14页
   ·病毒基因组的复制与转录第14-15页
   ·主要基因组产物第15-17页
 3 PCV2的流行病学第17-19页
 4 与PCV2有关的疾病第19-24页
   ·猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)第19-20页
   ·猪皮炎/肾病综合征(PDNS)第20-21页
   ·PCV2相关性繁殖障碍第21-22页
   ·猪呼吸道病复合症(PRDC)第22-24页
   ·先天性震颤及中枢神经系统疾病第24页
 5 猪圆环病毒疫苗研究第24-25页
 6 伪狂犬病病毒转移载体第25-30页
 研究目的和意义第30-31页
 参考文献第31-42页
第二章 猪Ⅱ型圆环病毒ORF2基因在ST细胞中的表达及其免疫原性的初步研究第42-61页
 1 材料第42-43页
   ·细胞、质粒和菌株第42-43页
   ·酶和其它试剂第43页
   ·主要仪器第43页
 2 方法第43-51页
   ·猪Ⅱ型圆环病毒ORF2基因真核表达载体的构建第43-47页
   ·表达第47-49页
   ·表达产物鉴定第49-51页
 3 结果第51-56页
   ·猪Ⅱ型圆环病毒ORF2基因真核表达载体的构建第52-53页
   ·表达产物鉴定第53-54页
   ·ELISA检测ORF2基因表达产物的抗原性第54-56页
 4 讨论第56-59页
   ·真核表达载体的建立第56-57页
   ·关于基因的转染方法第57页
   ·间接ELISA方法检测ORF2基因表达产物抗原性第57-59页
 5 结论第59-60页
 参考文献第60-61页
第三章 重组伪狂犬病毒转移载体质粒的构建第61-76页
 1 材料第61-62页
   ·质粒、菌株和细胞第61页
   ·酶和其它试剂第61-62页
   ·仪器设备第62页
 2 方法第62-66页
   ·质粒pPI-2.EGFP和pMD-702*的鉴定第62-63页
   ·重组伪狂犬病毒转移载体质粒pPI-2.EGFP.ORF2的构建第63-66页
 3 实验结果第66-69页
   ·质粒pPI-2.EGFP和pMD-702*的酶切鉴定第66-67页
   ·重组伪狂犬病毒转移载体质粒pPI-2.EGFP.ORF2的酶切鉴定第67页
   ·质粒pPI-2.EGFP与pPI-2.EGFP.ORF2的荧光观察比较第67-68页
   ·ELISA检测PCV-2 ORF2基因融合表达产物的抗原性第68-69页
 4 讨论第69-73页
   ·GFP基因与其他几种报告基因的比较第69-70页
   ·PRV载体的构建第70-71页
   ·外源基因在伪狂犬病病毒转移载体中的表达第71-73页
 5 结论第73-74页
 参考文献第74-76页
第四章 猪Ⅱ型圆环病毒-伪狂犬重组病毒活疫苗SA215(C)株的构建及其部分生物学特性研究第76-107页
 1 材料第77-78页
   ·毒株和细胞第77页
   ·标准血清第77页
   ·酶和其它试剂第77页
   ·仪器设备第77-78页
 2 方法第78-88页
   ·伪狂犬病毒重组猪圆环病毒ORF2基因活载体疫苗株的构建第78-81页
   ·猪圆环病毒病-伪狂犬病重组病毒株的初步鉴定第81-85页
   ·猪圆环毒病-伪狂犬病重组病毒株的部分生物学特性研究第85-88页
 3 试验结果第88-96页
   ·伪狂犬病毒重组猪圆环病毒ORF2基因活载体疫苗株的构建第88页
   ·重组病毒SA215(C)的PCR鉴定第88页
   ·绿色荧光检测及其病变观察第88-89页
   ·Dot-blots杂交检测鉴定重组病毒结果第89页
   ·SA215(C)病毒DNA的BamH Ⅰ酶切及Southern转印杂交检测第89-90页
   ·SA215(C)表达PCV2 ORF2基因的SDS-PAGE电泳及Western印迹分析结果第90-91页
   ·RT-PCR检测重组PRV SA215(C)中ORF2基因在细胞中转录第91页
   ·猪圆环病毒病-伪狂犬病重组病毒株SA215(C)的部分生物学特性研究结果第91-96页
 4 讨论与分析第96-103页
   ·关于重组病毒的构建第97-100页
   ·关于真核转染宿主细胞的选择第100页
   ·关于蛋白质表达检测第100页
   ·关于猪圆环病毒ORF 2基因在PRV SA215株中的表达第100-101页
   ·关于重组病毒SA215(C)株的部分生物学特性第101-103页
 5 结论第103-104页
 参考文献第104-107页
致谢第107-108页
附录 1第108页

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