| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 引言 | 第7-18页 |
| 1．1 研究背景 | 第7-16页 |
| 1．1．1 水稻纹枯病的发生情况 | 第7页 |
| 1．1．2 水稻纹枯病病原菌的特点 | 第7-10页 |
| 1．1．3 立枯丝核菌定量研究的研究进展 | 第10-13页 |
| 1．1．4 实时荧光PCR的基本原理与方法比较 | 第13-16页 |
| 1．2 研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 1．3 研究方案 | 第17-18页 |
| 2 水稻纹枯病病原菌分离物的获得与鉴定 | 第18-25页 |
| 2．1 材料与方法 | 第18-21页 |
| 2．1．1 供试材料的采集 | 第18页 |
| 2．1．2 病原分离物的分离纯化 | 第18页 |
| 2．1．3 病原分离物及所属融合群的鉴定 | 第18页 |
| 2．1．4 DNA操作与序列分析 | 第18-21页 |
| 2．2 结果与分析 | 第21-24页 |
| 2．2．1 病原分离物的分离纯化 | 第21页 |
| 2．2．2 玻片对峙培养结果 | 第21-22页 |
| 2．2．3 ITS区的克隆及序列分析结果 | 第22-24页 |
| 2．3 讨论 | 第24-25页 |
| 2．3．1 水稻纹枯病原菌及所属融合群的验证 | 第24页 |
| 2．3．2 所获分离物的序列分析 | 第24-25页 |
| 3 荧光PCR反应引物及探针的设计与验证 | 第25-34页 |
| 3．1 材料和方法 | 第25-27页 |
| 3．1．1 探针设计区段的确定 | 第25页 |
| 3．1．2 引物与探针的设计 | 第25-26页 |
| 3．1．3 将设计的探针进行BLAST | 第26页 |
| 3．1．4 以所设计的引物和探针进行荧光PCR反应进行保守性验证 | 第26-27页 |
| 3．1．5 特异性验证 | 第27页 |
| 3．2 结果与分析 | 第27-33页 |
| 3．2．1 引物与探针的序列 | 第27-28页 |
| 3．2．2 探针BLAST的结果 | 第28页 |
| 3．2．3 保守性检验结果 | 第28-32页 |
| 3．2．4 荧光PCR反应的特异性验证结果 | 第32-33页 |
| 3．3 讨论 | 第33-34页 |
| 4 Real-time PCR技术用于土壤中菌丝添加标准曲线的制作 | 第34-44页 |
| 4．1 材料与方法 | 第34-37页 |
| 4．1．1 标准品的制备与拷贝数的计算 | 第34页 |
| 4．1．2 土壤样品的处理 | 第34-35页 |
| 4．1．3 土壤DNA的提取 | 第35-36页 |
| 4．1．4 土壤样品含水率的测定 | 第36-37页 |
| 4．1．5 土壤DNA的定量扩增 | 第37页 |
| 4．2 结果与分析 | 第37-43页 |
| 4．2．1 标准品的制备与拷贝数的计算结果 | 第37-38页 |
| 4．2．2 冻融法提取土壤DNA的结果 | 第38-39页 |
| 4．2．3 小球破碎法进行土壤DNA提取结果 | 第39页 |
| 4．2．4 土壤含水量的测定结果 | 第39页 |
| 4．2．5 土壤DNA的定量扩增结果 | 第39-43页 |
| 4．3 讨论 | 第43-44页 |
| 5 土壤中水稻纹枯病原菌群体动态变化的监测 | 第44-49页 |
| 5．1 材料与方法 | 第44页 |
| 5．1．1 土壤样品采集的时间、地点、保存 | 第44页 |
| 5．1．2 标准品的制备与拷贝数的计算 | 第44页 |
| 5．1．3 土壤DNA的提取 | 第44页 |
| 5．1．4 土壤含水量的测定 | 第44页 |
| 5．1．5 土壤DNA的定量扩增 | 第44页 |
| 5．2 结果与分析 | 第44-47页 |
| 5．2．1 标准品的制备与拷贝数的计算 | 第44-45页 |
| 5．2．2 土壤DNA的提取结果 | 第45页 |
| 5．2．3 土壤含水量的测定结果 | 第45页 |
| 5．2．4 土壤DNA的定量扩增结果 | 第45-47页 |
| 5．3 讨论 | 第47-49页 |
| 6 综合讨论与结论 | 第49-53页 |
| 6．1 讨论 | 第49-51页 |
| 6．2 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 个人简介 | 第57-58页 |
| 导师简介 | 第58-59页 |
| 获得成果目录清单 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |