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高效广谱苏云金芽孢杆菌工程菌的构建及杀虫晶体蛋白的研究

绪论第1-38页
 1 苏云金芽孢杆菌第17-32页
   ·杀虫毒素第18-31页
   ·杀虫蛋白与其它物质间的增效第31-32页
 2 杀虫蛋白的应用第32-35页
   ·转Bt杀虫基因植物第32-33页
   ·转基因微生物第33-35页
 3 转基因生物的安全性第35-37页
 4 本研究的立题依据第37页
 5 本研究的目的和意义第37-38页
第一章 对鳞翅目和鞘翅目害虫高毒力工程菌的构建第38-59页
 1 材料与方法第38-46页
   ·实验材料第38-40页
   ·研究方法第40-46页
 2 结果与分析第46-56页
   ·载体pSTK的构建第46-47页
   ·重组质粒pSTK-3A的构建第47页
   ·工程菌G033A和UV173A的构建和验证第47-50页
   ·工程菌G033A和UV173A的生长特性第50-51页
   ·工程菌的遗传稳定性第51页
   ·工程菌的发酵第51页
   ·工程菌的生物活性测定第51-56页
 3 讨论第56-57页
 4 小结第57-59页
第二章 工程菌G033A和UV173A的生物安全性评价第59-70页
 1 材料与方法第59-61页
   ·试验材料第59页
   ·研究方法第59-61页
 2 结果与分析第61-69页
   ·工程菌的残留分析第61-66页
   ·工程菌的扩散分析第66-67页
   ·工程菌对其它非靶标昆虫的影响第67-69页
 3 讨论第69页
 4 小结第69-70页
第三章 杀虫晶体蛋白Cry1Ba3最小活性区的测定第70-79页
 1 材料和方法第70-72页
   ·实验材料第70-71页
   ·研究方法第71-72页
 2 结果和分析第72-76页
   ·序列分析结果第72-73页
   ·引物设计第73页
   ·不同cry1Ba3基因片段的克隆和检测第73-74页
   ·不同cry1Ba3基因片段的表达第74-75页
   ·不同Cry1Ba3蛋白片段的生物活性测定第75-76页
 3 讨论第76-78页
 4 小结第78-79页
第四章 杀虫晶体蛋白Cry1Ba3活性区的体外结晶第79-92页
 1 材料与方法第79-86页
   ·实验材料第79-80页
   ·研究方法第80-86页
 2 结果与分析第86-90页
   ·含cry1Ba3-3H基因片段的重组质粒的构建第86-87页
   ·Cry1Ba3-3H蛋白的诱导表达第87-88页
   ·Cry1Ba3-3H蛋白对小菜蛾的生物活性第88页
   ·Cry1Ba3-3H蛋白的分离纯化第88-89页
   ·Cry1Ba3-3H蛋白结晶第89-90页
 3 讨论第90-91页
 4 小结第91-92页
第五章 营养期杀虫蛋白Vip3A的纯化与体外结晶第92-100页
 1 材料与方法第92-94页
   ·实验材料第92-93页
   ·研究方法第93-94页
 2 结果与分析第94-99页
   ·Bt C008中vip3A基因的扩增和克隆第94-95页
   ·vip3A基因的序列分析第95-96页
   ·vip3A基因的诱导表达第96-97页
   ·Vip3A蛋白对甜菜夜蛾的生物活性测定第97页
   ·蛋白的分离纯化第97页
   ·蛋白结晶第97-99页
 3 讨论第99页
 4 小结第99-100页
第六章 杀虫晶体蛋白的分子设计第100-108页
 1 材料和方法第100-103页
   ·实验材料第100-101页
   ·研究方法第101-103页
 2 结果与分析第103-106页
   ·不同杀虫晶体蛋白的序列分析第103页
   ·引物设计第103页
   ·嵌合基因的构建第103-105页
   ·重组表达质粒的构建和检测第105页
   ·嵌合蛋白的诱导表达和SDS-PAGE检测第105页
   ·生物活性测定第105-106页
 3 讨论第106-107页
 4 小结第107-108页
第七章 结论第108-109页
参考文献第109-122页
致谢第122-124页
作者简历第124页

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