中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-28页 |
1 艾滋病流行情况及危害性 | 第10页 |
2 艾滋病病原学及感染机制 | 第10-11页 |
3 艾滋病检测方法进展 | 第11-13页 |
4 梅毒流行情况及危害性 | 第13-14页 |
5 梅毒感染机制 | 第14-15页 |
6 梅毒检测方法进展 | 第15-18页 |
7 纳米金的性质及其应用 | 第18-21页 |
8 生物芯片技术及其研究现状 | 第21-26页 |
9 本项研究的目的和意义 | 第26-28页 |
第二章 艾滋和梅毒同步检测目视化寡核苷酸芯片的研制 | 第28-47页 |
1 材料 | 第28-30页 |
1.1 标本及原料 | 第28页 |
1.2 试剂 | 第28-29页 |
1.3 溶液的配制 | 第29-30页 |
2 方法 | 第30-39页 |
2.1 基因芯片阵列的设计 | 第30页 |
2.2 引物的设计 | 第30-32页 |
2.3 寡核苷酸探针的设计 | 第32-33页 |
2.4 HIV RNA提取 | 第33页 |
2.5 梅毒DNA提取 | 第33页 |
2.6 HIV逆转录反应 | 第33-34页 |
2.7 艾滋和梅毒同步扩增条件优化 | 第34-35页 |
2.8 基片的制备 | 第35-36页 |
2.9 盖玻片的处理 | 第36页 |
2.10 探针的固定与玻片的封闭 | 第36页 |
2.11 纳米金粒子的制备 | 第36-37页 |
2.12 纳米金标记链酶亲和素的金标探针的制备与纯化 | 第37-38页 |
2.13 芯片核酸杂交及洗脱 | 第38页 |
2.14 芯片金标探针杂交及洗脱 | 第38页 |
2.15 检测 | 第38-39页 |
3 结果 | 第39-43页 |
3.1 艾滋和梅毒同步扩增产物鉴定 | 第39页 |
3.2 纳米金标记链酶亲和素的金标探针的鉴定 | 第39-40页 |
3.3 探针溶剂的选择 | 第40-41页 |
3.4 核酸杂交时间对芯片的影响 | 第41页 |
3.5 银染时间对芯片信号的影响 | 第41-42页 |
3.6 芯片的定性检测 | 第42-43页 |
3.7 芯片用于临床上检测 | 第43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
4.1 寡核苷酸探针的固定 | 第43-44页 |
4.2 杂交反应条件的优化 | 第44页 |
4.3 多重PCR | 第44-45页 |
4.4 纳米金银放大技术 | 第45页 |
4.5 此检测方法的应用前景 | 第45页 |
4.6 提高芯片检测的稳定性是今后的主要任务 | 第45-47页 |
第三章 检测梅毒Tpp47抗体目视化蛋白芯片的研制 | 第47-57页 |
1 材料 | 第47-48页 |
1.1 标本及原料来源 | 第47页 |
1.2 试剂 | 第47页 |
1.3 溶液的配制 | 第47-48页 |
2 方法 | 第48-50页 |
2.1 基片的修饰 | 第48页 |
2.2 纳米金粒子的制备 | 第48页 |
2.3 纳米金标记金黄色葡萄球菌蛋白A的金标探针的制备及其纯化 | 第48-49页 |
2.4 蛋白芯片的制备 | 第49页 |
2.5 芯片杂交与洗脱 | 第49页 |
2.6 结果判读 | 第49-50页 |
2.7 芯片上最佳蛋白固定量的研究 | 第50页 |
2.8 芯片的特异性检测 | 第50页 |
2.9 芯片的灵敏度检测 | 第50页 |
3 结果 | 第50-54页 |
3.1 胶体金颗粒的性能鉴定 | 第50-51页 |
3.2 纳米金标记葡萄球菌蛋白A金标探针的性能鉴定 | 第51-52页 |
3.3 芯片上梅毒抗原固定量确定 | 第52-53页 |
3.4 梅毒Tpp47目视化蛋白芯片模式的建立 | 第53页 |
3.5 芯片的特异性检测 | 第53页 |
3.6 芯片的灵敏度检测 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
4.1 梅毒重组抗原的特异性 | 第54页 |
4.2 芯片上蛋白质高效的固定 | 第54-55页 |
4.3 纳米金技术与蛋白芯片结合的优势 | 第55-56页 |
4.4 性传播疾病病原体诊断用蛋白芯片的改进与应用前景 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
硕士研究生期间发表论文 | 第66页 |