| 1 引言 | 第1-22页 |
| ·骨形态发生蛋白（BMP）的研究进展 | 第7-12页 |
| ·BMP 的发现简史 | 第7页 |
| ·组织分布 | 第7-8页 |
| ·染色体定位 | 第8页 |
| ·BMP 的结构 | 第8-9页 |
| ·BMP 的生物学功能 | 第9-12页 |
| ·骨形态发生蛋白4（BMP-4）的研究进展 | 第12-18页 |
| ·BMP-4 的分子生物学特征 | 第12-17页 |
| ·BMP-4 的生物学作用 | 第17-18页 |
| ·全长cDNA 的获得——RACE 技术的方法及其进展 | 第18-20页 |
| ·RACE 技术的原理 | 第18页 |
| ·RACE 的优点 | 第18-19页 |
| ·RACE 的改良方法 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的、意义及研究方法 | 第20-21页 |
| ·骨形态发生蛋白的研究方向 | 第21-22页 |
| 2 实验一牛骨形态发生蛋白4（BMP-4）基因部分cDNA 的克隆 | 第22-31页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·菌株和克隆载体 | 第22页 |
| ·实验动物组织样与血样 | 第22页 |
| ·主要仪器和设备 | 第22-23页 |
| ·主要试剂和溶液 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-28页 |
| ·PCR 引物的设计及合成 | 第23页 |
| ·牛血DNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·PCR 反应 | 第24-25页 |
| ·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
| ·牛BMP-4 基因cDNA 的克隆及重组质粒的筛选和鉴定 | 第25-28页 |
| ·PCR 产物的序列测定 | 第28页 |
| ·序列分析 | 第28页 |
| ·结果分析 | 第28-31页 |
| ·总DNA 提取结果 | 第28-29页 |
| ·PCR 扩增产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
| ·扩增产物的克隆及重组质粒的筛选和鉴定 | 第29-30页 |
| ·测序及序列分析 | 第30-31页 |
| 3 牛BMP-4 基因3′端cDNA 序列的RACE 克隆及序列分析 | 第31-49页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·菌株和克隆载体 | 第32页 |
| ·实验动物组织样 | 第32页 |
| ·主要仪器和设备 | 第32页 |
| ·主要试剂和溶液 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-35页 |
| ·RACE 引物的设计及合成 | 第32页 |
| ·RNA 酶的灭活 | 第32页 |
| ·牛胎儿软骨总RNA 的提取 | 第32-33页 |
| ·牛BMP-4 基因3′端cDNA 的扩增 | 第33-34页 |
| ·RACE 产物的克隆、筛选及鉴定 | 第34页 |
| ·DNA 序列测定 | 第34页 |
| ·序列分析 | 第34-35页 |
| ·结果分析 | 第35-49页 |
| ·总RNA 提取结果 | 第35页 |
| ·RT-PCR 扩增结果及RACE 体系的建立 | 第35-36页 |
| ·扩增产物的克隆及重组质粒的筛选和鉴定 | 第36页 |
| ·3′RACE 产物的测序及序列分析结果 | 第36-39页 |
| ·牛BMP-4 cDNA 序列及同源性比较 | 第39-45页 |
| ·不同生物BMP-4 氨基酸序列同源性分析 | 第45-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| ·BMP-4 cDNA 的3ˊ端序列及同源性比较（BMPs） | 第49页 |
| ·牛BMP-4 蛋白的同源性分析 | 第49-50页 |
| ·引物的设计 | 第50页 |
| ·模板RNA 的质量 | 第50-51页 |
| ·使用模板RNA 的策略 | 第51-52页 |
| ·3′RACE 技术的应用 | 第52页 |
| 5 结论 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录 | 第60-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
