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耐辐射异常球菌类双组分蛋白DtrA/DtrB在高温及UV胁迫中的作用

摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第一章 文献综述第15-30页
   ·双组分系统第16-20页
     ·双组分系统的结构第16-18页
     ·双组分系统的作用机制第18-20页
     ·双组分系统的功能第20页
   ·细菌双组分系统的研究进展第20-23页
     ·大肠杆菌双组分系统调控网络第21-22页
     ·枯草芽孢杆菌中的双组分系统第22-23页
     ·粘细菌中双组分系统的特点第23页
   ·耐辐射微生物的特征第23-27页
     ·电离辐射抗性第24页
     ·紫外辐射抗性第24-25页
     ·干旱抗性第25页
     ·氧化抗性第25页
     ·耐辐射异常球菌中双组分系统的研究进展第25-27页
   ·立题依据第27-29页
   ·技术路线第29-30页
第二章 ΔdtrA 和ΔdtrB 突变株构建和表型分析第30-58页
   ·材料与方法第30-43页
     ·实验菌株第30页
     ·生化试剂、培养基及主要溶液配制第30-31页
     ·主要仪器第31页
     ·蛋白的生物信息学分析第31页
     ·DNA 的提取第31-32页
     ·PCR 反应第32-33页
     ·DNA 片段的纯化和回收第33-35页
     ·酶切与连接第35-36页
     ·RNA 的提取第36-37页
     ·反转录第37页
     ·荧光定量 PCR第37-39页
     ·操纵单元的验证第39页
     ·转化第39-40页
     ·30℃正常培养下生长曲线的测定第40页
     ·冷处理条件下菌株生长的测定第40-41页
     ·热处理条件下菌株生长的测定第41-42页
     ·UV 辐照下菌株的生长第42页
     ·盐冲击下菌株的生长第42页
     ·山梨醇冲击下菌株的生长第42页
     ·干燥处理下菌株的生长第42-43页
     ·电镜实验第43页
     ·脂肪酸测定第43页
   ·结果分析第43-56页
     ·ΔirrE 突变株中基因的转录分析第43-44页
     ·DtrA 和 DtrB 结构分析第44-45页
     ·序列比对第45-46页
     ·DtrA 的跨膜结构域预测第46页
     ·ΔdtrA 和ΔdtrB 突变株的构建第46-49页
     ·ΔdtrA 和ΔdtrB 单突变的验证第49页
     ·转录单元的验证第49-50页
     ·DtrA/DtrB 对菌株生长的影响第50页
     ·热胁迫条件下 DtrA/DtrB 对菌株生长的影响第50-51页
     ·低温培养时野生型和突变株的生长第51-52页
     ·dtrA 和 dtrB 基因突变后增强了 UV 辐射抗性第52-53页
     ·其它逆境处理下的表型第53页
     ·电镜结果第53-54页
     ·脂肪酸含量变化第54-56页
   ·讨论第56-58页
     ·DtrAB 蛋白的结构分析第56-57页
     ·高温对细胞膜和胞内脂肪酸的影响第57页
     ·DtrAB 蛋白对 UV 辐照的影响第57-58页
第三章 DtrAB 对基因表达的影响第58-67页
   ·材料与方法第58-61页
     ·实验菌株第58页
     ·生化试剂、试剂盒及耗材第58页
     ·主要溶液的配制第58页
     ·主要仪器第58页
     ·RNA 的提取第58页
     ·反转录第58页
     ·荧光定量 PCR第58-61页
   ·结果分析第61-65页
     ·野生型 R1 中 dtrA 和 dtrB 基因在不同温度的表达量第61-62页
     ·热激蛋白的相对表达量第62-63页
     ·UV 相关基因的相对表达量第63-64页
     ·参与不饱和脂肪酸合成基因的相对表达量第64页
     ·其它胁迫相关基因的相对表达量第64-65页
   ·讨论第65-67页
     ·热激反应相关蛋白的表达第65页
     ·UV 相关基因的表达第65页
     ·参与不饱和脂肪酸合成相关基因的表达第65-66页
     ·其它胁迫相关基因的表达第66-67页
第四章 全文结论第67-68页
参考文献第68-75页
致谢第75-76页
作者简历第76页

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