中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-16页 |
文献综述 | 第16-53页 |
第一章 鸡传染性法氏囊病的研究进展 | 第16-28页 |
·概述 | 第16页 |
·IBDV 的病原特性 | 第16-23页 |
·病原 | 第16-18页 |
·病毒的结构 | 第16-17页 |
·病毒的形态发生 | 第17页 |
·病毒蛋白 | 第17-18页 |
·血清型 | 第18页 |
·培养特性 | 第18-22页 |
·IBDV 在鸡胚上的增殖 | 第18-19页 |
·IBDV 在细胞上的增殖 | 第19-20页 |
·IBDV 在细胞中增殖的分子机制 | 第20-22页 |
·抵抗力 | 第22-23页 |
·IBD 的诊断 | 第23-24页 |
·流行病学 | 第23-24页 |
·临床症状 | 第24页 |
·病理变化 | 第24页 |
·IBD 的检测 | 第24-25页 |
·病毒分离鉴定 | 第24页 |
·免疫学试验及分子生物学检测 | 第24-25页 |
·治疗 | 第25-26页 |
·抗体治疗 | 第25页 |
·西药治疗 | 第25页 |
·中草药防制 IBD | 第25-26页 |
·IBD 免疫抑制 | 第26-28页 |
第二章 鸡传染性法氏囊病病毒变异分子生物学研究进展 | 第28-40页 |
·病毒基因组结构 | 第28-29页 |
·蛋白结构与功能 | 第29-35页 |
·病毒抗原变异的分子基础 | 第35-37页 |
·病毒毒力变异的分子基础 | 第37-40页 |
第三章 超强毒 IBD 的发生 | 第40-46页 |
·超强毒 IBDV 的发生及其研究 | 第40-42页 |
·超强毒 IBDV 的发生 | 第40页 |
·vvIBDV 抗原变异 | 第40-42页 |
·vvIBDV 致病型变化 | 第42页 |
·vvIBDV 毒力标记 | 第42页 |
·vvIBDV 毒株致弱和适应细胞培养 | 第42-43页 |
·症状和病变 | 第43页 |
·分子诊断工具 | 第43-44页 |
·致病性和免疫抑制 | 第44-45页 |
·预防与控制 | 第45-46页 |
第四章 鸡传染性法氏囊病防制的研究进展 | 第46-53页 |
·常规疫苗免疫 | 第46-48页 |
·新型传染性法氏囊病疫苗研究进展 | 第48-51页 |
·基因工程疫苗 | 第48页 |
·亚单位疫苗 | 第48-49页 |
·载体疫苗 | 第49-50页 |
·VP5蛋白缺失IBDV毒株 | 第50页 |
·DNA 疫苗 | 第50-51页 |
·免疫防制中存在的主要问题 | 第51-53页 |
·IBDV的毒力标记尚未确定 | 第51页 |
·血清型和毒力的分类发生混淆 | 第51-52页 |
·疫苗的质量令人堪忧 | 第52页 |
·综合防制措施有待进一步加强 | 第52-53页 |
试验研究 | 第53-111页 |
第五章 野毒株的分离鉴定 | 第53-63页 |
·材料 | 第53-54页 |
·标准SPF 鸡IBD 阳性血清 | 第53页 |
·IBD 琼脂扩散试验抗原 | 第53页 |
·荧光标记的 IBDV 特异性血清 | 第53页 |
·SPF 鸡胚和 SPF 鸡 | 第53-54页 |
·IBDV 病料采集及处理 | 第54页 |
·方法 | 第54-56页 |
·病毒的分离 | 第54页 |
·病料的前处理 | 第54页 |
·分离病毒 | 第54页 |
·动物回归试验 | 第54页 |
·组织病理学观察 | 第54页 |
·琼脂免疫扩散试验 | 第54-55页 |
·琼脂板的制备 | 第54-55页 |
·病料处理 | 第55页 |
·琼扩试验步骤 | 第55页 |
·间接荧光抗体法对分离株抗原的检测 | 第55页 |
·电镜观察 | 第55页 |
·IBDV 与MDV、CAV、REV 共感染的检测 | 第55-56页 |
·病料的处理 | 第55页 |
·IBDV与MDV、CAV、REV 的检测 | 第55-56页 |
·结果 | 第56-62页 |
·发病鸡的临床症状及流行病学 | 第56-58页 |
·病毒分离结果 | 第58页 |
·琼脂扩散试验 | 第58页 |
·动物回归试验结果 | 第58页 |
·组织病理学观察 | 第58-60页 |
·电镜观察结果 | 第60-61页 |
·荧光显微镜观察结果 | 第61页 |
·共感染检测的结果 | 第61-62页 |
·讨论 | 第62-63页 |
第六章 4个传染性法氏囊病病毒分离株的致病性研究 | 第63-70页 |
·材料与方法 | 第63-64页 |
·材料 | 第63页 |
·毒株 | 第63页 |
·SPF 鸡胚、SPF 鸡 | 第63页 |
·方法 | 第63-64页 |
·各毒株的处理 | 第63-64页 |
·鸡只的人工感染试验 | 第64页 |
·病理组织学观察 | 第64页 |
·结果 | 第64-68页 |
·人工接种鸡胚的结果 | 第64-65页 |
·4个IBDV野毒株对SPF鸡的致病性 | 第65页 |
·组织病理学观察结果 | 第65-66页 |
·IBDV对中枢免疫器官的作用 | 第66-68页 |
·讨论 | 第68-70页 |
第七章 传染性法氏囊病病毒4个野毒株VP2基因高变区的克隆与序列分析 | 第70-85页 |
·材料 | 第70-72页 |
·病毒 | 第70-71页 |
·菌种 | 第71页 |
·试剂 | 第71页 |
·溶液配制 | 第71-72页 |
·DEPC-H20 | 第71页 |
·100mg/mL 氨苄霉素 | 第71页 |
·X-gal | 第71页 |
·LB 培养液(基) | 第71页 |
·SOB 培养基 | 第71-72页 |
·SOC 培养基 | 第72页 |
·方法 | 第72-77页 |
·4 个野毒株原代毒核酸 RNA 的提取 | 第72页 |
·VP2 高变区的扩增 | 第72-73页 |
·引物的设计与合成 | 第72页 |
·RT-PCR | 第72-73页 |
·Nested-PCR | 第73页 |
·PCR 扩增鉴定 | 第73页 |
·PCR 产物的回收 | 第73-74页 |
·VP2 高变区的克隆与鉴定 | 第74-75页 |
·PCR 产物与pMD18-T vector 的连接 | 第74页 |
·感受态细胞的制备——氯化钙法 | 第74-75页 |
·连接产物的转化 | 第75页 |
·重组质粒的提取与鉴定 | 第75-77页 |
·SDS 碱裂解法小量提取质粒 | 第75-76页 |
·重组质粒的琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第76页 |
·重组质粒的双酶切鉴定 | 第76-77页 |
·阳性质粒测序与序列分析 | 第77页 |
·结果 | 第77-83页 |
·RT-PCR 结果 | 第77页 |
·目的基因的克隆和测序 | 第77-83页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第77-78页 |
·序列分析 | 第78-83页 |
·讨论 | 第83-85页 |
第八章 MTT 比色法在IBDV 分离中的应用 | 第85-89页 |
·材料 | 第85-86页 |
·法氏囊病料 | 第85页 |
·MTT 溶液 | 第85页 |
·裂解液 | 第85页 |
·DMEM | 第85页 |
·犊牛血清 | 第85页 |
·SPF 鸡法氏囊浸出液 | 第85页 |
·法氏囊提取液 | 第85-86页 |
·鸡胚浸出液 | 第86页 |
·主要仪器设备 | 第86页 |
·方法 | 第86页 |
·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第86页 |
·结果 | 第86-87页 |
·讨论 | 第87-89页 |
第九章 IBDV超强毒株的传代致弱 | 第89-103页 |
·材料与方法 | 第89-92页 |
·病毒 | 第89页 |
·SPF鸡胚和SPF鸡 | 第89-90页 |
·试剂 | 第90页 |
·溶液配制 | 第90页 |
·细胞生长液和细胞维持液 | 第90页 |
·Hank’s 液 | 第90页 |
·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第90-91页 |
·病毒的传代 | 第91页 |
·原始囊毒及不同代次细胞毒致病性的测定 | 第91页 |
·细胞适应毒的遗传稳定性试验 | 第91页 |
·弱毒株的免疫原性试验 | 第91-92页 |
·VP2高变区扩增 | 第92页 |
·序列测定和比较 | 第92页 |
·结果 | 第92-101页 |
·病毒的传代驯化 | 第92-93页 |
·原始囊毒及不同代次细胞毒病毒致病性实验 | 第93页 |
·致弱株的稳定性试验 | 第93-94页 |
·致弱株的免疫原性和最佳免疫剂量 | 第94页 |
·RT-PCR 产物及重组质粒的酶切鉴定 | 第94-95页 |
·序列分析 | 第95-101页 |
·讨论 | 第101-102页 |
·小结 | 第102-103页 |
第十章 IBDV细胞苗免疫效果的研究 | 第103-111页 |
·材料与方法 | 第103-104页 |
·实验材料 | 第103页 |
·实验分组 | 第103-104页 |
·母源抗体水平和免疫后抗体效价的检测 | 第104页 |
·计算免疫器官指数及观察病理组织切片 | 第104页 |
·人工感染用毒株及攻毒途径 | 第104页 |
·统计学分析 | 第104页 |
·结果 | 第104-108页 |
·母源抗体水平与免疫后的 IBDV 抗体效价 | 第104-105页 |
·三种疫苗免疫后对免疫器官的影响 | 第105-106页 |
·囊重比与囊指数 | 第105-106页 |
·免疫器官的组织损伤 | 第106页 |
·不同代次细胞毒对攻毒的免疫保护作用 | 第106-107页 |
·对新城疫疫苗免疫应答的免疫抑制 | 第107-108页 |
·讨论 | 第108-111页 |
结论 | 第111-112页 |
参考文献 | 第112-125页 |
缩略语英汉对照表 | 第125-126页 |
致谢 | 第126-127页 |
作者简介 | 第127页 |