| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| ·抑前胸腺分泌蜕皮甾类激素的脑神经肽的研究进展 | 第12-17页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第17-20页 |
| 第一部分 抗脑神经肽PTSP单克隆抗体的制备及其初步应用 | 第20-44页 |
| 2 材料与方法 | 第20-36页 |
| ·材料 | 第20-26页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·细胞株 | 第21页 |
| ·PTSP 多肽片段 | 第21页 |
| ·主要溶液 | 第21-26页 |
| ·方法 | 第26-36页 |
| ·BSA-PTSP 和 OVA-PTSP 的制备 | 第26-27页 |
| ·免疫和检测 | 第27页 |
| ·Dot Blot 检测抗体 | 第27-28页 |
| ·间接 ELISA 法检测抗血清滴度 | 第28-29页 |
| ·细胞融合 | 第29-32页 |
| ·杂交瘤的克隆化 | 第32页 |
| ·单克隆细胞的扩大培养、冻存以及腹水的制备 | 第32页 |
| ·单抗亚型的鉴定 | 第32-33页 |
| ·单抗和多抗的 Western Blotting 分析 | 第33-34页 |
| ·五龄期家蚕血淋巴中PTSP的初步测定 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-44页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第36-42页 |
| ·免疫抗原和检测抗原的制备 | 第36-39页 |
| ·Dot Blot 检测结果 | 第39页 |
| ·间接 ELISA 法测定免疫小鼠血清的效价 | 第39页 |
| ·细胞融合的效率 | 第39页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆筛选 | 第39-40页 |
| ·小鼠腹水中单克隆抗体的滴度和亚型鉴定结果 | 第40页 |
| ·Western Blotting 的实验分析结果 | 第40-42页 |
| ·五龄期家蚕血淋巴中PTSP的初步测定 | 第42-44页 |
| ·抗 PTSP 多抗对五龄期家蚕血淋巴 Dot blot 分析结果 | 第42页 |
| ·抗 PTSP 单抗对五龄期家蚕血淋巴 Western blotting 分析结果 | 第42-44页 |
| 第二部分 蓖麻蚕脑 cDNA 文库的构建及免疫筛选 | 第44-70页 |
| 2 材料与方法 | 第44-59页 |
| ·材料 | 第44-46页 |
| ·试剂 | 第44页 |
| ·试剂盒 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44-45页 |
| ·主要溶液 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-59页 |
| ·动物的饲养与取材 | 第46-47页 |
| ·蓖麻蚕幼虫 5 龄 2 天脑总蛋白的提取及浓度测定 | 第47页 |
| ·多抗对蓖麻蚕幼虫 5 龄 2 天脑总蛋白 Western Blotting 分析 | 第47-48页 |
| ·TRIzol 试剂盒抽提蓖麻蚕 5 龄 2 天虫脑中总 RNA | 第48-49页 |
| ·mRNA的纯化 | 第49-51页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第51-52页 |
| ·cDNA 第二链的合成 | 第52页 |
| ·蛋白酶 K 酶切 | 第52-53页 |
| ·Sfi I 酶切 | 第53页 |
| ·cDNA 的 CHROMA SPIN-400 分离 | 第53-54页 |
| ·cDNA 与 TriplEx2 载体的连接及包装 | 第54-55页 |
| ·原文库滴度与重组率的测定 | 第55-56页 |
| ·文库的扩增及扩增文库滴度与重组率的测定 | 第56页 |
| ·cDNA 文库的免疫筛选 | 第56-58页 |
| ·阳性菌斑的处理及滴度测定 | 第58-59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-65页 |
| ·蓖麻蚕脑 cDNA 文库的构建 | 第59-64页 |
| ·cDNA 文库的免疫筛选 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-69页 |
| ·单抗有效的筛选方法的建立 | 第65-66页 |
| ·家蚕 Bombyx mori 抑前胸腺肽单抗的制备结果分析 | 第66页 |
| ·多抗与单抗对五龄期家蚕血淋巴中 PTSP 的初步测定 | 第66-67页 |
| ·蓖麻蚕脑 cDNA 文库的构建 | 第67-68页 |
| ·cDNA 文库的免疫筛选 | 第68-69页 |
| 5 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 读学位期间发表的论文 | 第82页 |
