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三疣梭子蟹Crustin抗菌肽的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
引言第10-11页
第一章 抗菌肽研究进展第11-24页
   ·抗菌肽研究概况第11-14页
     ·抗菌肽的结构特征及其分类第11-13页
     ·几种获取抗菌肽的途径第13-14页
   ·三疣梭子蟹抗菌肽研究概况第14-19页
     ·三疣梭子蟹的种类和价值第14页
     ·三疣梭子蟹抗菌肽 Crustins 简介第14-15页
     ·抗菌肽 Crustins 的定义第15-16页
     ·抗菌肽 Crustin 的结构第16-17页
     ·抗菌肽 Crustins 的类型第17-19页
     ·抗菌肽 Crustins 的抑菌效果第19页
   ·抗菌肽基因表达系统研究第19-22页
     ·抗菌肽基因在大肠杆菌中的表达第20页
     ·抗菌肽基因在酿酒酵母中的表达第20-22页
       ·常用酵母表达系统第21-22页
   ·结语第22-24页
第二章 重组抗菌肽 rCrustinⅠ 的纯化第24-35页
   ·材料与方法第24-28页
     ·菌株与试剂第24页
     ·实验方法第24-28页
   ·实验结果第28-33页
     ·沉淀发酵液中 rCrustinⅠ 硫酸铵饱和度的选择第28-29页
     ·弱酸性阳离子树脂层析富集重组抗菌肽 rCrustinⅠ第29-30页
     ·重组抗菌肽 rCrustinⅠ 的反相色谱柱纯化与蛋白电泳分析第30-32页
     ·重组抗菌肽 rCrustinⅠ 的蛋白含量测定第32-33页
   ·讨论第33-35页
第三章 抗菌肽 rCrustinⅠ 型的生物活性的研究第35-45页
   ·材料与方法第35-37页
     ·菌株与试剂第35页
     ·实验方法第35-37页
   ·实验结果第37-43页
     ·重组抗菌肽 rCrustinⅠ 的耐热及耐酸性质测定第37-39页
     ·rCrustinⅠ 抑菌谱的检测和最低抑菌浓度(MⅠC)的测定第39-42页
     ·rCrustinⅠ 蛋白酶抑制剂活性的测定第42-43页
   ·讨论第43-45页
第四章 三疣梭子蟹 Crustin 基因选择性剪接的研究第45-54页
   ·材料与方法第45-50页
     ·菌株与试剂第45页
     ·实验方法第45-50页
   ·实验结果第50-53页
     ·三疣梭子蟹 Ⅲ 型 Crustin cDNA 克隆的筛选第50-51页
     ·三疣梭子蟹 gDNA 的克隆第51-53页
   ·讨论第53-54页
第五章 Crustin 基因两个选择性剪接体基因表达的研究第54-70页
   ·材料与方法第54-57页
     ·实验材料第54页
     ·PCR 引物设计第54-55页
     ·实验方法第55-57页
   ·实验结果第57-69页
     ·三疣梭子蟹总 RNA 的完整性及纯度检测第57-58页
     ·内参基因和目的基因的 PCR 扩增以及引物对之间竞争的控制第58-60页
     ·半定量 RT-PCR 循环数的确定第60-63页
       ·目的基因 CrustinⅠ 半定量 RT-PCR 循环数的确定第60-62页
       ·目的基因 CrustinⅢ 半定量 RT-PCR 循环数的确定第62-63页
     ·CrustinⅠ 和 CrustinⅢ 在不同组织和诱导前后的表达研究第63-69页
       ·CrustinⅠ 和 CrustinⅢ 在不同组织中的表达研究第63-66页
       ·不同诱导时间段 CrustinⅠ 和 CrsutinⅢ 在血液中的表达量研究第66-69页
   ·讨论第69-70页
结论第70-71页
参考文献第71-78页
致谢第78-79页
在读期间发表的学术论文及研究成果第79页

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