| 目录 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-55页 |
| 第一节 螺旋藻基因工程研究进展 | 第13-20页 |
| 1．1 螺旋藻基因的克隆、测序、功能指定及基因表达研究有所进展 | 第14-15页 |
| 1．2 用于螺旋藻基因工程研究的工具酶、载体、选择标记及外源基因的导入方法有新进展 | 第15-18页 |
| 1．3 在螺旋藻中分离到质粒，对经济藻类的遗传工程改良具有积极意义 | 第18-19页 |
| 1．4 展望 | 第19-20页 |
| 第二节 藻胆蛋白的生理及生化特性 | 第20-28页 |
| 2．1 藻胆蛋白的发现 | 第20-21页 |
| 2．2 藻胆蛋白的种类与分子组成 | 第21-22页 |
| 2．3 藻胆蛋白的基本构建单位及在溶液中的存在形式 | 第22-23页 |
| 2．4 藻胆蛋白在藻体细胞内可以作为储存蛋白 | 第23页 |
| 2．5 藻胆蛋白应用研究 | 第23-26页 |
| 2．6 人工组建藻胆蛋白的研究 | 第26-28页 |
| 2．6．1 藻胆蛋白色基的生物合成 | 第26-27页 |
| 2．6．2 藻胆蛋白脱辅基蛋白和色基间的交联 | 第27-28页 |
| 第三节 藻胆蛋白的分子生物学和基因工程研究 | 第28-31页 |
| 3．1 藻胆蛋白分子生物学研究 | 第28-29页 |
| 3．2 藻胆蛋白基因工程研究 | 第29-31页 |
| 第四节 藻蓝蛋白的制备方法 | 第31-35页 |
| 4．1 藻蓝蛋白的生理功能 | 第31页 |
| 4．2 藻蓝蛋白的制备方法 | 第31-35页 |
| 第五节 毕赤酵母表达系统研究进展 | 第35-44页 |
| 5．1 毕赤酵母的生物学特性 | 第35页 |
| 5．2 利用毕赤酵母表达外源蛋白的优点 | 第35-36页 |
| 5．3 载体类型的发展 | 第36-37页 |
| 5．4 载体元件的发展 | 第37-38页 |
| 5．5 受体菌 | 第38页 |
| 5．6 整合拷贝数 | 第38-39页 |
| 5．7 实现高效表达的几个有关问题 | 第39-44页 |
| 参考文献 | 第44-55页 |
| 第二章 本论文的研究目的及实验方案 | 第55-57页 |
| 第三章 极大螺旋藻藻蓝蛋白基因的克隆及其进化分析 | 第57-84页 |
| 3．1 材料与方法 | 第58-69页 |
| 3．1．1 藻株与菌株 | 第58页 |
| 3．1．2 主要试剂 | 第58-59页 |
| 3．1．3 主要实验仪器 | 第59-60页 |
| 3．1．4 极大螺旋藻生长培养基和培养条件 | 第60页 |
| 3．1．5 LB培养基 | 第60页 |
| 3．1．6 极大螺旋藻基因组DNA的提取 | 第60-61页 |
| 3．1．7 重组质粒PBPC的构建 | 第61-62页 |
| 3．1．8 藻蓝蛋白基因的扩增 | 第62页 |
| 3．1．9 PCR产物3’突出端补平与产物回收 | 第62-63页 |
| 3．1．10 PCR回收产物与载体平末端连接 | 第63页 |
| 3．1．11 连接产物转化 | 第63-64页 |
| 3．1．12 转化子的筛选 | 第64-65页 |
| 3．1．13 重组质粒的鉴定 | 第65-69页 |
| 3．2 结果 | 第69-80页 |
| 3．2．1 极大螺旋藻基因组DNA的提取 | 第69-70页 |
| 3．2．2 藻蓝蛋白基因的扩增 | 第70-73页 |
| 3．2．3 藻蓝蛋白基因序列分析 | 第73页 |
| 3．2．4 氨基酸序列分析 | 第73-76页 |
| 3．2．5 密码子频率分析 | 第76-80页 |
| 3．3 讨论 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-84页 |
| 第四章 极大螺旋藻藻蓝蛋白基因在巴斯德毕赤酵母菌株X-33中表达的研究 | 第84-105页 |
| 4．1 材料与方法 | 第85-93页 |
| 4．1．1 菌种质粒和主要试剂 | 第85页 |
| 4．1．2 培养基 | 第85-86页 |
| 4．1．3 表达载体的构建 | 第86-87页 |
| 4．1．4 藻蓝蛋白基因的扩增与定点突变 | 第87页 |
| 4．1．5 毕赤酵母的转化 | 第87-88页 |
| 4．1．6 转化子的初步筛选 | 第88页 |
| 4．1．7 藻蓝蛋白基因的诱导表达 | 第88-89页 |
| 4．1．8 Dot-blotting检测藻蓝蛋白基因产物的表达 | 第89页 |
| 4．1．9 PCR检测PC39和PC20两菌株藻蓝蛋白基因 | 第89-90页 |
| 4．1．10 SDS-PAGE检测藻蓝蛋白基因的表达 | 第90-91页 |
| 4．1．11 Western blotting检测藻蓝蛋白基因表达产物 | 第91-93页 |
| 4．2 结果 | 第93-101页 |
| 4．2．1 重组质粒构建 | 第93-95页 |
| 4．2．2 转化子的初筛结果 | 第95-97页 |
| 4．2．3 Dot-blotting复筛结果 | 第97页 |
| 4．2．4 PCR鉴定PC20和PC39两菌株藻蓝蛋白基因 | 第97-98页 |
| 4．2．5 SDS-PAGE和Western-blotting鉴定结果 | 第98-101页 |
| 4．3 讨论 | 第101-104页 |
| 参考文献 | 第104-105页 |
| 第五章 重组巴斯德毕赤酵母工程菌PC39发酵生产藻蓝蛋白的初步研究 | 第105-116页 |
| 5．1 材料与方法 | 第105-110页 |
| 5．1．1 菌种及保存 | 第105-106页 |
| 5．1．2 培养基 | 第106页 |
| 5．1．3 实验方法 | 第106页 |
| 5．1．4 分析方法 | 第106-110页 |
| 5．2 结果 | 第110-112页 |
| 5．3 讨论 | 第112-115页 |
| 参考文献 | 第115-116页 |
| 第六章 结论 | 第116-119页 |
| 附录 藻蓝蛋白基因测序图谱 | 第119-122页 |
