中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-9页 |
缩写表 | 第9-10页 |
目录 | 第10-12页 |
第一章 引言 | 第12-31页 |
1. 文献综述 | 第12-27页 |
1.1. 植物对非生物逆境的反应 | 第12-14页 |
1.2. 非生物逆境相关基因 | 第14-15页 |
1.3. 植物逆境信号传导 | 第15页 |
1.4. 植物非生物逆境信号通路的多样性 | 第15-16页 |
1.5. 非生物逆境信号中的受体 | 第16-17页 |
1.6. 胞间第二信号分子及其在信号传导途径中的作用 | 第17-20页 |
1.7. 逆境响应基因 | 第20-22页 |
1.8. 逆境信号传导通路 | 第22-24页 |
1.9. ABA与逆境信号传导 | 第24-27页 |
2. 研究背景及意义 | 第27-29页 |
3. 实验设计 | 第29-31页 |
第二章 玉米幼胚cDNA文库的构建筛选及序列分析 | 第31-49页 |
1. 材料与方法 | 第31-35页 |
1.1. 材料 | 第31-32页 |
1.2. 方法 | 第32-35页 |
1.2.1. 玉米材料的处理 | 第32页 |
1.2.2. RNA的提取和mRNA的分离及电泳 | 第32页 |
1.2.3. 玉米幼胚17dpp、21dppcDNA文库的构建及扩增 | 第32-33页 |
1.2.4. 4mer ABRE元件的构建 | 第33页 |
1.2.5. 4mer mutant ABRE元件的构建 | 第33页 |
1.2.6. 诱饵载体和挽救载体的构建 | 第33页 |
1.2.7. 酵母感受态细胞的制备及转化 | 第33-34页 |
1.2.8. 酵母质粒的提取及检测 | 第34页 |
1.2.9. 玉米幼胚17dpp、21dpp cDNA文库的筛选 | 第34-35页 |
2. 结果与分析 | 第35-45页 |
2.1. 玉米17dpp、21dpp cDNA文库的构建 | 第35-37页 |
2.2. 17dpp、21dpp cDNA文库的筛选 | 第37-38页 |
2.3. ABPs(ABRE Binding Proteins)的序列分析 | 第38-45页 |
3. 讨论 | 第45-49页 |
第三章 ABPs的结合特异性及表达特异性分析 | 第49-67页 |
1. 材料与方法 | 第49-54页 |
1.1. 材料 | 第49页 |
1.2. 方法 | 第49-54页 |
1.2.1. 4mer mutant ABRE元件的构建 | 第49-50页 |
1.2.2. 挽救载体的构建 | 第50页 |
1.2.3. 酵母感受态细胞的制备及转化 | 第50页 |
1.2.4. Northern blotting | 第50-51页 |
1.2.5. ABPs基因在不同逆境条件下的表达分析 | 第51-52页 |
1.2.6. RT-PCR | 第52-54页 |
2. 结果与分析 | 第54-65页 |
2.1. ABPs与ABRE元件的体内结合特异性分析 | 第54-55页 |
2.2. ABP2、ABP9在胚中的Northern blotting分析 | 第55-56页 |
2.3. ABPs的表达特异性分析 | 第56-65页 |
3. 讨论 | 第65-67页 |
第四章 ABPs全长基因的获得及序列分析 | 第67-79页 |
1. 材料与方法 | 第67-69页 |
1.1. 材料 | 第67-68页 |
1.2. 方法 | 第68-69页 |
1.2.1. 总RNA提取 | 第68页 |
1.2.2. 5'RACE | 第68页 |
1.2.3. PCR扩增 | 第68-69页 |
2. 结果与分析 | 第69-76页 |
2.1. ABP2基因全长的获得及分析 | 第69-72页 |
2.2. ABP4基因全长的获得及分析 | 第72-74页 |
2.3. ABP9基因全长的获得及分析 | 第74-76页 |
3. 讨论 | 第76-79页 |
第五章 ABP2、ABP4、ABP9的功能分析 | 第79-96页 |
1. 材料与方法 | 第79-85页 |
1.1. 材料 | 第79-80页 |
1.2. 方法 | 第80-85页 |
1.2.1. 融合蛋白表达载体的构建 | 第80页 |
1.2.2. 融合蛋白的表达及纯化 | 第80页 |
1.2.3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第80-81页 |
1.2.4. 凝胶阻滞实验(EMSA) | 第81-82页 |
1.2.5. 酵母细胞中转录激活试验 | 第82页 |
1.2.6. 玉米细胞中的转录激活功能试验 | 第82-83页 |
1.2.7. ABP9基因的拟南芥转化 | 第83-85页 |
2. 结果与分析 | 第85-94页 |
2.1. ABPs与ABRE元件的结合特异性分析 | 第85-88页 |
2.2. ABPs的转录激活功能分析 | 第88-91页 |
2.3. ABPs的生理功能分分析 | 第91-94页 |
3. 讨论 | 第94-96页 |
结论- | 第96-100页 |
参考文献 | 第100-109页 |
附录1 查新报告 | 第109-110页 |
附录2 《科学通报》接受的文章 | 第110-117页 |
附录3 《Chinese Bulletin))接受的文章 | 第117-127页 |
致谢 | 第127-126页 |
作者简历 | 第126-127页 |