| 英文缩略词 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-11页 |
| 英文摘要 | 第11-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 1． 材料和方法 | 第17-31页 |
| 1．1． 试剂 | 第17-18页 |
| 1．1．1． 化学物 | 第17页 |
| 1．1．2． 酶 | 第17-18页 |
| 1．1．3． 其它 | 第18页 |
| 1．2． 培养基 | 第18-19页 |
| 1．2．1． 细菌培养基 | 第18-19页 |
| 1．2．2． 细胞培养基 | 第19页 |
| 1．3． 常用缓冲液 | 第19-20页 |
| 1．4． 细菌和细胞 | 第20-21页 |
| 1．4．1． 细菌 | 第20页 |
| 1．4．2． 细胞 | 第20-21页 |
| 1．5． 质粒 | 第21页 |
| 1．6． 抗体 | 第21页 |
| 1．7． 组织标本 | 第21-22页 |
| 1．8． DNA操作 | 第22-25页 |
| 1．8．1． DNA抽提 | 第22页 |
| 1．8．1．1． 质粒抽提 | 第22页 |
| 1．8．1．2． 组织、细胞基因组抽提 | 第22页 |
| 1．8．2． DNA的酶切操作 | 第22页 |
| 1．8．3． 转化感受态细菌 | 第22-23页 |
| 1．8．4． 细菌的保存 | 第23页 |
| 1．8．5． 感受态的制备 | 第23页 |
| 1．8．6． 质粒DNA测序 | 第23页 |
| 1．8．7． 寡核苷酸合成 | 第23-24页 |
| 1．8．8． 质粒DNA的大量制备 | 第24页 |
| 1．8．9． Southern blot检测基因甲基化 | 第24-25页 |
| 1．8．9．1． 标记放射性探针 | 第24页 |
| 1．8．9．2． DNA电泳、转膜、杂交、洗膜、显影 | 第24-25页 |
| 1．9． RNA操作 | 第25-26页 |
| 1．9．1． 一步法抽提组织总RNA | 第25页 |
| 1．9．2． Northern blot分析 | 第25-26页 |
| 1．9．2．1． 标记放射性探针 | 第25页 |
| 1．9．2．2． RNA电泳、转膜、杂交、洗膜、显影 | 第25-26页 |
| 1．10． PCR方法扩增DNA片段 | 第26-27页 |
| 1．10．1． PCR方法扩增DNA片段 | 第26页 |
| 1．10．2． RT-PCR | 第26页 |
| 1．10．3． PCR方法重组基因片段 | 第26-27页 |
| 1．10．4． PCR-SSCP | 第27页 |
| 1．11． 原位杂交 | 第27-28页 |
| 1．11．1． 石蜡包埋、切片准备 | 第27页 |
| 1．11．2． 体外转录地高辛标记的RNA探针 | 第27页 |
| 1．11．3． 组织原位杂交 | 第27-28页 |
| 1．12． 原核表达 | 第28页 |
| 1．12．1． 基因的亚克隆 | 第28页 |
| 1．12．2． 小量诱导表达鉴定 | 第28页 |
| 1．12．3． 大量制备、纯化原核表达蛋白 | 第28页 |
| 1．13． 蛋白检测 | 第28-29页 |
| 1．13．1． 蛋白定量 | 第28页 |
| 1．13．2． SDS-PAGE电泳 | 第28页 |
| 1．13．3． Western blot检测 | 第28-29页 |
| 1．13．4． ELISA | 第29页 |
| 1．13．5． 流式细胞术 | 第29页 |
| 1．14． 细胞培养 | 第29-30页 |
| 1．14．1． 常规培养 | 第29页 |
| 1．14．2． 细胞转染 | 第29-30页 |
| 1．15． 免疫组织化学 | 第30页 |
| 1．16． 免疫荧光 | 第30页 |
| 1．17． 多克隆抗体的制备及纯化 | 第30页 |
| 1．17．1． 原核表达蛋白免疫家兔 | 第30页 |
| 1．17．2．核酸疫苗制备多克隆抗体 | 第30页 |
| 1．18． 细胞周期和凋亡检测 | 第30-31页 |
| 2． 结果 | 第31-53页 |
| 2．1． gpc3/mxr7基因在肝癌及其它肿瘤中的表达 | 第31-36页 |
| 2．1．1． gpc3/mxr7在肝癌中的表达 | 第31-34页 |
| 2．1．1．1． Northern blot检测肝癌组织gpc3/mxr7基因的表达 | 第31-33页 |
| 2．1．1．2． 原位杂交检测原发性肝癌组织 | 第33-34页 |
| 2．1．2． gpc3/mxr7基因mRNA在肾癌组织及肾癌细胞中的转录 | 第34-35页 |
| 2．1．3． gpc3/mxr7基因mRNA在其它肿瘤中的转录 | 第35-36页 |
| 2．2． gpc3/mxr7基因在肿瘤中的表达调控 | 第36-39页 |
| 2．2．1． gpc3/mxr7基因启动子区的甲基化修饰检测 | 第36-37页 |
| 2．2．2． PCR-SSCP方法检测突变 | 第37-39页 |
| 2．3． gpc3/mxr7基因原核表达及多克隆抗体的制备 | 第39-44页 |
| 2．3．1． 核酸疫苗制备gpc3/mxr7基因多克隆抗体 | 第39-41页 |
| 2．3．1．1． gpc3/mxr7基因核酸疫苗载体的制备 | 第39页 |
| 2．3．1．2． gpc3/mxr7基因多克隆抗体的制备 | 第39-41页 |
| 2．3．2． gpc3/mxr7基因原核表达及多克隆抗体的制备 | 第41-44页 |
| 2．3．2．1． gpc3/mxr7基因的原核表达、鉴定 | 第41-43页 |
| 2．3．2．2． 抗gpc3/mxr7基因多克隆抗体的制备 | 第43-44页 |
| 2．4． gpc3/mxr7基因细胞生物学研究 | 第44-53页 |
| 2．4．1． 带绿色荧光蛋白的真核表达gpc3/mxr7基因的重组载体制备 | 第44-45页 |
| 2．4．2． 重组质粒转染293T、SK-Hep1、786-O细胞，观察gpc3/mxr7基因对细胞生物学行为的影响 | 第45-53页 |
| 3． 讨论 | 第53-66页 |
| 3．1． gpc3/mxr7基因在肝癌及其它肿瘤中的表达 | 第53-55页 |
| 3．2． gpc3/mxr7基因在肝癌中的表达调控及突变检测 | 第55-58页 |
| 3．2．1． gpc3/mxr7基因在肝癌中的表达调控 | 第55-57页 |
| 3．2．2． gpc3/mxr7基因在肝癌中突变检测 | 第57-58页 |
| 3．3． gpc3/mxr7基因的表达及多克隆抗体的制备 | 第58-61页 |
| 3．3．1． 核酸疫苗制备gpc3/mxr7基因多克隆抗体 | 第58-60页 |
| 3．3．2． gpc3/mxr7基因原核表达及多克隆抗体的制备 | 第60-61页 |
| 3．4． gpc3/mxr7基因细胞生物学研究 | 第61-66页 |
| 研究工作总结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 综述： Glypican3/mxr7基因研究进展 | 第73-89页 |
| 研究生期间参加的工作和形成的文章 | 第89-90页 |
| 附录 | 第90-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
