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花生PEPCase基因反义表达载体构建与遗传转化高效基因型的筛选

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
1. 前言第13-38页
   ·磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的功能和基因研究第13-28页
     ·PEP 羧化酶的功能研究第14-15页
     ·PEPCase 基因结构的研究第15-21页
     ·磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶催化与调节功能的分子机制第21-25页
     ·磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶第25-28页
     ·磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶研究前景第28页
   ·反义RNA 技术的原理和应用第28-32页
     ·反义 RNA 技术的原理第28-29页
     ·反义RNA 技术在植物改良上的应用第29-32页
   ·农杆菌介导花生遗传转化的研究第32-35页
     ·农杆菌介导遗传转化的原理第32-33页
     ·影响农杆菌介导基因转化效率的因素第33-35页
   ·γ-维生素E甲基转移酶基因的作用第35-36页
   ·Bar 基因的作用第36-37页
   ·本研究的目的意义第37-38页
2. 材料与方法第38-52页
   ·PEPCase基因cDNA片段克隆及反义表达载体构建试验第38-46页
     ·植物材料第38页
     ·主要仪器第38页
     ·主要试剂第38页
     ·菌株和质粒第38页
     ·PCR 引物第38页
     ·试验方法第38-46页
   ·花生遗传转化高效基因型的筛选第46-52页
     ·植物材料第46页
     ·质粒和菌种第46-47页
     ·PCR 检测转基因植株引物第47-48页
     ·供试培养基第48页
     ·仪器设备第48页
     ·试验方法第48-51页
     ·计算公式第51-52页
3. 结果和分析第52-68页
   ·花生PEPCase 基因cDNA 片段克隆及反义表达载体的构建第52-58页
     ·花生幼果总RNA 的提取结果第52页
     ·PEPCase基因片段的扩增及重组克隆的酶切鉴定第52-54页
     ·PEPCase 基因cDNA 片段的序列分析第54-55页
     ·PEPCase 基因反义表达载体的构建第55-58页
   ·花生遗传转化高效基因型的筛选第58-68页
     ·品种间芽丛诱导率及愈伤诱导率的差异第58-61页
     ·品种间外植体分化率及再生率的差异第61-65页
     ·品种间基因转化率差异第65-66页
     ·抗PPT转基因植株的PCR检测第66-68页
4. 讨论第68-71页
   ·花生PEPCase 基因cDNA 片段克隆技术分析第68页
   ·反义PEPCase 基因表达载体的应用价值第68-69页
   ·不同花生类型间遗传转化率的差异分析第69页
   ·避免试管苗玻璃化及外植体褐化的方法探索第69-70页
   ·试管苗衰老机制的初步探讨第70-71页
5. 结论第71-72页
   ·花生PEPCase 基因cDNA 片段克隆及反义表达载体的构建第71页
   ·花生遗传转化高效基因型的筛选第71-72页
参考文献第72-80页
附录1:主要化学试剂及缓冲液配制第80-81页
附录2:常用培养基配方第81-83页
附录3:本试验所用质粒载体第83-84页
图版第84-85页
致谢第85-86页
攻读学位期间发表论文情况第86页

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