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氟苯尼考、安普霉素药物残留的ELISA检测方法研究

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-14页
引言第14-30页
 1 兽药残留及监控第14-21页
   ·兽药残留及危害第14-18页
     ·兽药残留定义及现状第14-16页
     ·兽药残留产生的原因第16-17页
     ·兽药残留的危害第17-18页
   ·兽药残留的控制第18-21页
     ·从畜牧生产环节控制药物残留第19-20页
     ·加快兽药残留的立法,完善相应的配套法规第20-21页
 2 兽药残留检测技术第21-23页
   ·微生物检测法第21-22页
   ·理化检测法第22页
   ·免疫分析法第22-23页
 3 氟苯尼考作用机理、残留毒性与限量标准第23-27页
   ·药理特性与毒副作用第23-25页
   ·氟苯尼考抗菌机理第25页
   ·残留限量标准与检测第25-27页
 4 安普霉素作用机理、残留毒性与限量标准第27-29页
   ·药理特性与毒副作用第27页
   ·安普霉素抗菌机理第27-28页
   ·残留限量标准与检测第28-29页
 5 研究目的与意义第29-30页
实验一 氟苯尼考、安普霉素人工抗原的合成与鉴定第30-42页
 1 材料与方法第30-35页
   ·材料第30-31页
     ·试剂第30页
     ·仪器第30-31页
     ·实验动物第31页
   ·方法第31-35页
     ·氟苯尼考实验方法第31-33页
     ·安普霉素实验方法第33-35页
 2 结果与分析第35-39页
   ·氟苯尼考人工抗原的鉴定第35-37页
     ·SDS-PAGE 鉴定结果第35页
     ·紫外扫描鉴定结果第35-36页
     ·红外扫描鉴定结果第36页
     ·人工抗原结合比第36-37页
     ·动物免疫试验结果第37页
   ·安普霉素人工抗原的鉴定第37-39页
     ·SDS-PAGE 鉴定结果第37页
     ·IR 鉴定结果第37-38页
     ·人工抗原结合比第38-39页
     ·动物免疫实验结果第39页
 3 讨论第39-41页
   ·氟苯尼考人工抗原合成与鉴定第39-40页
   ·安普霉素人工抗原合成与鉴定第40-41页
 4 小结第41-42页
实验二 氟苯尼考和安普霉素抗体的制备及鉴定第42-53页
 1 材料与方法第42-48页
   ·材料第42页
     ·试剂第42页
     ·仪器第42页
     ·实验动物第42页
   ·方法第42-48页
     ·抗体的制备第43-44页
     ·间接竞争ELISA 测定抗血清效价第44-45页
     ·抗血清特异性的鉴定第45页
     ·抗血清的纯化第45-46页
     ·免疫球蛋白IgG 的纯度鉴定第46-47页
     ·抗体特异性的鉴定第47-48页
 2 结果与分析第48-51页
   ·抗血清效价的测定第48页
   ·抗血清特异性测定第48-49页
   ·抗体纯度的鉴定第49-50页
   ·抗体特异性鉴定第50-51页
 3 讨论第51-52页
 4 小结第52-53页
实验三 鸡肉中氟苯尼考ELISA 检测方法的建立及应用第53-69页
 1 材料与方法第53-57页
   ·材料第53-54页
     ·试剂第53-54页
   ·方法第54-57页
     ·间接竞争ELISA条件的优化第54-56页
     ·标准曲线的建立第56页
     ·重复性试验第56页
     ·交叉反应率的测定第56页
     ·组织样品的提取第56-57页
     ·准确度的测定第57页
     ·灵敏度的测定第57页
     ·LC-MS 法与 ELISA 法比较第57页
     ·鸡肉样品的测定第57页
 2 结果与分析第57-65页
   ·间接ELISA 优化结果第57-61页
     ·包被抗原和抗血清工作浓度的确定第57-58页
     ·包被抗原最佳包被时间的选择第58-59页
     ·封闭液的选择第59页
     ·封闭时间的选择第59-60页
     ·酶标二抗稀释度和作用时间的选择第60页
     ·底物显色时间的选择第60-61页
     ·底物中 H_2O_2 浓度的选择第61页
     ·抗原抗体最佳竞争反应时间和温度的选择第61页
   ·标准曲线的建立第61-62页
   ·重复性试验测定第62-63页
   ·交叉反应率的测定第63-64页
   ·准确度的测定第64页
   ·灵敏度的确定第64页
   ·ELISA 与 LC-MS 结果的比较第64-65页
   ·样品测定结果第65页
 3 讨论第65-67页
   ·间接竞争 ELISA 的反应条件第65-66页
   ·间接竞争 ELISA 检测的灵敏度第66-67页
   ·间接竞争 ELISA 的目的和意义第67页
 4 小结第67-69页
实验四 鸡肉中安普霉素ELISA 检测方法的建立及应用第69-80页
 1 材料与方法第69-72页
   ·试剂第69页
   ·方法第69-72页
     ·间接 ELISA 最佳反应条件的确定第69-71页
     ·抗体间接竞争标准曲线的建立第71页
     ·重复性试验第71页
     ·特异性测定第71页
     ·组织样品的提取第71页
     ·回收率的测定第71-72页
     ·LC-MS 法与 ELISA 法比较第72页
     ·鸡肉样品的测定第72页
 2 结果与分析第72-78页
   ·包被抗原和抗血清工作浓度的确定第72-73页
   ·抗原最佳包被时间和温度的确定第73页
   ·封闭液的确定第73页
   ·抗原抗体最佳作用时间的确定第73-74页
   ·显色时间和温度的确定第74页
   ·标准曲线的绘制第74-75页
   ·重复性试验测定第75-76页
   ·特异性测定第76页
   ·添加回收率的测定第76-77页
   ·LC-MS 与ELISA 分析结果的比较第77页
   ·样品测定结果第77-78页
 3 讨论第78-79页
   ·方法的灵敏度第78页
   ·方法的重复性第78-79页
   ·方法的准确度第79页
 4 小结第79-80页
参考文献第80-87页
附录第87-89页
致谢第89-90页
攻读学位期间发表论文情况第90页

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