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鸭肠炎病毒US2蛋白细胞定位及感染相关功能的研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-12页
1 引言第12-25页
   ·鸭病毒性肠炎概述第12-18页
     ·临床症状与病理剖检第12-13页
     ·诊断第13-16页
     ·鸭病毒性肠炎的防治第16-18页
     ·存在的问题及防治措施第18页
   ·鸭肠炎病毒研究进展第18-23页
     ·鸭肠炎病毒的生物学特性第18-21页
     ·鸭肠炎病毒的复制第21页
     ·鸭肠炎病毒的分子生物学特性第21-23页
   ·疱疹病毒US2蛋白的特性、功能及应用第23页
     ·疱疹病毒US2蛋白的特性第23页
     ·疱疹病毒US2蛋白的生物学功能第23页
   ·本研究的目的与意义第23-25页
2 材料与方法第25-34页
   ·材料第25-27页
     ·实验动物第25页
     ·毒株、菌株、细胞和载体第25页
     ·引物第25页
     ·试剂第25-26页
     ·主要溶液配制第26-27页
     ·主要试验器材及仪器设备第27页
   ·鸭肠炎病毒的增殖与提纯第27-28页
     ·病毒的增殖第27页
     ·病毒的提纯第27页
     ·电镜观察第27-28页
   ·鸭肠炎病毒us2基因的克隆第28-30页
     ·DEV基因组DNA的提取第28页
     ·us2基因的扩增第28页
     ·PCR产物的克隆与转化第28页
     ·重组阳性质粒的筛选与鉴定第28-29页
     ·鸭肠炎病毒us2基因及其编码蛋白的生物信息学分析第29-30页
   ·鸭肠炎病毒US2蛋白的原核表达与鉴定第30-31页
     ·us2基因表达载体的构建及鉴定第30页
     ·目的基因的诱导表达及纯化第30-31页
     ·表达产物的Western blot分析第31页
   ·兔抗US2蛋白高免血清的制备及鉴定第31-32页
     ·多克隆抗体的制备第31-32页
     ·多克隆抗体效价测定第32页
     ·兔抗US2血清反应性的鉴定第32页
   ·鸭肠炎病毒US2蛋白细胞定位的研究第32-33页
   ·鸭肠炎病毒US2蛋白感染相关功能的研究第33-34页
     ·鸭肠炎病毒US2蛋白对病毒吸附的影响第33页
     ·鸭肠炎病毒US2蛋白对病毒侵入的影响第33页
     ·鸭肠炎病毒US2蛋白对病毒细胞与细胞间传播的影响第33-34页
3 结果第34-48页
   ·超离粗纯鸭肠炎病毒的电镜结果第34页
   ·鸭肠炎病毒us2基因的克隆第34-35页
     ·鸭肠炎病毒us2基因的扩增第34-35页
     ·重组克隆载体的鉴定第35页
   ·鸭肠炎病毒us2基因及其编码产物的生物信息学分析第35-40页
     ·us2基因及其编码产物的同源性分析第35-37页
     ·US2蛋白的结构预测与功能性基序分析第37-39页
     ·US2蛋白的抗原性分析第39-40页
   ·鸭肠炎病毒US2蛋白的原核表达与鉴定第40-42页
     ·重组表达载体的构建及鉴定第40页
     ·目的基因的诱导表达及纯化第40-41页
     ·表达产物的抗原性分析第41-42页
   ·兔抗US2蛋白高免血清的制备及鉴定第42-44页
     ·多抗血清效价测定第42-43页
     ·兔抗US2血清反应原性的鉴定第43-44页
   ·鸭肠炎病毒US2蛋白的定位第44-45页
   ·鸭肠炎病毒US2蛋白的感染相关功能研究第45-48页
     ·鸭肠炎病毒US2蛋白对病毒吸附的影响第45-46页
     ·鸭肠炎病毒US2蛋白对病毒侵入的影响第46页
     ·鸭肠炎病毒US2蛋白对病毒细胞与细胞间传播的影响第46-48页
4 讨论第48-51页
   ·DEV us2基因编码产物的生物信息学分析第48页
   ·鸭肠炎病毒粒子的初步纯化第48-49页
   ·DEV us2基因表达、纯化及多抗血清的制备第49页
   ·鸭肠炎病毒US2蛋白定位的研究第49页
   ·鸭肠炎病毒US2蛋白感染相关功能的研究第49-51页
5 结论第51-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-59页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第59页

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