摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-25页 |
1 随机诱变技术 | 第12页 |
2 基于序列同源性的重组技术 | 第12-18页 |
·DNA shuffling | 第12-14页 |
·交错延伸技术 | 第14-15页 |
·体外随机引发重组 | 第15-16页 |
·临时模板随机嵌合 | 第16-17页 |
·酵母重组增强组合文库 | 第17页 |
·简并寡核苷酸基因改组 | 第17-18页 |
3 非同源性重组技术 | 第18-22页 |
·非同源重组技术 | 第18-19页 |
·渐进切割 | 第19页 |
·SHIPREC技术 | 第19页 |
·随机多重组PCR | 第19-20页 |
·改变DNA长度的随机突变 | 第20页 |
·随机插入/缺失突变 | 第20-21页 |
·叠加饱和诱变 | 第21-22页 |
4 体内随机诱变 | 第22-24页 |
5 课题研究的目的和意义 | 第24-25页 |
第二章 Taq DNA聚合酶的定点诱变及对保真度的影响 | 第25-39页 |
1 前言 | 第25页 |
2 材料与方法 | 第25-31页 |
·材料 | 第25-28页 |
·方法 | 第28-31页 |
3 结果与讨论 | 第31-38页 |
·新的Taq DNA聚合酶突变体Taq-V661H和Taq-N666R的获得 | 第31-34页 |
·低保真Taq-V661H和Taq-N666R酶的制备 | 第34页 |
·Taq-V661H和Taq-N666R突变体活性和保真度分析 | 第34-38页 |
4 小结 | 第38-39页 |
第三章 低保真Taq DNA聚合酶突变体Taq-T664R对碱基的诱变特性及β-1-4纤维素酶内切酶的体外进化 | 第39-47页 |
1 前言 | 第39页 |
2 材料与方法 | 第39-40页 |
·材料 | 第39-40页 |
·方法 | 第40页 |
3 结果与分析 | 第40-46页 |
·Taq DNA聚合酶664位氨基酸残基的定点诱变 | 第40-41页 |
·低保真Tap-T664R酶的制备 | 第41-42页 |
·Taq-T664R突变体对GFP基因碱基突变的影响 | 第42-44页 |
·Taq-T664R对遗传密码的改变导致氨基酸变化的趋势 | 第44-45页 |
·利用Taq T664R对β-1-4纤维素内切酶进行体外改良 | 第45-46页 |
4 小结 | 第46-47页 |
第四章 讨论 | 第47-49页 |
1 Taq DNA的定点诱变 | 第47页 |
2 Taq DNA-N666R和Taq V661H的保真度研究 | 第47页 |
3 Taq-T664R突变体的保真度与纤维素内切酶的体外定向进化 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
致谢 | 第54页 |