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Taq DNA聚合酶的定点诱变及保真度研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第10-11页
第一章 文献综述第11-25页
 1 随机诱变技术第12页
 2 基于序列同源性的重组技术第12-18页
   ·DNA shuffling第12-14页
   ·交错延伸技术第14-15页
   ·体外随机引发重组第15-16页
   ·临时模板随机嵌合第16-17页
   ·酵母重组增强组合文库第17页
   ·简并寡核苷酸基因改组第17-18页
 3 非同源性重组技术第18-22页
   ·非同源重组技术第18-19页
   ·渐进切割第19页
   ·SHIPREC技术第19页
   ·随机多重组PCR第19-20页
   ·改变DNA长度的随机突变第20页
   ·随机插入/缺失突变第20-21页
   ·叠加饱和诱变第21-22页
 4 体内随机诱变第22-24页
 5 课题研究的目的和意义第24-25页
第二章 Taq DNA聚合酶的定点诱变及对保真度的影响第25-39页
 1 前言第25页
 2 材料与方法第25-31页
   ·材料第25-28页
   ·方法第28-31页
 3 结果与讨论第31-38页
   ·新的Taq DNA聚合酶突变体Taq-V661H和Taq-N666R的获得第31-34页
   ·低保真Taq-V661H和Taq-N666R酶的制备第34页
   ·Taq-V661H和Taq-N666R突变体活性和保真度分析第34-38页
 4 小结第38-39页
第三章 低保真Taq DNA聚合酶突变体Taq-T664R对碱基的诱变特性及β-1-4纤维素酶内切酶的体外进化第39-47页
 1 前言第39页
 2 材料与方法第39-40页
   ·材料第39-40页
   ·方法第40页
 3 结果与分析第40-46页
   ·Taq DNA聚合酶664位氨基酸残基的定点诱变第40-41页
   ·低保真Tap-T664R酶的制备第41-42页
   ·Taq-T664R突变体对GFP基因碱基突变的影响第42-44页
   ·Taq-T664R对遗传密码的改变导致氨基酸变化的趋势第44-45页
   ·利用Taq T664R对β-1-4纤维素内切酶进行体外改良第45-46页
 4 小结第46-47页
第四章 讨论第47-49页
 1 Taq DNA的定点诱变第47页
 2 Taq DNA-N666R和Taq V661H的保真度研究第47页
 3 Taq-T664R突变体的保真度与纤维素内切酶的体外定向进化第47-49页
参考文献第49-54页
致谢第54页

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