摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
文献综述 | 第10-37页 |
1 反刍动物瘤胃及瘤胃微生物 | 第10-25页 |
·反刍动物瘤胃 | 第10-11页 |
·瘤胃微生物 | 第11-17页 |
·瘤胃微生物的分布 | 第17-18页 |
·瘤胃纤毛虫与其他微生物的相互关系 | 第18-20页 |
·瘤胃纤毛虫的主要作用 | 第20-21页 |
·影响瘤胃纤毛虫数量及种群的因素 | 第21-25页 |
2 基于核糖体RNA的分子生物学技术在瘤胃微生物研究中的应用 | 第25-28页 |
·基于核糖体RNA为主的分子生物学技术的基本原理 | 第26页 |
·利用16S rRNA研究瘤胃细菌群体结构及进化关系 | 第26-27页 |
·利用18S rRNA研究瘤胃纤毛虫群体结构及进化关系 | 第27-28页 |
3 PCR-DGGE技术研究瘤胃微生物区系的多样性 | 第28-35页 |
·PCR技术的基本原理 | 第28-32页 |
·DGGE技术的基本原理 | 第32页 |
·PCR-DGGE技术的优缺点 | 第32-33页 |
·PCR-DGGE技术在瘤胃微生物多样性研究中的应用 | 第33-35页 |
4 问题与展望 | 第35页 |
5 本研究的主要内容 | 第35-37页 |
第一章 瘤胃微生物总DNA的提取与检测 | 第37-45页 |
·实验材料 | 第37-40页 |
·仪器 | 第37页 |
·试剂 | 第37-38页 |
·溶液的配制 | 第38-40页 |
·实验方法 | 第40-42页 |
·瘤胃内容物的采集与处理 | 第40页 |
·样品总DNA的提取 | 第40页 |
·DNA提取质量检测 | 第40-41页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第41-42页 |
·结果与分析 | 第42-43页 |
·DNA电泳结果 | 第42-43页 |
·DNA扩增效果检测结果 | 第43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·小结 | 第44-45页 |
第二章 含GC发夹引物PCR扩增方法的优化 | 第45-53页 |
·实验材料 | 第45-46页 |
·仪器 | 第45页 |
·试剂 | 第45-46页 |
·溶液的配制 | 第46页 |
·实验方法 | 第46-49页 |
·常规PCR扩增 | 第47页 |
·降落式PCR | 第47-48页 |
·复原条件PCR | 第48页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第48-49页 |
·结果与分析 | 第49-51页 |
·常规PCR扩增结果 | 第49页 |
·降落式PCR扩增结果 | 第49-50页 |
·复原条件PCR扩增结果 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
·小结 | 第52-53页 |
第三章 水牛瘤胃纤毛虫群落多样性的DGGE分析 | 第53-63页 |
·实验材料 | 第53-55页 |
·仪器 | 第53页 |
·试剂 | 第53-54页 |
·溶液的配制 | 第54-55页 |
·实验方法 | 第55-57页 |
·DGGE电泳变性剂溶液的配制 | 第55页 |
·DGGE电泳胶的制备 | 第55-56页 |
·DGGE电泳 | 第56页 |
·染色 | 第56页 |
·部分优势条带的回收与序列分析 | 第56-57页 |
·DGGE图谱相似性分析 | 第57页 |
·结果与分析 | 第57-61页 |
·DGGE分离结果 | 第57-59页 |
·DGGE指纹图谱聚类分析 | 第59页 |
·部分优势条带的序列分析 | 第59-61页 |
·讨论 | 第61-62页 |
·小结 | 第62-63页 |
第四章 全文结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
附录 水牛瘤胃优势纤毛虫的18S rRNA测序序列 | 第72-74页 |
致谢 | 第74-76页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第76-77页 |