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抗Zhangfei蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 ZHANGFEI 蛋白和单克隆抗体的研究进展第12-30页
   ·ZHANGFEI 蛋白等亮氨酸拉链蛋白家族的研究进展第12-16页
     ·亮氨酸拉链蛋白家族的研究进展第12-16页
       ·碱性亮氨酸拉链的结构第13-14页
       ·细胞内LZIP 的转录活性调节第14-15页
       ·植物中的亮氨酸拉链蛋白第15-16页
   ·内质网应激的反应机制第16-20页
     ·内质网应激激活的信号通路第17-18页
     ·内质网应激的效应第18-19页
       ·诱导内质网的应激蛋白表达第18页
       ·抑制蛋白质翻译第18-19页
     ·内质网应激的作用和影响第19-20页
   ·未折叠蛋白反应在内质网应激中的作用第20-21页
   ·内分泌调节与内质网应激之间的关系第21-23页
   ·单克隆抗体技术的研究进展第23-27页
     ·单克隆技术的研究第23-24页
     ·单克隆抗体的特性第24-25页
     ·单克隆抗体的应用第25-27页
       ·作为亲合层析的配体第25页
       ·作为生物治疗的导向武器第25页
       ·作为免疫抑制剂第25-26页
       ·作为研究工作中的探针第26页
       ·增强抗原的免疫原性第26页
       ·单克隆抗体在医学中的应用第26页
       ·蛋白质的提纯第26页
       ·肿瘤的导向治疗和放射免疫显像技术第26-27页
   ·单克隆抗体在免疫亲和层析中的应用第27-28页
     ·亲和层析第27页
     ·免疫亲和层析第27-28页
   ·单克隆抗体在免疫印迹中的应用第28-30页
第二章 ZHANGFEI 融合蛋白的纯化及其免疫效果第30-38页
   ·材料与方法第30-33页
     ·主要试剂第30页
     ·主要仪器设备第30-31页
     ·试验动物及菌株第31页
     ·试验方法第31-33页
       ·Zhangfei 融合蛋白表达条件的筛选第31页
       ·SDS-PAGE 凝胶分析Zhangfei 融合蛋白表达情况第31-32页
       ·谷胱甘肽琼脂糖凝胶纯化Zhangfei 融合蛋白第32页
       ·电洗脱纯化Zhangfei 融合蛋白第32页
       ·Zhangfei 融合蛋白浓度的测定第32-33页
       ·Zhangfei 融合蛋白免疫原性的测定第33页
   ·结果与分析第33-36页
     ·Zhangfei 融合蛋白的最佳表达条件第33-34页
     ·谷胱甘肽琼脂糖凝胶的纯化结果第34页
     ·电洗脱方法的纯化结果第34-35页
     ·Zhangfei 融合蛋白浓度测定结果第35页
     ·Zhangfei 融合蛋白免疫原性的测定结果第35-36页
       ·免疫小鼠血清抗体效价的测定第35页
       ·免疫兔血清抗体效价的测定结果第35-36页
   ·讨论第36-37页
     ·Zhangfei 融合蛋白的原核表达第36页
     ·Zhangfei 融合蛋白的纯化第36-37页
     ·Zhangfei 融合蛋白的免疫效果第37页
     ·GST 标签蛋白的作用第37页
   ·结论第37-38页
第三章 抗ZHANGFEI蛋白的单克隆杂交瘤株的建立第38-46页
   ·材料和方法第38-42页
     ·主要试剂第38页
     ·主要仪器设备第38-39页
     ·实验动物及细胞第39页
     ·试验方法第39-42页
       ·将实验所需器材用品按照程序进行严格处理,备用第39页
       ·骨髓瘤细胞的制备[94]第39页
       ·饲养层细胞的制备第39-40页
       ·玻片刮取法制备免疫脾细胞第40页
       ·细胞融合第40-41页
       ·观察细胞的生长情况第41页
       ·杂交瘤细胞的筛选第41页
       ·单抗的杂交瘤细胞株的建立第41-42页
       ·两株细胞分泌抗体特异性测定第42页
   ·结果与分析第42-44页
     ·骨髓瘤细胞的制备第42页
     ·饲养层细胞的制备第42-43页
     ·细胞融合第43页
     ·杂交瘤细胞的形态观察第43页
     ·杂交瘤细胞株的筛选第43-44页
     ·细胞株分泌单抗特异性测定第44页
   ·讨论第44-45页
     ·细胞融合过程第44-45页
     ·杂交瘤与骨髓瘤细胞的区别第45页
     ·杂交瘤的死亡与突变第45页
   ·结论第45-46页
第四章 抗ZHANGFEI蛋白的单克隆抗体的制备及鉴定第46-55页
   ·材料和方法第46-50页
     ·主要试剂第46页
     ·主要仪器设备第46-47页
     ·试验动物及细胞第47页
     ·试验方法第47-50页
   ·结果与分析第50-53页
     ·杂交瘤细胞的冻存和复苏第50页
     ·单克隆抗体杂交瘤上清和腹水单抗效价的测定第50-51页
     ·单克隆抗体亚型的测定第51页
     ·单克隆抗体的纯化结果第51页
     ·单克隆抗体的特异性检测第51-52页
     ·腹水中抗体蛋白含量的测定第52页
     ·单克隆抗体亲和常数测定第52-53页
   ·讨论第53-54页
     ·单克隆抗体制备方法的选择第53-54页
     ·单克隆抗体性质的分析第54页
     ·单克隆抗体亲和力第54页
     ·单克隆抗体亚型第54页
   ·结论第54-55页
结论第55-56页
参考文献第56-62页
附录一 试验用液第62-65页
附录二 缩略词第65-66页
致谢第66-67页
作者简介第67页

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