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山羊类胚胎干细胞的分离与培养

摘要第1-7页
SUMMARY第7-14页
缩略语表第14-15页
第一章 文献综述第15-35页
 前言第15页
 1 哺乳动物胚胎干细胞研究进展第15-20页
   ·小鼠胚胎干细胞研究概况第15-17页
   ·人类胚胎干细胞概况第17-19页
   ·猪胚胎干细胞究进展第19页
   ·牛胚胎干细胞的研究进展第19-20页
   ·绵羊和山羊胚胎干细胞的研究进展第20页
 2 胚胎干细胞生物学特性第20-22页
   ·具有高度的发育潜能和分化潜能(全能性或多能性)第20-21页
   ·具有生殖系嵌合能力和种系传递功能第21页
   ·可以在体外无限扩增第21页
   ·具有可操作性第21-22页
   ·胚胎干细胞表面抗原第22页
 3 胚胎干细胞分离和克隆方法第22-24页
   ·全胚培养法第22页
   ·ICM 培养法第22-23页
   ·克隆胚培养法第23页
   ·孤雌生殖胚培养法第23页
   ·原始生殖细胞培养法第23-24页
   ·其他方法和途径第24页
 4 影响胚胎干细胞分离与克隆效率的因素第24-27页
   ·胚胎发育阶段及胚胎质量第24页
   ·培养基第24-25页
   ·饲养层第25页
   ·血清第25-26页
   ·细胞因子第26-27页
 5 胚胎干细胞鉴定方法第27-31页
   ·形态学鉴定第27-28页
   ·碱性磷酸酶活性第28页
   ·阶段特异性胚胎细胞表面抗原第28页
   ·全能性基因的表达第28-29页
   ·端粒酶活性分析第29-30页
   ·核型分析第30页
   ·体内分化试验第30页
   ·体外分化试验第30页
   ·嵌合体制备第30-31页
 6 胚胎干细胞的应用前景第31-33页
   ·生产克隆动物第31页
   ·生产转基因动物第31-32页
   ·发育生物学研究的理想体外模型第32页
   ·医学及临床治疗上的应用第32页
   ·胚胎干细胞存在的主要问题第32-33页
 7 山羊胚胎干细胞有待研究的问题第33-35页
第二章 研究部分第35-66页
 第一节 山羊早期胚胎的获得第35-45页
  1 试验材料第35-36页
   ·试验动物第35页
   ·试验药品第35-36页
   ·仪器和设备第36页
  2 试验方法第36-39页
   ·供体母羊的同期发情第37页
   ·配种方式第37页
   ·手术冲卵第37-38页
   ·胚胎品质鉴定第38-39页
   ·数据分析第39页
  3 结果与分析第39-42页
   ·应用CIDR 埋植的同期发情结果第39-40页
   ·不同剂量OVAGEN~(TM)对供体母羊的超数排卵影响的结果第40-41页
   ·胚胎品质鉴定的结果第41-42页
  4 讨论第42-44页
   ·应用CIDR 同期发情效果第42-43页
   ·促排技术的选择第43页
   ·不同OVAGEN~(TM)剂量的超数排卵效果第43-44页
   ·其他因素对超数排卵效果的影响第44页
  5 小结第44-45页
 第二节 山羊类类胚胎干细胞分离、培养与鉴定第45-65页
  1 试验材料第45-48页
   ·试验动物第45页
   ·主要仪器设备第45-46页
   ·主要试剂及药品第46-47页
   ·主要溶液配制第47-48页
  2 试验方法第48-53页
   ·小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)培养层的制备第48-49页
   ·山羊胎儿成纤维细胞(GEF)饲养层的制备第49-50页
   ·山羊胚胎的获取第50页
   ·山羊ICM 的分离第50-51页
     ·全胚胎培养法第50页
     ·去透明带培养法第50-51页
   ·山羊类ESCS 的传代方法第51-53页
   ·数据处理第53页
  3 结果与分析第53-60页
   ·不同分离方法对ESCS 的分离与培养的影响第53-54页
   ·血清成分对山羊ESCS 分离与培养的影响第54-55页
   ·不同饲养层对山羊ESCS 分离与培养的影响第55-56页
   ·细胞因子对山羊ESCS 分离与培养的影响第56-57页
   ·胚胎发育阶段对山羊ESCS 分离与培养的影响第57页
   ·山羊类ESCS 的鉴定第57-60页
  4 讨论第60-63页
   ·血清对山羊ESCS 分离、克隆的影响第60-61页
   ·不同饲养层对山羊ESCS 分离、克隆的影响第61-62页
   ·胚胎发育不同阶段对山羊ESCS 分离、克隆的影响第62页
   ·山羊胚胎干细胞的体外分化第62-63页
   ·建立山羊胚胎干细胞系的可能性第63页
  5 小结第63-65页
 第三节 结论第65-66页
致谢第66-67页
参考文献第67-77页
作者简介第77-78页
导师简介第78页

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