摘要 | 第1-7页 |
SUMMARY | 第7-14页 |
缩略语表 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-35页 |
前言 | 第15页 |
1 哺乳动物胚胎干细胞研究进展 | 第15-20页 |
·小鼠胚胎干细胞研究概况 | 第15-17页 |
·人类胚胎干细胞概况 | 第17-19页 |
·猪胚胎干细胞究进展 | 第19页 |
·牛胚胎干细胞的研究进展 | 第19-20页 |
·绵羊和山羊胚胎干细胞的研究进展 | 第20页 |
2 胚胎干细胞生物学特性 | 第20-22页 |
·具有高度的发育潜能和分化潜能(全能性或多能性) | 第20-21页 |
·具有生殖系嵌合能力和种系传递功能 | 第21页 |
·可以在体外无限扩增 | 第21页 |
·具有可操作性 | 第21-22页 |
·胚胎干细胞表面抗原 | 第22页 |
3 胚胎干细胞分离和克隆方法 | 第22-24页 |
·全胚培养法 | 第22页 |
·ICM 培养法 | 第22-23页 |
·克隆胚培养法 | 第23页 |
·孤雌生殖胚培养法 | 第23页 |
·原始生殖细胞培养法 | 第23-24页 |
·其他方法和途径 | 第24页 |
4 影响胚胎干细胞分离与克隆效率的因素 | 第24-27页 |
·胚胎发育阶段及胚胎质量 | 第24页 |
·培养基 | 第24-25页 |
·饲养层 | 第25页 |
·血清 | 第25-26页 |
·细胞因子 | 第26-27页 |
5 胚胎干细胞鉴定方法 | 第27-31页 |
·形态学鉴定 | 第27-28页 |
·碱性磷酸酶活性 | 第28页 |
·阶段特异性胚胎细胞表面抗原 | 第28页 |
·全能性基因的表达 | 第28-29页 |
·端粒酶活性分析 | 第29-30页 |
·核型分析 | 第30页 |
·体内分化试验 | 第30页 |
·体外分化试验 | 第30页 |
·嵌合体制备 | 第30-31页 |
6 胚胎干细胞的应用前景 | 第31-33页 |
·生产克隆动物 | 第31页 |
·生产转基因动物 | 第31-32页 |
·发育生物学研究的理想体外模型 | 第32页 |
·医学及临床治疗上的应用 | 第32页 |
·胚胎干细胞存在的主要问题 | 第32-33页 |
7 山羊胚胎干细胞有待研究的问题 | 第33-35页 |
第二章 研究部分 | 第35-66页 |
第一节 山羊早期胚胎的获得 | 第35-45页 |
1 试验材料 | 第35-36页 |
·试验动物 | 第35页 |
·试验药品 | 第35-36页 |
·仪器和设备 | 第36页 |
2 试验方法 | 第36-39页 |
·供体母羊的同期发情 | 第37页 |
·配种方式 | 第37页 |
·手术冲卵 | 第37-38页 |
·胚胎品质鉴定 | 第38-39页 |
·数据分析 | 第39页 |
3 结果与分析 | 第39-42页 |
·应用CIDR 埋植的同期发情结果 | 第39-40页 |
·不同剂量OVAGEN~(TM)对供体母羊的超数排卵影响的结果 | 第40-41页 |
·胚胎品质鉴定的结果 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
·应用CIDR 同期发情效果 | 第42-43页 |
·促排技术的选择 | 第43页 |
·不同OVAGEN~(TM)剂量的超数排卵效果 | 第43-44页 |
·其他因素对超数排卵效果的影响 | 第44页 |
5 小结 | 第44-45页 |
第二节 山羊类类胚胎干细胞分离、培养与鉴定 | 第45-65页 |
1 试验材料 | 第45-48页 |
·试验动物 | 第45页 |
·主要仪器设备 | 第45-46页 |
·主要试剂及药品 | 第46-47页 |
·主要溶液配制 | 第47-48页 |
2 试验方法 | 第48-53页 |
·小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)培养层的制备 | 第48-49页 |
·山羊胎儿成纤维细胞(GEF)饲养层的制备 | 第49-50页 |
·山羊胚胎的获取 | 第50页 |
·山羊ICM 的分离 | 第50-51页 |
·全胚胎培养法 | 第50页 |
·去透明带培养法 | 第50-51页 |
·山羊类ESCS 的传代方法 | 第51-53页 |
·数据处理 | 第53页 |
3 结果与分析 | 第53-60页 |
·不同分离方法对ESCS 的分离与培养的影响 | 第53-54页 |
·血清成分对山羊ESCS 分离与培养的影响 | 第54-55页 |
·不同饲养层对山羊ESCS 分离与培养的影响 | 第55-56页 |
·细胞因子对山羊ESCS 分离与培养的影响 | 第56-57页 |
·胚胎发育阶段对山羊ESCS 分离与培养的影响 | 第57页 |
·山羊类ESCS 的鉴定 | 第57-60页 |
4 讨论 | 第60-63页 |
·血清对山羊ESCS 分离、克隆的影响 | 第60-61页 |
·不同饲养层对山羊ESCS 分离、克隆的影响 | 第61-62页 |
·胚胎发育不同阶段对山羊ESCS 分离、克隆的影响 | 第62页 |
·山羊胚胎干细胞的体外分化 | 第62-63页 |
·建立山羊胚胎干细胞系的可能性 | 第63页 |
5 小结 | 第63-65页 |
第三节 结论 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-77页 |
作者简介 | 第77-78页 |
导师简介 | 第78页 |