| 摘要 | 第1-7页 |
| SUMMARY | 第7-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-25页 |
| 1 生长激素(GH)简介 | 第12-15页 |
| ·GH 的结构特点 | 第12-13页 |
| ·GH 信号转导途径 | 第13页 |
| ·GH 的主要生物学功能 | 第13-15页 |
| 2 GH 基因研究进展 | 第15-20页 |
| ·GH 基因的定位 | 第15页 |
| ·GH 基因的结构 | 第15-17页 |
| ·GH 基因的表达与调控 | 第17-18页 |
| ·GH 基因的研究进展 | 第18-20页 |
| 3 分子标记在牦牛育种中的应用及意义 | 第20-24页 |
| ·牦牛分子育种的基础研究 | 第20-21页 |
| ·分子遗传标记在牦牛上的研究领域 | 第21页 |
| ·分子标记在牦牛育种中的应用 | 第21-22页 |
| ·PCR-SSCP 分子标记方法 | 第22-24页 |
| 4 研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二部分 GH 基因多态性检测及序列分析 | 第25-37页 |
| 1. 材料和方法 | 第25-27页 |
| ·试验材料 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·分析工具软件 | 第26页 |
| ·溶液试剂配制 | 第26-27页 |
| 2 主要试验步骤 | 第27-34页 |
| ·牦牛冻存血样DNA 提取 | 第27-28页 |
| ·PCR 扩增 | 第28-30页 |
| ·SSCP 凝胶电泳 | 第30-32页 |
| ·GH 基因部分序列的克隆和测序 | 第32-34页 |
| 3. 统计方法 | 第34-37页 |
| ·基因型频率 | 第34页 |
| ·基因频率 | 第34-35页 |
| ·基因位点Hardy-Weinberg 平衡状态的检验 | 第35页 |
| ·群体内遗传变异的度量指标—杂合度 | 第35-36页 |
| ·有效等位基因数 | 第36页 |
| ·多态信息含量 | 第36-37页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第37-44页 |
| 1 牦牛基因组DNA 样品的检测 | 第37页 |
| 2 PCR-SSCP 多态性检测结果 | 第37-41页 |
| ·GH 基因外显子1 及部分内含子的PCR-SSCP 多态性检测结果 | 第37-38页 |
| ·GH 基因外显子2 及部分内含子的PCR-SSCP 多态性检测结果 | 第38页 |
| ·GH 基因外显子3 及部分内含子的PCR-SSCP 多态性检测结果 | 第38-39页 |
| ·GH 基因外显子4 及部分内含子的PCR-SSCP 多态性检测结果 | 第39-40页 |
| ·GH 基因外显子5 及部分内含子的PCR-SSCP 多态性检测结果 | 第40-41页 |
| 3 克隆与序列分析 | 第41-42页 |
| ·GH-P3 测序对比结果 | 第41页 |
| ·GH-P5 测序对比结果 | 第41-42页 |
| 4 GH 基因多态位点群体遗传学分析 | 第42-44页 |
| ·基因频率和基因型频率在不同牦牛群体中的分布 | 第42页 |
| ·GH 基因第3 内含子和第5 外显子遗传多样性分析 | 第42-43页 |
| ·GH 基因GH-P3 和GH-P5 的Hardy-Weinberg 平衡检验 | 第43-44页 |
| 第四部分 讨论 | 第44-49页 |
| 1 样品采集和DNA 提取方法 | 第44页 |
| ·采样 | 第44页 |
| ·DNA 提取方法 | 第44页 |
| 2 PCR 扩增的主要影响因素 | 第44-46页 |
| ·模板DNA 的质量和用量 | 第45页 |
| ·引物 | 第45页 |
| ·退火温度(Tm)和镁离子浓度(Mg~(2+))的确定 | 第45页 |
| ·TaqDNA 聚合酶的选择和用量 | 第45-46页 |
| 3 PCR-SSCP 技术影响因素分析 | 第46-47页 |
| 4 牦牛GH 基因遗传特性的分析 | 第47-49页 |
| ·GH 基因第3 内含子多态性 | 第47页 |
| ·GH 基因第5 外显子多态性 | 第47-48页 |
| ·甘南牦牛、天祝白牦牛及青海高原牦牛GH 基因遗传多样性分析 | 第48-49页 |
| 第五部分 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 作者简介 | 第58-59页 |
| 导师简介 | 第59-60页 |
| 附录1 GH 基因第 3 内含子 AA 基因型序列图 | 第60-61页 |
| 附录2 GH 基因第 3 内含子 BB 基因型序列 | 第61-62页 |
| 附录3 GH 基因第 5 外显子 CC 基因型序列 | 第62页 |
