英文缩写表 | 第1-4页 |
摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
前言 | 第11-28页 |
1 转录激活因子AP-2家族简介 | 第11-21页 |
2 研究蛋白质相互作用方法简介 | 第21-28页 |
第一部分 材料与方法 | 第28-50页 |
1 实验材料 | 第28-33页 |
·菌种和细胞株 | 第28页 |
·载体和工具酶 | 第28页 |
·抗体 | 第28页 |
·试剂盒 | 第28-29页 |
·其它试剂 | 第29页 |
·所需溶液 | 第29-32页 |
·主要仪器设备 | 第32-33页 |
2.实验方法 | 第33-50页 |
·细胞培养 | 第34-35页 |
·免疫共沉淀结合质谱分析筛选AP-2相互作用蛋白 | 第35-41页 |
·表达载体的构建 | 第41-46页 |
·AP-2β与SLP-2之间相互作用的鉴定 | 第46-48页 |
·荧光素酶实验分析SLP-2对AP-2β转录活性的影响 | 第48-49页 |
·免疫印迹实验分析SLP-2对AP-2β蛋白水平的影响 | 第49-50页 |
第二部分 结果与分析 | 第50-64页 |
1.AP-2α相互作用蛋白的筛选 | 第50-53页 |
·AP-2α免疫共沉淀产物SDS-PAGE的银染图谱 | 第50页 |
·质谱鉴定结果及分析 | 第50-53页 |
2.AP-2β相互作用蛋白的筛选 | 第53-55页 |
·AP-2β免疫共沉淀产物SDS-PAGE的银染图谱 | 第53-54页 |
·质谱鉴定结果及分析 | 第54-55页 |
3.表达载体的构建 | 第55-57页 |
·PCR扩增出SLP-2目的片段 | 第55-56页 |
·SLP-2表达载体的构建 | 第56-57页 |
4.SLP-2和AP-2β相互作用的鉴定 | 第57-60页 |
·免疫共沉淀分析(Co-IP) | 第57-59页 |
·细胞共定位分析(Co-localization) | 第59-60页 |
5.SLP-2与AP-2β相互作用后的功能研究 | 第60-64页 |
·SLP-2对AP-2β转录活性的影响 | 第60-62页 |
·SLP-2过表达上调AP-2β的蛋白水平 | 第62-64页 |
第三部分 讨论 | 第64-68页 |
结语 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-82页 |
附录 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |