| 缩略语表 | 第6-9页 |
| 中文摘要 | 第9-14页 |
| 英文摘要 | 第14-19页 |
| 前言 | 第20-22页 |
| 文献回顾 | 第22-37页 |
| 第一部分 NRP1可能作为GDNF的膜受体介导其促胶质瘤细胞的增殖 | 第37-71页 |
| 1 材料 | 第37-43页 |
| 1.1 实验细胞株 | 第37页 |
| 1.2 实验试剂与耗材 | 第37-39页 |
| 1.3 仪器名称 | 第39-41页 |
| 1.4 溶液配制 | 第41-43页 |
| 2 方法 | 第43-51页 |
| 2.1 胶质瘤细胞系和原代星形胶质细胞培养 | 第43页 |
| 2.2 流式细胞仪分析 | 第43-44页 |
| 2.3 CCK-8 细胞活性检测 | 第44页 |
| 2.4 EdU染色检测细胞增殖 | 第44-45页 |
| 2.5 膜蛋白提取 | 第45页 |
| 2.6 GST沉淀实验 | 第45页 |
| 2.7 液相色谱—串联质谱 | 第45-46页 |
| 2.8 生物信息学分析 | 第46页 |
| 2.9 免疫荧光和共聚焦激光技术 | 第46页 |
| 2.10 ONCOMINE?数据库 | 第46页 |
| 2.11 免疫共沉淀 | 第46-47页 |
| 2.12 分子对接 | 第47-48页 |
| 2.13 慢病毒载体的构建和C6细胞的感染 | 第48页 |
| 2.14 Western blot | 第48-49页 |
| 2.15 反转录PCR | 第49-50页 |
| 2.16 生存分析 | 第50-51页 |
| 2.17 数据分析 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-67页 |
| 3.1 GDNF促C6胶质瘤细胞增殖 | 第51-54页 |
| 3.2 探索C6细胞膜上的GDNF结合蛋白 | 第54-58页 |
| 3.3 C6胶质瘤细胞中过表达的NRP1被外源性GDNF招募到细胞膜上 | 第58-60页 |
| 3.4 NRP1和GDNF相互作用 | 第60-63页 |
| 3.5 GDNF-NRP1促C6胶质瘤细胞增殖 | 第63-64页 |
| 3.6 GDNF-NRP1影响恶性胶质瘤病人预后 | 第64-67页 |
| 4 讨论 | 第67-71页 |
| 第二部分 外源性GDNF通过Rac1激活 β-Catenin通路 | 第71-97页 |
| 1 材料 | 第71-74页 |
| 1.1 实验细胞株 | 第71页 |
| 1.2 实验试剂与耗材 | 第71-72页 |
| 1.3 仪器名称 | 第72页 |
| 1.4 溶液配制 | 第72-74页 |
| 2 方法 | 第74-80页 |
| 2.1 确定外源性GDNF促C6细胞中 β-catenin蛋白水平增高的最佳浓度和时间 | 第74-75页 |
| 2.2 探索外源性GDNF对 β-catenin核转移的影响 | 第75页 |
| 2.3 胞浆与胞核蛋白的提取和验证 | 第75-77页 |
| 2.4 免疫沉淀获得胞浆与胞核蛋白中 β-catenin的结合蛋白并予以验证 | 第77页 |
| 2.5 质谱法鉴定胞浆与胞核蛋白中 β-catenin的结合蛋白 | 第77-79页 |
| 2.6 生物信息学技术分析胞浆与胞核蛋白中 β-catenin的结合的差异表达蛋白 | 第79-80页 |
| 3 结果 | 第80-95页 |
| 3.1 外源性给予GDNF促 β-catenin核转移增加 | 第80-84页 |
| 3.2 外源性GDNF促使核内Rac1和 β-catenin结合增加 | 第84-95页 |
| 4 讨论 | 第95-97页 |
| 第三部分 外源性GDNF促进增殖相关基因CXCL1表达增加 | 第97-129页 |
| 1 材料 | 第97-98页 |
| 1.1 实验细胞株 | 第97页 |
| 1.2 实验试剂与耗材 | 第97页 |
| 1.3 设备 | 第97-98页 |
| 2 方法 | 第98-110页 |
| 2.1 样品制备 | 第98-99页 |
| 2.2 测序实验 | 第99-104页 |
| 2.3 PCR试验 | 第104-106页 |
| 2.4 荧光素酶报告基因试验 | 第106-109页 |
| 2.5 生物信息学 | 第109-110页 |
| 3 结果 | 第110-126页 |
| 3.1 外源性GDNF引起了和增殖相关的CXCL1 mRNA基因表达量增加 | 第110-124页 |
| 3.2 GDNF增强了CXCL1启动子活性 | 第124页 |
| 3.3 探寻能够起始CXCL1的转录的 β-catenin的共转录因子 | 第124-126页 |
| 4 讨论 | 第126-129页 |
| 4.1 CXCL1是GDNF促胶质瘤细胞增殖的作用的基因靶点 | 第126-127页 |
| 4.2 NF-κB可能是能够起始CXCL1的转录的 β-catenin的共转录因子 | 第127-128页 |
| 4.3 GDNF促C6胶质瘤细胞增殖的细胞内信号通路研究 | 第128-129页 |
| 小结 | 第129-130页 |
| 参考文献 | 第130-142页 |
| 个人简历和研究成果 | 第142-143页 |
| 致谢 | 第143页 |
