摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
第一章 前言 | 第7-15页 |
·麻黄碱简介 | 第7-10页 |
·麻黄碱的理化性质 | 第7-8页 |
·麻黄碱的作用 | 第8页 |
·麻黄碱的应用与需求 | 第8页 |
·麻黄碱的生产 | 第8-10页 |
·辅酶再生 | 第10-13页 |
·辅酶再生的意义 | 第10-11页 |
·辅酶再生的方法 | 第11-13页 |
·本课题的研究思路及内容 | 第13-15页 |
·本课题已有基础及研究思路 | 第13-14页 |
·研究内容 | 第14-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-23页 |
·材料 | 第15-16页 |
·菌种与质粒 | 第15页 |
·培养基 | 第15页 |
·主要生化和分子生物学试剂 | 第15-16页 |
·主要设备及仪器 | 第16页 |
·实验方法 | 第16-23页 |
·共表达质粒构建流程 | 第16-18页 |
·葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶酶共表达质粒pKK223-3-mldh-gdh的构建构建流程(图2- | 第16-17页 |
·甲酸脱氢酶与羰基还原酶共表达质粒pKK223-3-mldh-pro-fdh 的构建流程(图2-2) | 第17-18页 |
·引物设计 | 第18-19页 |
·枯草芽孢杆菌总DNA 的提取 | 第19页 |
·博伊丁假丝酵母酵母总DNA 的提取 | 第19页 |
·常规基因操作 | 第19页 |
·细胞裂解液的制备 | 第19-20页 |
·SDS-PAGE 蛋白电泳检测 | 第20页 |
·IPTG 诱导条件的研究 | 第20页 |
·重组菌不对称还原反应及检测 | 第20页 |
·全细胞转化实验 | 第20-23页 |
第三章 结果与讨论 | 第23-38页 |
·葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶共表达质粒的构建 | 第23-27页 |
·pKK223-3-mldh 的构建 | 第23页 |
·共表达质粒pKK-223-3-mldh-gdh 的构建 | 第23-24页 |
·SDS-PAGE 蛋白电泳检测 | 第24-25页 |
·重组菌不对称还原反应及检测 | 第25-26页 |
·共表达质粒生长曲线测定 | 第26页 |
·诱导剂加入时间优化结果 | 第26-27页 |
·诱导剂加入量优化结果 | 第27页 |
·诱导剂诱导时间优化结果 | 第27页 |
·全细胞转化实验 | 第27-31页 |
·甲酸脱氢酶与羰基还原酶共表达质粒的构建 | 第31-35页 |
·T-pro-fdh 的构建 | 第31-32页 |
·pKK223-3-mldh-pro-fdh 共表达质粒的构建 | 第32页 |
·重组共表达质粒转化菌E. coli JM109(pKK223-3-mldh-pro-fdh)不对称还原反应及检测 | 第32-33页 |
·重组共表达质粒转化菌E. coli JM109(pKK223-3-mldh-pro-fdh)生长曲线的测定 | 第33-34页 |
·重组共表达质粒转化菌E. coli JM109(pKK223-3-mldh-pro-fdh)全细胞转化实验 | 第34-35页 |
·两共表达质粒转化菌株在全细胞转化过程中的比较 | 第35-38页 |
论文结论与展望 | 第38-39页 |
致谢 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-43页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第43页 |