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共表达型重组大肠杆菌不对称还原产d-伪麻黄碱的研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-7页
第一章 前言第7-15页
   ·麻黄碱简介第7-10页
     ·麻黄碱的理化性质第7-8页
     ·麻黄碱的作用第8页
     ·麻黄碱的应用与需求第8页
     ·麻黄碱的生产第8-10页
   ·辅酶再生第10-13页
     ·辅酶再生的意义第10-11页
     ·辅酶再生的方法第11-13页
   ·本课题的研究思路及内容第13-15页
     ·本课题已有基础及研究思路第13-14页
     ·研究内容第14-15页
第二章 材料与方法第15-23页
   ·材料第15-16页
     ·菌种与质粒第15页
     ·培养基第15页
     ·主要生化和分子生物学试剂第15-16页
     ·主要设备及仪器第16页
   ·实验方法第16-23页
     ·共表达质粒构建流程第16-18页
       ·葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶酶共表达质粒pKK223-3-mldh-gdh的构建构建流程(图2-第16-17页
       ·甲酸脱氢酶与羰基还原酶共表达质粒pKK223-3-mldh-pro-fdh 的构建流程(图2-2)第17-18页
     ·引物设计第18-19页
     ·枯草芽孢杆菌总DNA 的提取第19页
     ·博伊丁假丝酵母酵母总DNA 的提取第19页
     ·常规基因操作第19页
     ·细胞裂解液的制备第19-20页
     ·SDS-PAGE 蛋白电泳检测第20页
     ·IPTG 诱导条件的研究第20页
     ·重组菌不对称还原反应及检测第20页
     ·全细胞转化实验第20-23页
第三章 结果与讨论第23-38页
   ·葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶共表达质粒的构建第23-27页
     ·pKK223-3-mldh 的构建第23页
     ·共表达质粒pKK-223-3-mldh-gdh 的构建第23-24页
     ·SDS-PAGE 蛋白电泳检测第24-25页
     ·重组菌不对称还原反应及检测第25-26页
     ·共表达质粒生长曲线测定第26页
     ·诱导剂加入时间优化结果第26-27页
     ·诱导剂加入量优化结果第27页
     ·诱导剂诱导时间优化结果第27页
   ·全细胞转化实验第27-31页
   ·甲酸脱氢酶与羰基还原酶共表达质粒的构建第31-35页
     ·T-pro-fdh 的构建第31-32页
     ·pKK223-3-mldh-pro-fdh 共表达质粒的构建第32页
     ·重组共表达质粒转化菌E. coli JM109(pKK223-3-mldh-pro-fdh)不对称还原反应及检测第32-33页
     ·重组共表达质粒转化菌E. coli JM109(pKK223-3-mldh-pro-fdh)生长曲线的测定第33-34页
     ·重组共表达质粒转化菌E. coli JM109(pKK223-3-mldh-pro-fdh)全细胞转化实验第34-35页
   ·两共表达质粒转化菌株在全细胞转化过程中的比较第35-38页
论文结论与展望第38-39页
致谢第39-40页
参考文献第40-43页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第43页

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