| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-16页 |
| ·植物RNAi技术及其应用 | 第8-14页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第8-9页 |
| ·植物RNAi的特点 | 第9-11页 |
| ·RNAi技术及其在植物中的应用 | 第11-14页 |
| ·烯的生物合成与RNAi | 第14-15页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第15-16页 |
| 2 材料和方法 | 第16-29页 |
| ·材料 | 第16-18页 |
| ·植物材料、菌种和质粒 | 第16页 |
| ·菌株培养条件 | 第16页 |
| ·菌种保存 | 第16页 |
| ·生化及化学试剂 | 第16-18页 |
| ·试验方法 | 第18-29页 |
| ·ACS2基因片段的克隆及分子操作 | 第18-22页 |
| ·基因沉默植物双元表达载体质粒的构建 | 第22-25页 |
| ·番茄再生与遗传转化体系的优化 | 第25-28页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-42页 |
| ·ACS2基因片段的克隆 | 第29-31页 |
| ·ACS2基因片段PCR扩增 | 第29页 |
| ·PCR片段克隆验证 | 第29-31页 |
| ·中间载体pUCCRNAi-ACS2FR的构建 | 第31-34页 |
| ·pUCCRNAi-ACS2F的构建 | 第31-32页 |
| ·pUCCRNAi-ACS2FR的构建 | 第32-33页 |
| ·反向重复序列的测序验证 | 第33-34页 |
| ·植物双元表达载体pCAMBIA2300-ACS2FR的构建 | 第34-36页 |
| ·pCAMBIA2300-ACS2FR转入农杆菌 | 第36页 |
| ·番茄再生与遗传转化体系的优化 | 第36-39页 |
| ·无菌苗及子叶外植体的获得 | 第36-37页 |
| ·番茄再生体系的优化结果 | 第37-39页 |
| ·农杆菌介导番茄子叶外植体的遗传转化 | 第39-42页 |
| ·转基因植株的获得 | 第39-40页 |
| ·转基因植株的检测 | 第40-42页 |
| 4 讨论与结论 | 第42-46页 |
| ·RNAi技术及其限制 | 第42页 |
| ·RNAi载体构建方法 | 第42-43页 |
| ·载体构建中应注意的问题 | 第43-44页 |
| ·番茄转化条件的优化 | 第44-45页 |
| ·结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录A 培养基及其配制 | 第52-53页 |
| 附录B 试验中用到的主要仪器 | 第53-54页 |
| 附录C 植物RNAi双元表达载体质粒的构建方案 | 第54-55页 |
| 附录D 反向重复序列测序结果 | 第55-57页 |
| 附录E Km敏感性试验结果示图 | 第57-58页 |
| 附录F 转基因(ihpRNA)番茄的获得 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 个人简介 | 第60页 |