| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-26页 |
| 1. 低温胁迫对植物的伤害 | 第8-15页 |
| ·冻害与冻害的生理 | 第8-11页 |
| ·结冰伤害的类型及其原因 | 第8-9页 |
| ·结冰伤害的机理 | 第9-11页 |
| ·冷害与冷害生理 | 第11-15页 |
| ·冷害表现 | 第12-13页 |
| ·冷害伤害的机理 | 第13-15页 |
| 2. 植物抗寒的分子基础 | 第15-21页 |
| ·膜稳定性相关基因 | 第15-16页 |
| ·植物的冷诱导墓因 | 第16-19页 |
| ·抗冻蛋白 | 第19-21页 |
| ·抗冻蛋白的生化特性 | 第19页 |
| ·动物抗冻蛋白及其转基因植物 | 第19-20页 |
| ·植物抗冻蛋白研究的现状与趋势 | 第20-21页 |
| 3. 花粉管通道转基因技术 | 第21-22页 |
| 4. 本论文研究意义 | 第22-24页 |
| 5. 本论文创新之处 | 第24-26页 |
| 第二章 花粉管通道法介导的棉花遗传转化 | 第26-39页 |
| 1、材料与方法 | 第26-34页 |
| ·材料 | 第26-29页 |
| ·目的基因 | 第26页 |
| ·供试材料 | 第26页 |
| ·质粒和菌株 | 第26-28页 |
| ·生化试剂 | 第28页 |
| ·仪器 | 第28页 |
| ·实验所配试剂 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-34页 |
| ·PC3301-SIPEBP和PCHF3- SIPEBP质粒DNA的大量提取 | 第29-30页 |
| ·质粒DNA的纯化 | 第30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaC12法) | 第30-31页 |
| ·细胞转化 | 第31-32页 |
| ·平板培养（有时需要稀释） | 第32页 |
| ·PC3301-SIPEBP和PCHF3- SIPEBP质粒DNA的酶切鉴定 | 第32页 |
| ·花粉管通道法介导SIPEBP转化棉花植株 | 第32-33页 |
| ·转化SIPEBP基因陆地棉株系的筛选 | 第33-34页 |
| 2. 结果与分析 | 第34-38页 |
| ·利用花粉管通道转化技术获得纯系 | 第35-37页 |
| ·转基因棉花纯系筛选 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-39页 |
| 第三章 SOUTHERN BLOT杂交分析 | 第39-49页 |
| 1. 材料与方法 | 第39-40页 |
| ·供试材料 | 第39页 |
| ·棉花基因组提取所用溶液 | 第39页 |
| ·棉花基因组提取所用溶液 | 第39-40页 |
| 2 实验方法 | 第40-48页 |
| ·棉花基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
| ·酶切基因组DNA | 第41-42页 |
| ·电泳 | 第42页 |
| ·转膜 | 第42-43页 |
| ·标记探针（PRIME-A-GENE LABELING KIT，PROMEGA） | 第43-44页 |
| ·探针标记后的检测 | 第44-45页 |
| ·预杂交 | 第45页 |
| ·杂交 | 第45-46页 |
| ·洗膜、染色及检测 | 第46页 |
| ·检测 | 第46-47页 |
| ·冲洗胶片 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-49页 |
| 第四章 转S IPEBP基因棉花的抗寒性鉴定 | 第49-54页 |
| 一、 大田抗寒实验 | 第49-52页 |
| 二、 温室抗寒实验 | 第52-54页 |
| 第五章 结论与展望 | 第54-57页 |
| 1. 结论 | 第54-55页 |
| ·利用花粉管通道转化技术获得转基因棉花株系 | 第54页 |
| ·SOUTHERN BLOT杂交分析 | 第54-55页 |
| ·转SIPEBP基因棉花的抗寒性鉴定 | 第55页 |
| ·大田抗寒实验 | 第55页 |
| ·温室抗寒实验 | 第55页 |
| 2. 展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
