| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-32页 |
| ·果聚糖的类型及在植物中的广泛存在 | 第15-16页 |
| ·果聚糖的生物合成及影响因素 | 第16-18页 |
| ·果聚糖的降解 | 第18页 |
| ·果聚糖在植物抗逆中的作用及其机制 | 第18-22页 |
| ·果聚糖与植物抗寒性和抗旱性 | 第18-19页 |
| ·果聚糖与植物抗盐性、抗涝性和抗贫瘠性 | 第19页 |
| ·果聚糖与植物耐土壤金属毒害能力 | 第19-20页 |
| ·果聚糖参与植物抗逆的可能机制 | 第20-22页 |
| ·果聚糖合成酶转基因研究进展 | 第22-25页 |
| ·高等植物启动子结构和顺式作用元件 | 第25-27页 |
| ·高等植物启动子结构 | 第25-26页 |
| ·涉及植物非生物胁迫应答的顺式作用元件 | 第26-27页 |
| ·植物基因启动子克隆方法 | 第27-30页 |
| ·利用启动子探针型载体筛选启动子 | 第27页 |
| ·利用PCR 方法克隆启动子 | 第27-30页 |
| ·本研究目的和意义 | 第30-31页 |
| ·技术路线 | 第31-32页 |
| 第二章 小麦族植物果聚糖合成酶基因克隆和序列分析 | 第32-46页 |
| ·材料与方法 | 第32-33页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·植物材料 | 第32-33页 |
| ·菌种及载体 | 第33页 |
| ·酶及化学试剂 | 第33页 |
| ·试剂盒 | 第33页 |
| ·引物设计 | 第33页 |
| ·引物合成 | 第33页 |
| ·测序 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-37页 |
| ·小麦叶片基因组DNA 提取 | 第33-34页 |
| ·小麦总RNA 提取 | 第34页 |
| ·小麦总RNA 纯化 | 第34-35页 |
| ·cDNA 第一链的合成（参照试剂盒说明书） | 第35页 |
| ·PCR 扩增 | 第35-36页 |
| ·产物的连接和转化 | 第36页 |
| ·序列比对及染色体定位预测 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-44页 |
| ·1-SST 基因扩增和结构分析 | 第37页 |
| ·1-FFT 基因扩增和结构分析 | 第37-38页 |
| ·6-SFT 基因的扩增和结构分析 | 第38-39页 |
| ·小麦族植物FBEs 同源性分析 | 第39-43页 |
| ·小麦族植物与其他物种的FBEs 系统进化分析 | 第43-44页 |
| ·小麦FBEs 基因的染色体定位预测 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 小麦FBEs 启动子克隆与功能区段分析 | 第46-59页 |
| ·材料与方法 | 第46-48页 |
| ·实验材料 | 第46-48页 |
| ·实验方法 | 第48-50页 |
| ·小麦叶片基因组DNA 提取 | 第48页 |
| ·1-SST 和1-FFT 启动子延伸 | 第48-49页 |
| ·6-SFT 启动子延伸 | 第49页 |
| ·小麦幼胚愈伤组织培养 | 第49页 |
| ·1-SST 及1-FFT 启动子片段缺失载体构建 | 第49页 |
| ·基因枪转化小麦愈伤组织 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-56页 |
| ·1-SST 和1-FFT 基因的启动子扩增 | 第50页 |
| ·6-SFT 基因的启动子扩增 | 第50-51页 |
| ·FBEs 启动子序列分析 | 第51-54页 |
| ·1-SST 和1-FFT 启动子缺失片段植物表达载体构建 | 第54-55页 |
| ·1-SST 和1-FFT 启动子片段功能分析 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-59页 |
| 第四章 小麦族FBEs 拷贝数、表达特性及6-SFT 基因的亚细胞定位分析 | 第59-74页 |
| ·材料与方法 | 第59-61页 |
| ·实验材料 | 第59-61页 |
| ·实验方法 | 第61-63页 |
| ·植物叶片基因组DNA 的提取及纯化 | 第61页 |
| ·探针的制备 | 第61-62页 |
| ·Southern blot 步骤 | 第62页 |
| ·小麦抗旱性鉴定 | 第62页 |
| ·小麦总RNA 提取、纯化及cDNA 第一链合成 | 第62页 |
| ·荧光定量PCR 反应体系及反应程序 | 第62-63页 |
| ·基因表达特性分析 | 第63页 |
| ·基因枪转化洋葱表皮细胞 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-73页 |
| ·1-SST 在小麦族植物中的拷贝数 | 第63-64页 |
| ·1-FFT 在小麦族植物中的拷贝数 | 第64-65页 |
| ·6-SFT 在小麦族植物中的拷贝数 | 第65页 |
| ·不同小麦品种抗旱性鉴定 | 第65-67页 |
| ·不同小麦品种中FBEs 基因的表达分析 | 第67-72页 |
| ·6-SFT 亚细胞定位表达载体构建 | 第72页 |
| ·6-SFT 的亚细胞定位 | 第72-73页 |
| ·讨论 | 第73-74页 |
| 第五章 小麦6-SFT 基因功能验证 | 第74-85页 |
| ·材料 | 第74-75页 |
| ·植物材料 | 第74页 |
| ·菌种及载体 | 第74页 |
| ·酶及化学试剂 | 第74页 |
| ·试剂盒 | 第74页 |
| ·引物设计及合成 | 第74-75页 |
| ·测序 | 第75页 |
| ·转基因载体p81121 示意图 | 第75页 |
| ·实验方法 | 第75-79页 |
| ·RNA 提取、纯化和反转录 | 第75页 |
| ·质粒提取 | 第75页 |
| ·PCR 产物和酶切产物的凝胶回收 | 第75-76页 |
| ·DNA 片段纯化 | 第76页 |
| ·植物表达载体构建 | 第76页 |
| ·三亲杂交法 | 第76-77页 |
| ·烟草转化 | 第77-78页 |
| ·转6-SFT 基因烟草植株检测 | 第78-79页 |
| ·转基因烟草果聚糖含量测定 | 第79页 |
| ·转基因烟草植抗逆性鉴定 | 第79页 |
| ·结果与分析 | 第79-83页 |
| ·6-SFT 基因的cDNA 扩增 | 第79-80页 |
| ·6-SFT 基因植物表达载体构建和鉴定 | 第80页 |
| ·三亲杂交将6-SFT 转化农杆菌C58C1 | 第80-81页 |
| ·转基因烟草植株获得 | 第81页 |
| ·转基因烟草植株的分子检测 | 第81-82页 |
| ·转基因烟草植株果聚糖含量测定 | 第82-83页 |
| ·转基因烟草植株的抗逆性验证 | 第83页 |
| ·讨论 | 第83-85页 |
| 第六章 全文结论 | 第85-87页 |
| ·小麦族植物FBEs 基因结构特征 | 第85页 |
| ·小麦 FBEs 基因启动子的特性 | 第85页 |
| ·小麦 FBEs 基因干旱胁迫时的表达特性 | 第85-86页 |
| ·小麦族植物FBEs 基因的拷贝数 | 第86页 |
| ·6-SFT 基因的亚细胞定位 | 第86页 |
| ·转小麦6-SFT 基因烟草表现出较强的抗逆性 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-98页 |
| 附表 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 作者简历 | 第100页 |
