| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-14页 |
| 致谢 | 第14-19页 |
| 第一章 前言 | 第19-30页 |
| ·昆虫神经肽概述 | 第19-21页 |
| ·生物合成 | 第19页 |
| ·表达 | 第19-20页 |
| ·释放 | 第20页 |
| ·神经肽受体 | 第20页 |
| ·神经肽的神经调节及激素作用 | 第20-21页 |
| ·家蚕神经肽研究进展 | 第21-22页 |
| ·昆虫促前胸腺激素(PTTH)研究进展 | 第22-26页 |
| ·PTTH的鉴定、纯化和克隆 | 第23-24页 |
| ·PTTH的表达、合成和分泌 | 第24页 |
| ·PTTH的功能及调控 | 第24-26页 |
| ·PTTH研究的展望 | 第26页 |
| ·荧光定量PCR | 第26-28页 |
| ·荧光定量PCR的反应方法的分类 | 第26-27页 |
| ·荧光定量PCR的定量方法 | 第27-28页 |
| ·本研究的研究背景、意义和研究内容 | 第28-30页 |
| ·研究背景及意义 | 第28-29页 |
| ·研究内容 | 第29-30页 |
| 第二章 家蚕神经肽PTTH基因启动子的转录活性分析 | 第30-46页 |
| ·材料与方法 | 第30-36页 |
| ·试验材料 | 第30-31页 |
| ·试验试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31页 |
| ·家蚕基因组DNA的抽提 | 第31-32页 |
| ·家蚕PTTH启动子基因的扩增 | 第32-33页 |
| ·PCR产物的回收 | 第33页 |
| ·连接反应 | 第33-34页 |
| ·感受态细胞的大量制备 | 第34页 |
| ·连接产物的转化 | 第34页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第34-35页 |
| ·家蚕PTTH基因的序列测定 | 第35页 |
| ·抽提质粒DNA | 第35页 |
| ·荧光素酶报告基因的质粒构建 | 第35-36页 |
| ·昆虫细胞的培养和DNA质粒的转染 | 第36页 |
| ·细胞的裂解和荧光素酶β-Galactosidase活性的测定 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-44页 |
| ·家蚕PTTH基因启动子的克隆 | 第36-38页 |
| ·家蚕PTTH基因启动子序列分析及顺式作用元件预测 | 第38-39页 |
| ·家蚕PTTH基因启动子不同片段的报告质粒构建 | 第39-41页 |
| ·家蚕PTTH基因启动子活性分析 | 第41-42页 |
| ·外源昆虫激素对家蚕PTTH启动子活性的影响 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 调控家蚕PTTH基因表达的转录因子MEF2基因的克隆及表达 | 第46-57页 |
| ·材料与方法 | 第46-49页 |
| ·试验材料 | 第46页 |
| ·试验试剂 | 第46页 |
| ·主要仪器设备 | 第46-47页 |
| ·RNA抽提 | 第47页 |
| ·引物设计与合成 | 第47页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第47-48页 |
| ·PCR反应 | 第48页 |
| ·PCR产物的回收 | 第48页 |
| ·MEF2的ORF和pMD-18的连接 | 第48页 |
| ·连接产物的转化、鉴定 | 第48页 |
| ·序列的测序鉴定以及分析 | 第48页 |
| ·蛋白结构模拟 | 第48-49页 |
| ·家蚕MEF2的mRNA进行半定量分析 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-55页 |
| ·家蚕MEF2 cDNA的扩增 | 第49页 |
| ·家蚕MEF2基因ORF序列分析 | 第49-54页 |
| ·家蚕MEF2B的蛋白结构模拟 | 第54-55页 |
| ·家蚕脑MEF2基因mRNA的发育变化 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 家蚕PTTH基因及其受体Torso基因的发育表达 | 第57-68页 |
| ·材料与方法 | 第57-62页 |
| ·试验材料 | 第57页 |
| ·试验试剂 | 第57-58页 |
| ·主要仪器设备 | 第58页 |
| ·RNAiso Plus试剂盒提取RNA | 第58-59页 |
| ·使用DNase Ⅰ处理除去基因组DNA | 第59页 |
| ·RNA浓度的测定 | 第59页 |
| ·反转录成cDNA第一条链 | 第59-60页 |
| ·引物设计及鉴定引物质量 | 第60页 |
| ·标准曲线的制作 | 第60-61页 |
| ·荧光定量PCR | 第61页 |
| ·数据的处理 | 第61-62页 |
| ·结果与分析 | 第62-67页 |
| ·RNA抽提 | 第62-63页 |
| ·引物设计及PCR扩增 | 第63-64页 |
| ·家蚕PTTH基因发育变化 | 第64-66页 |
| ·家蚕Torso基因发育变化 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| 第五章 家蚕主要神经肽基因的发育表达 | 第68-90页 |
| ·材料与方法 | 第68页 |
| ·试验材料和试剂 | 第68页 |
| ·主要仪器设备 | 第68页 |
| ·实验方法 | 第68页 |
| ·结果与分析 | 第68-89页 |
| ·引物设计及PCR扩增 | 第68-70页 |
| ·家蚕DH-PBAN基因的发育变化 | 第70-71页 |
| ·家蚕EH基因的发育变化 | 第71-72页 |
| ·家蚕NPL基因的发育变化 | 第72-73页 |
| ·家蚕NPF2基因的发育变化 | 第73-74页 |
| ·家蚕AST-A基因的发育变化 | 第74-75页 |
| ·家蚕AST-C基因的发育变化 | 第75-76页 |
| ·家蚕Akh1基因的发育变化 | 第76-77页 |
| ·家蚕Akh2基因的发育变化 | 第77-79页 |
| ·家蚕Corazonin基因的发育变化 | 第79-80页 |
| ·家蚕Tachykinin基因的发育变化 | 第80-81页 |
| ·家蚕Orcokinin基因的发育变化 | 第81-82页 |
| ·家蚕Bursicon-α基因的发育变化 | 第82-83页 |
| ·家蚕SIFamide基因的发育变化 | 第83-84页 |
| ·家蚕IMFamide基因的发育变化 | 第84页 |
| ·家蚕CCAP基因的发育变化 | 第84-86页 |
| ·家蚕Dh31基因的发育变化 | 第86-87页 |
| ·家蚕CAPA基因的发育变化 | 第87-88页 |
| ·家蚕FMRFamide基因的发育变化 | 第88-89页 |
| ·讨论 | 第89-90页 |
| 第六章 总结与展望 | 第90-92页 |
| ·总结 | 第90-91页 |
| ·家蚕神经肽PTTH基因启动子的转录活性分析 | 第90页 |
| ·转录因子MEF2基因的克隆及表达 | 第90页 |
| ·家蚕PTTH基因及其受体Torso基因的发育表达 | 第90-91页 |
| ·家蚕主要神经肽基因的发育表达 | 第91页 |
| ·展望 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-98页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第98页 |
