| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-18页 |
| ·基因工程中常见的标记基因 | 第8-12页 |
| ·选择基因 | 第8-11页 |
| ·报告基因 | 第11-12页 |
| ·常用荧光蛋白的种类 | 第12-13页 |
| ·绿色荧光蛋白及衍生物 | 第12页 |
| ·红色荧光蛋白及衍生物 | 第12-13页 |
| ·尿卟啉原Ⅲ甲基化酶的性质及作用 | 第13-15页 |
| ·尿卟啉原Ⅲ甲基化酶 | 第13页 |
| ·UPMT的性质 | 第13-14页 |
| ·编码UPMT基因的结构多样性 | 第14页 |
| ·UPMT的应用 | 第14-15页 |
| ·PCR产物克隆及T载体制备 | 第15-16页 |
| ·T/A克隆法 | 第15页 |
| ·T载体制备方法 | 第15-16页 |
| ·常用T载体及重组质粒筛选方法 | 第16页 |
| ·常用T载体 | 第16页 |
| ·已报道的重组质粒的筛选方法 | 第16页 |
| ·融合蛋白技术与融合报告蛋白 | 第16-18页 |
| ·融合蛋白技术 | 第16-17页 |
| ·已报道指示上游蛋白水溶性的融合报告蛋白 | 第17-18页 |
| 2 引言 | 第18-20页 |
| ·本实验研究目的与意义 | 第18页 |
| ·实验的研究内容 | 第18-20页 |
| ·基于UPMT插入失活的T载体构建及功能的验证 | 第18-19页 |
| ·UPMT指示融合蛋白突变体的折叠和水溶性分析 | 第19-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-30页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·菌株来源 | 第20页 |
| ·质粒来源 | 第20页 |
| ·基因来源 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·仪器和设备 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-30页 |
| ·基于UPMT插入失活的T载体构建及功能的验证 | 第20-24页 |
| ·UPMT指示融合蛋白的折叠和水溶性分析 | 第24-30页 |
| 4 结果与分析 | 第30-39页 |
| ·基于UPMT插入失活的T载体及功能的验证 | 第30-33页 |
| ·UPMT的编码基因(cobA)克隆 | 第30页 |
| ·前T载体母本载体的选择 | 第30页 |
| ·前T载体构建 | 第30-31页 |
| ·前T载体菌株试验结果 | 第31页 |
| ·成熟T载体的生成 | 第31-32页 |
| ·菌斑颜色与阳性克隆的相关性试验结果 | 第32页 |
| ·成熟T载体克隆不同大小PCR产物的测试结果 | 第32-33页 |
| ·在pUC系统中三核苷酸插入的突变体蛋白表达分析 | 第33页 |
| ·UPMT指示融合蛋白的折叠和水溶性分析 | 第33-39页 |
| ·C端融合α-肽的融合表达载体构建 | 第33-36页 |
| ·菌落颜色与融合蛋白水溶性的相关性 | 第36页 |
| ·体外测定融合蛋白C端的α肽所具有的β-半乳糖苷酶活性结果 | 第36-37页 |
| ·α-肽融合蛋白诱导表达分析 | 第37页 |
| ·C端融合UPMT蛋白的融合表达载体构建 | 第37-38页 |
| ·菌落颜色与融合蛋白水溶性的相关性 | 第38页 |
| ·C端融合UPMT蛋白菌株的荧光测定结果 | 第38-39页 |
| 5 讨论 | 第39-41页 |
| ·基于UPMT插入失活的T载体构建及功能的验证 | 第39页 |
| ·UPMT指示融合蛋白的折叠和水溶性分析 | 第39-41页 |
| 6 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |