中文摘要 | 第1-14页 |
英文摘要 | 第14-20页 |
部分缩写的中英文对照 | 第20-21页 |
引言 | 第21-24页 |
第一篇 文献综述 | 第24-65页 |
第一章 精子成熟、精子蛋白和精子 RNA 研究进展 | 第24-65页 |
1 精子成熟 | 第24-29页 |
·精子结构 | 第24页 |
·精子发生 | 第24-26页 |
·精子在附睾中的成熟过程 | 第26-28页 |
·精子在射精过程和在精浆中的继续成熟 | 第28页 |
·精子在雌性生殖道中的变化 | 第28-29页 |
2 精子蛋白 | 第29-43页 |
·精浆蛋白 | 第29-41页 |
·主要精浆蛋白 | 第31-38页 |
·精子黏附蛋白家族(Spermadhesin) | 第31-35页 |
·富含半胱氨酸分泌蛋白家族(CRISP) | 第35-37页 |
·II 型纤维连接蛋白家族(Fn-2) | 第37-38页 |
·其它精浆蛋白 | 第38-41页 |
·透明带结合蛋白(ZPBP) | 第38-39页 |
·精子运动抑制因子(SPMI) | 第39-40页 |
·精子抗原(SPAG) | 第40-41页 |
·精子结构蛋白 | 第41-43页 |
·离子通道蛋白 | 第41-43页 |
·其它结构蛋白 | 第43页 |
3 精子 RNA | 第43-47页 |
·精子 RNA 种类 | 第44-45页 |
·精子 RNA 来源及在精子中定位 | 第45-46页 |
·精子 RNA 生物功能及应用 | 第46-47页 |
4 参考文献 | 第47-65页 |
第二篇 若干精子功能基因家族在公母猪生殖道的时空表达 | 第65-133页 |
第二章 Ca~(2+)离子通道蛋白基因家族克隆及其在公母猪生殖道的时空表达 | 第65-88页 |
1 材料与方法 | 第66-71页 |
·试验动物 | 第66页 |
·总 RNA 的提取和反转录 | 第66页 |
·Catsper1、2、4基因cDNA部分序列PCR克隆 | 第66-67页 |
·5’RACE | 第67-69页 |
·3’RACE | 第69-70页 |
·Catsper1-4基因的mRNA序列组装和蛋白的生物信息学分析 | 第70页 |
·Catsper1-4基因在公母猪生殖道的时空表达 | 第70-71页 |
2 结果 | 第71-83页 |
·Catsper1、Catsper2、Catsper4基因cDNA部分序列PCR克隆 | 第71-72页 |
·Catsper1-4基因5’RACE | 第72-73页 |
·Catsper1-4基因3’RACE | 第73-74页 |
·Catsper1-4基因mRNA序列组装及分析 | 第74-75页 |
·Catsper1-4蛋白的生物信息学分析 | 第75-76页 |
·Catsper1-4 基因在生殖道组织的时空表达 | 第76-83页 |
3 讨论 | 第83-85页 |
4 参考文献 | 第85-88页 |
第三章 ZPBP2 基因克隆及 ZPBP1/2 基因在公母猪生殖道的时空表达 | 第88-101页 |
1 材料与方法 | 第89-91页 |
·试验动物 | 第89页 |
·RNA 提取及cDNA 合成 | 第89页 |
·ZPBP2 克隆 | 第89-90页 |
·ZPBP2 蛋白生物信息学分析 | 第90页 |
·RT-PCR 检测分析 | 第90-91页 |
·统计分析 | 第91页 |
2 结果 | 第91-95页 |
·ZPBP2 基因的 PCR 克隆、5′RACE 和3′RACE | 第91-92页 |
·ZPBP2 cDNA 克隆鉴定 | 第92页 |
·ZPBP2 蛋白的生物信息学分析 | 第92-94页 |
·ZPBP1/2 在公母猪生殖道中的表达 | 第94-95页 |
3 讨论 | 第95-97页 |
4 参考文献 | 第97-101页 |
第四章 精子黏附蛋白基因家族在公母猪生殖道的时空表达 | 第101-114页 |
1 材料与方法 | 第102-103页 |
·试验动物 | 第102页 |
·总RNA的提取和反转录 | 第102页 |
·RT-PCR检测和统计分析 | 第102-103页 |
2 结果 | 第103-106页 |
·精子黏附蛋白基因家族在公猪生殖道中的表达分布 | 第103-104页 |
·精子黏附蛋白基因家族在母猪生殖道中的表达分布 | 第104页 |
·精子黏附蛋白基因家族的发育性表达 | 第104-106页 |
3 讨论 | 第106-110页 |
4 参考文献 | 第110-114页 |
第五章 CRISP 和 Fn-2 基因在公母猪生殖道的表达 | 第114-126页 |
1 材料与方法 | 第115-118页 |
·试验动物 | 第115页 |
·总 RNA 的提取和反转录 | 第115页 |
·RT-PCR 检测和统计分析 | 第115-118页 |
2 结果 | 第118-120页 |
·CRISP 和Fn-2 基因家族在公母猪生殖道组织的表达特性 | 第118页 |
·CRISP 和Fn-2 基因家族在公猪生殖道组织的发育性表达 | 第118-120页 |
3 讨论 | 第120-122页 |
4 参考文献 | 第122-126页 |
第六章 SPMI 基因在公母猪生殖道的时空表达 | 第126-133页 |
1 材料与方法 | 第126-128页 |
·试验动物 | 第126页 |
·总 RNA 的提取和反转录 | 第126页 |
·RT-PCR 分析 | 第126-128页 |
·统计分析 | 第128页 |
2 结果 | 第128-130页 |
3 讨论 | 第130-131页 |
4 参考文献 | 第131-133页 |
第三篇 若干精子功能基因家族在成熟精子中的m RNA 表达特性 | 第133-168页 |
第七章 精子 RNA 提取及cDNA 质量检测 | 第133-139页 |
1 材料与方法 | 第133-135页 |
·精子采集 | 第133-134页 |
·精子 RNA 提取 | 第134页 |
·第一链cDNA 合成 | 第134页 |
·RT-PCR 检测 | 第134-135页 |
·统计分析 | 第135页 |
2 结果 | 第135-137页 |
·上浮精子和未处理精子 RNA 质量比较 | 第135-136页 |
·精子 RNA 纯度检测 | 第136-137页 |
3 讨论 | 第137-138页 |
4 参考文献 | 第138-139页 |
第八章 若干精子功能基因家族在成熟精子中的mRNA 表达 | 第139-149页 |
1 材料与方法 | 第140-141页 |
2 结果 | 第141-142页 |
3 讨论 | 第142-144页 |
4 参考文献 | 第144-149页 |
第九章 精子 SPMI 和Spermadhesins 基因mRNA 表达水平与精子活力的关联 | 第149-159页 |
1 材料与方法 | 第150-152页 |
·精子采集 | 第150页 |
·半定量 RT-PCR 检测 | 第150-152页 |
·统计分析 | 第152页 |
2 结果 | 第152-154页 |
·高低活力精子组精子活力比较 | 第152页 |
·高低活力精子组Spermadhesins 基因mRNA 的相对表达差异 | 第152-153页 |
·高低活力精子组 SPMI 基因mRNA 的相对表达差异 | 第153-154页 |
3 讨论 | 第154-155页 |
4 参考文献 | 第155-159页 |
第十章 体外获能和顶体反应对精子Spermadhesins 和SPMI 基因的mRNA表达的影响 | 第159-168页 |
1 材料与方法 | 第160-161页 |
·溶液配制 | 第160页 |
·体外获能诱导 | 第160页 |
·体外顶体反应诱导 | 第160页 |
·CTC 染色 | 第160-161页 |
·半定量 RT-PCR 检测 | 第161页 |
·统计分析 | 第161页 |
2 结果 | 第161-165页 |
·精子体外获能诱导 | 第161-162页 |
·精子体外顶体反应诱导 | 第162-163页 |
·体外获能对精子Spermadhesins 和SPMI 基因的mRNA 表达的影响 | 第163-164页 |
·体外顶体反应对精子Spermadhesins 和SPMI 基因的mRNA 表达的影响 | 第164-165页 |
3 讨论 | 第165-166页 |
4 参考文献 | 第166-168页 |
总讨论 | 第168-180页 |
总结论 | 第180-181页 |
创新点 | 第181页 |
参考文献 | 第181-192页 |
附录 | 第192-195页 |
1 Catsper1-4 mRNA 序列 | 第192-194页 |
2 ZPBP2 m RNA 序列 | 第194-195页 |
致谢 | 第195-196页 |
攻读博士学位期间发表的论文和申请专利 | 第196-198页 |