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若干猪精子功能基因克隆及其mRNA在生殖道和成熟精子中的表达特性研究

中文摘要第1-14页
英文摘要第14-20页
部分缩写的中英文对照第20-21页
引言第21-24页
第一篇 文献综述第24-65页
 第一章 精子成熟、精子蛋白和精子 RNA 研究进展第24-65页
  1 精子成熟第24-29页
   ·精子结构第24页
   ·精子发生第24-26页
   ·精子在附睾中的成熟过程第26-28页
   ·精子在射精过程和在精浆中的继续成熟第28页
   ·精子在雌性生殖道中的变化第28-29页
  2 精子蛋白第29-43页
   ·精浆蛋白第29-41页
     ·主要精浆蛋白第31-38页
       ·精子黏附蛋白家族(Spermadhesin)第31-35页
       ·富含半胱氨酸分泌蛋白家族(CRISP)第35-37页
       ·II 型纤维连接蛋白家族(Fn-2)第37-38页
     ·其它精浆蛋白第38-41页
       ·透明带结合蛋白(ZPBP)第38-39页
       ·精子运动抑制因子(SPMI)第39-40页
       ·精子抗原(SPAG)第40-41页
   ·精子结构蛋白第41-43页
     ·离子通道蛋白第41-43页
     ·其它结构蛋白第43页
  3 精子 RNA第43-47页
   ·精子 RNA 种类第44-45页
   ·精子 RNA 来源及在精子中定位第45-46页
   ·精子 RNA 生物功能及应用第46-47页
  4 参考文献第47-65页
第二篇 若干精子功能基因家族在公母猪生殖道的时空表达第65-133页
 第二章 Ca~(2+)离子通道蛋白基因家族克隆及其在公母猪生殖道的时空表达第65-88页
  1 材料与方法第66-71页
   ·试验动物第66页
   ·总 RNA 的提取和反转录第66页
   ·Catsper1、2、4基因cDNA部分序列PCR克隆第66-67页
   ·5’RACE第67-69页
   ·3’RACE第69-70页
   ·Catsper1-4基因的mRNA序列组装和蛋白的生物信息学分析第70页
   ·Catsper1-4基因在公母猪生殖道的时空表达第70-71页
  2 结果第71-83页
   ·Catsper1、Catsper2、Catsper4基因cDNA部分序列PCR克隆第71-72页
   ·Catsper1-4基因5’RACE第72-73页
   ·Catsper1-4基因3’RACE第73-74页
   ·Catsper1-4基因mRNA序列组装及分析第74-75页
   ·Catsper1-4蛋白的生物信息学分析第75-76页
   ·Catsper1-4 基因在生殖道组织的时空表达第76-83页
  3 讨论第83-85页
  4 参考文献第85-88页
 第三章 ZPBP2 基因克隆及 ZPBP1/2 基因在公母猪生殖道的时空表达第88-101页
  1 材料与方法第89-91页
   ·试验动物第89页
   ·RNA 提取及cDNA 合成第89页
   ·ZPBP2 克隆第89-90页
   ·ZPBP2 蛋白生物信息学分析第90页
   ·RT-PCR 检测分析第90-91页
   ·统计分析第91页
  2 结果第91-95页
   ·ZPBP2 基因的 PCR 克隆、5′RACE 和3′RACE第91-92页
   ·ZPBP2 cDNA 克隆鉴定第92页
   ·ZPBP2 蛋白的生物信息学分析第92-94页
   ·ZPBP1/2 在公母猪生殖道中的表达第94-95页
  3 讨论第95-97页
  4 参考文献第97-101页
 第四章 精子黏附蛋白基因家族在公母猪生殖道的时空表达第101-114页
  1 材料与方法第102-103页
   ·试验动物第102页
   ·总RNA的提取和反转录第102页
   ·RT-PCR检测和统计分析第102-103页
  2 结果第103-106页
   ·精子黏附蛋白基因家族在公猪生殖道中的表达分布第103-104页
   ·精子黏附蛋白基因家族在母猪生殖道中的表达分布第104页
   ·精子黏附蛋白基因家族的发育性表达第104-106页
  3 讨论第106-110页
  4 参考文献第110-114页
 第五章 CRISP 和 Fn-2 基因在公母猪生殖道的表达第114-126页
  1 材料与方法第115-118页
   ·试验动物第115页
   ·总 RNA 的提取和反转录第115页
   ·RT-PCR 检测和统计分析第115-118页
  2 结果第118-120页
   ·CRISP 和Fn-2 基因家族在公母猪生殖道组织的表达特性第118页
   ·CRISP 和Fn-2 基因家族在公猪生殖道组织的发育性表达第118-120页
  3 讨论第120-122页
  4 参考文献第122-126页
 第六章 SPMI 基因在公母猪生殖道的时空表达第126-133页
  1 材料与方法第126-128页
   ·试验动物第126页
   ·总 RNA 的提取和反转录第126页
   ·RT-PCR 分析第126-128页
   ·统计分析第128页
  2 结果第128-130页
  3 讨论第130-131页
  4 参考文献第131-133页
第三篇 若干精子功能基因家族在成熟精子中的m RNA 表达特性第133-168页
 第七章 精子 RNA 提取及cDNA 质量检测第133-139页
  1 材料与方法第133-135页
   ·精子采集第133-134页
   ·精子 RNA 提取第134页
   ·第一链cDNA 合成第134页
   ·RT-PCR 检测第134-135页
   ·统计分析第135页
  2 结果第135-137页
   ·上浮精子和未处理精子 RNA 质量比较第135-136页
   ·精子 RNA 纯度检测第136-137页
  3 讨论第137-138页
  4 参考文献第138-139页
 第八章 若干精子功能基因家族在成熟精子中的mRNA 表达第139-149页
  1 材料与方法第140-141页
  2 结果第141-142页
  3 讨论第142-144页
  4 参考文献第144-149页
 第九章 精子 SPMI 和Spermadhesins 基因mRNA 表达水平与精子活力的关联第149-159页
  1 材料与方法第150-152页
   ·精子采集第150页
   ·半定量 RT-PCR 检测第150-152页
   ·统计分析第152页
  2 结果第152-154页
   ·高低活力精子组精子活力比较第152页
   ·高低活力精子组Spermadhesins 基因mRNA 的相对表达差异第152-153页
   ·高低活力精子组 SPMI 基因mRNA 的相对表达差异第153-154页
  3 讨论第154-155页
  4 参考文献第155-159页
 第十章 体外获能和顶体反应对精子Spermadhesins 和SPMI 基因的mRNA表达的影响第159-168页
  1 材料与方法第160-161页
   ·溶液配制第160页
   ·体外获能诱导第160页
   ·体外顶体反应诱导第160页
   ·CTC 染色第160-161页
   ·半定量 RT-PCR 检测第161页
   ·统计分析第161页
  2 结果第161-165页
   ·精子体外获能诱导第161-162页
   ·精子体外顶体反应诱导第162-163页
   ·体外获能对精子Spermadhesins 和SPMI 基因的mRNA 表达的影响第163-164页
   ·体外顶体反应对精子Spermadhesins 和SPMI 基因的mRNA 表达的影响第164-165页
  3 讨论第165-166页
  4 参考文献第166-168页
总讨论第168-180页
总结论第180-181页
创新点第181页
参考文献第181-192页
附录第192-195页
 1 Catsper1-4 mRNA 序列第192-194页
 2 ZPBP2 m RNA 序列第194-195页
致谢第195-196页
攻读博士学位期间发表的论文和申请专利第196-198页

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