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华支睾吸虫病高反应原性抗原的筛选及表达

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
前言第8-9页
第一章 综述第9-13页
   ·华支睾吸虫生活史第9页
   ·分子生物学方法鉴定华支睾吸虫第9页
   ·华支睾吸虫流行病学第9-10页
   ·华支睾吸虫病临床症状和病理变化第10-11页
   ·华支睾吸虫基因重组诊断抗原第11-12页
   ·华支睾吸虫病的防治第12-13页
第二章 华支睾吸虫感染动物模型的建立第13-22页
   ·材料第13-14页
     ·实验动物第13页
     ·试剂第13-14页
     ·主要仪器第14页
   ·方法第14-16页
     ·华支睾吸虫囊蚴的分离第14页
     ·华支睾吸虫囊蚴的形态学和PCR 鉴定第14页
     ·囊蚴脱囊第14-15页
     ·人工灌胃感染实验动物第15页
     ·华支睾吸虫虫体抗原的制备第15页
     ·间接ELISA 实验方法第15-16页
     ·肝脏病理标本组织石蜡切片制备第16页
   ·结果第16-20页
     ·华支睾吸虫囊蚴的收集和PCR 鉴定第16页
     ·华支睾吸虫囊蚴脱囊第16-17页
     ·华支睾吸虫感染动物模型第17-20页
   ·讨论第20-22页
第三章 华支睾吸虫脱囊幼虫CDNA 文库的免疫学筛选第22-28页
   ·材料和仪器第22-23页
   ·方法第23-25页
     ·免疫筛选血清的确定第23页
     ·特异性抗体探针的处理第23页
       ·宿主菌的制备第23页
       ·λZAP 噬菌蓝斑扩增和血清抗体的纯化第23页
     ·华支睾吸虫脱囊幼虫cDNA 文库的免疫筛选第23-24页
     ·阳性克隆的体外切割与转染第24-25页
     ·阳性克隆的PCR 鉴定第25页
     ·序列分析第25页
   ·结果第25-26页
     ·华支睾吸虫脱囊幼虫免疫筛选第25-26页
     ·通用引物PCR 扩增鉴定重组噬菌斑插入片段大小第26页
     ·cDNA 序列测定及分析第26页
   ·讨论第26-28页
第四章 CS-GLY 克隆表达第28-46页
   ·材料和方法第28-36页
     ·材料第28-31页
       ·载体和菌种第28页
       ·主要工具酶和试剂第28页
       ·主要仪器第28页
       ·试剂的配制第28-31页
     ·方法第31-36页
       ·引物设计第31页
       ·DNA 的定量第31页
       ·大肠杆菌感受态的制备第31页
       ·融合表达载体的构建第31-34页
       ·重组蛋白的诱导表达及纯化第34-35页
       ·重组蛋白的Western blot 分析第35-36页
   ·结果第36-44页
     ·华支睾吸虫特异性基因CS-GLY 的生物信息学分析结果第36-39页
     ·目的基因的PCR 扩增结果第39-41页
     ·融合表达载体的构建及鉴定第41-43页
     ·重组蛋白的诱导表达第43-44页
     ·重组蛋白的Western blot 鉴定第44页
   ·讨论第44-46页
结论第46-47页
参考文献第47-50页
致谢第50-51页
作者简介第51页

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