| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第14-16页 |
| 第1章 文献综述 | 第16-43页 |
| ·多杀性巴氏杆菌概述 | 第16-19页 |
| ·猪巴氏杆菌病的流行与危害 | 第19-29页 |
| ·多杀性巴氏杆菌毒力因子的研究进展 | 第29-37页 |
| ·病原菌的分子分型技术 | 第37-43页 |
| 第2章 研究的目的和意义 | 第43-44页 |
| 第3章 材料与方法 | 第44-70页 |
| ·实验材料 | 第44-51页 |
| ·菌株、质粒和培养条件 | 第44-46页 |
| ·工具酶和试剂 | 第46页 |
| ·抗生素标准品 | 第46-47页 |
| ·主要培养基的配制 | 第47-48页 |
| ·主要溶液的配制 | 第48-50页 |
| ·主要实验器材 | 第50页 |
| ·实验动物 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-70页 |
| ·病料和棉拭子样品的采集 | 第51页 |
| ·病原菌的分离鉴定 | 第51-52页 |
| ·细菌的PCR检测 | 第52页 |
| ·Pm的荚膜分型 | 第52-54页 |
| ·Pm临床分离株的致病性试验 | 第54页 |
| ·Pm的药物敏感性分析 | 第54-55页 |
| ·耐药基因的PCR扩增 | 第55-57页 |
| ·毒力基因的PCR检测 | 第57-59页 |
| ·Pm的分子多样性分析 | 第59-60页 |
| ·toxA基因序列分析 | 第60页 |
| ·T~+Pm对小鼠的半数致死性试验(寇氏(Korbor)法) | 第60-61页 |
| ·T~+Pm鼻腔感染猪模型的建立 | 第61页 |
| ·toxA基因亚克隆表达载体的构建 | 第61-63页 |
| ·融合蛋白的表达和纯化 | 第63-65页 |
| ·毒素PMT的ELISA抗体检测 | 第65-66页 |
| ·组织病理学检查 | 第66-67页 |
| ·免疫组织化学染色检查(间接法) | 第67-68页 |
| ·rPMT-N和rPMT-C的生物学活性试验 | 第68-69页 |
| ·rPMT-N和rPMT-C对小鼠的免疫原性 | 第69页 |
| ·rPMT-N和rPMT-C对仔猪的免疫效力试验 | 第69页 |
| ·统计分析 | 第69-70页 |
| 第4章 结果与分析 | 第70-118页 |
| ·多杀性巴氏杆菌在我国部分地区猪群中的流行现状分析 | 第70-75页 |
| ·健康猪群细菌的分离鉴定结果与分析 | 第70-72页 |
| ·Pm在猪群中的分离与流行情况分析 | 第72页 |
| ·猪源Pm分离株的荚膜血清型鉴定结果 | 第72-73页 |
| ·Pm共感染菌的分离鉴定与分析 | 第73页 |
| ·致病性试验结果 | 第73-75页 |
| ·致病性与分离株来源的对比分析 | 第75页 |
| ·多杀性巴氏杆菌分离株的耐药表型与基因型的分析 | 第75-84页 |
| ·猪源Pm的药物敏感性 | 第75-76页 |
| ·猪源Pm的多重耐药性 | 第76页 |
| ·血清型与耐药性的关系分析 | 第76-79页 |
| ·耐药基因在Pm分离株中的流行 | 第79-83页 |
| ·耐药表型与基因型的相关性分析 | 第83-84页 |
| ·猪源多杀性巴氏杆菌的毒力基因型与分布特征研究 | 第84-88页 |
| ·PCR检测方法的建立 | 第84页 |
| ·Pm毒力因子的检测 | 第84-85页 |
| ·毒力因子在不同荚膜血清型的分布 | 第85页 |
| ·毒力因子的相关性分析 | 第85-88页 |
| ·毒力基因型与致病力的关系 | 第88页 |
| ·猪源多杀性巴氏杆菌分离株的分子多样性研究 | 第88-96页 |
| ·PCR指纹分析引物的确定 | 第88-89页 |
| ·稳定性 | 第89-90页 |
| ·分辨力 | 第90-91页 |
| ·RAPD指纹分析 | 第91-92页 |
| ·(GTG)5-PCR指纹分析 | 第92页 |
| ·Eric-PCR指纹分析 | 第92页 |
| ·比较分析Pm的分子多样性 | 第92-96页 |
| ·产毒多杀性巴氏杆菌毒素toxA基因的分子特征与致病性研究 | 第96-109页 |
| ·toxA基因的扩增 | 第96页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第96-97页 |
| ·toxA基因的序列分析 | 第97-98页 |
| ·氨基酸推导序列的分析 | 第98-99页 |
| ·系统进化分析 | 第99-100页 |
| ·T~+Pm对小鼠半数致死量的测定 | 第100页 |
| ·毒素PMT的提纯 | 第100-101页 |
| ·PMT的SDS-PAGE检测与Western-blot分析 | 第101页 |
| ·猪抗PMT高免血清的制备 | 第101-102页 |
| ·免疫组化方法的建立与优化 | 第102-103页 |
| ·动物感染模型的建立 | 第103-109页 |
| ·重组产毒多杀性巴氏杆菌毒素PMT的N-端和C-端蛋白的生物学活性与免疫原性 | 第109-118页 |
| ·toxA基因亚克隆表达载体的鉴定及序列分析 | 第109-110页 |
| ·重组质粒的原核表达、纯化及Western blot检测 | 第110-111页 |
| ·ELISA毒素抗体检测方法的建立 | 第111页 |
| ·rPMT-N和rPMT-C的生物学活性 | 第111-113页 |
| ·rPMT-N和rPMT-C对小鼠的免疫效力试验 | 第113-114页 |
| ·rPMT-N和rPMT-C对仔猪的免疫效力试验 | 第114-118页 |
| 第5章 讨论 | 第118-128页 |
| ·多杀性巴氏杆菌在我国猪群中的流行现状 | 第118-119页 |
| ·猪源多杀性巴氏杆菌的多重耐药性 | 第119-121页 |
| ·猪源多杀性巴氏杆菌的毒力基因型与分布特征 | 第121-122页 |
| ·猪源多杀性巴氏杆菌的分子分型与遗传多样性 | 第122-124页 |
| ·产毒多杀性巴氏杆菌毒素toxA基因的分子特征与致病性 | 第124-125页 |
| ·毒素PMT的N-端和C-端蛋白的生物学活性及免疫原性 | 第125-128页 |
| 第6章 结论 | 第128-129页 |
| 参考文献 | 第129-148页 |
| PUBLICATIONS | 第148-149页 |
| PATENT AND VETERINARY DRUGS | 第149-150页 |
| CURRICULUM VITAE | 第150-151页 |
| 致谢 | 第151页 |
