| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1.1 植物应对盐胁迫的机制 | 第13-14页 |
| 1.2 植物细胞的抗氧化系统 | 第14-16页 |
| 1.2.1 植物细胞中活性氧的产生 | 第14-15页 |
| 1.2.2 植物的抗氧化酶系统 | 第15页 |
| 1.2.3 植物的非抗氧化酶系统 | 第15-16页 |
| 1.3 大豆异黄酮在植物体内的生理作用 | 第16-17页 |
| 1.4 大豆异黄酮的研究进展 | 第17-24页 |
| 1.4.1 大豆中异黄酮的化学性质及提取方法 | 第18-19页 |
| 1.4.2 大豆异黄酮在豆科植物体内的分布 | 第19-20页 |
| 1.4.3 大豆体内异黄酮的积累 | 第20-21页 |
| 1.4.4 异黄酮在植物体内的代谢途径 | 第21-24页 |
| 1.5 本文的研究目的和意义 | 第24-27页 |
| 第二章 盐胁迫下大豆生长和种子中异黄酮含量的变化 | 第27-35页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 材料和方法 | 第27-29页 |
| 2.2.1 材料的培养 | 第27-28页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第28-29页 |
| 2.3 结果分析 | 第29-32页 |
| 2.3.1 盐胁迫对大豆幼苗生长的影响 | 第29-31页 |
| 2.3.2 盐胁迫对不同生长阶段大豆种子异黄酮含量的影响 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-35页 |
| 2.4.1 盐胁迫对大豆造成不同程度的伤害 | 第32-33页 |
| 2.4.2 盐胁迫促进大豆种子中异黄酮的积累 | 第33-35页 |
| 第三章 盐胁迫下大豆幼苗叶和根部组织中异黄酮含量及GmIFS1和GmIFS2基因表达的变化 | 第35-43页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 材料和方法 | 第35-38页 |
| 3.2.1 材料培养 | 第35-36页 |
| 3.2.2 异黄酮的提取及含量测定 | 第36页 |
| 3.2.3 IFS1和IFS2基因的荧光定量分析 | 第36页 |
| 3.2.4 RNA的提取和完整性检测 | 第36-37页 |
| 3.2.5 RNA的反转录 | 第37页 |
| 3.2.6 基因的Real-Time PCR反应 | 第37-38页 |
| 3.2.7 数据分析 | 第38页 |
| 3.2.8 统计分析 | 第38页 |
| 3.3 结果分析 | 第38-41页 |
| 3.3.1 盐胁迫对大豆材料叶片中GmIFS1和GmIFS2基因的表达和异黄酮含量的影响 | 第38-40页 |
| 3.3.2 盐胁迫对大豆材料根部中GmIFS1和GmIFS2基因的表达和异黄酮含量的影响 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 GmCHS7基因表达对大豆子叶发根中异黄酮含量的影响 | 第43-51页 |
| 4.1 引言 | 第43页 |
| 4.2 材料与方法 | 第43-45页 |
| 4.2.1 材料的培养 | 第43-44页 |
| 4.2.2 菌种及载体 | 第44页 |
| 4.2.3 酶及其它生化试剂 | 第44页 |
| 4.2.4 实验方法 | 第44-45页 |
| 4.3 结果分析 | 第45-47页 |
| 4.3.1 盐胁迫促进了CHS7基因在大豆材料根部和叶部的表达 | 第45-46页 |
| 4.3.2 转GmCHS7基因发根的分子鉴定 | 第46页 |
| 4.3.3 转GmCHS7基因发根的异黄酮含量测定 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-51页 |
| 第五章 转GmIFS1基因大豆子叶发根的异黄酮含量和耐盐性 | 第51-63页 |
| 5.1 引言 | 第51页 |
| 5.2 材料与方法 | 第51-57页 |
| 5.2.1 材料培养 | 第51-52页 |
| 5.2.2 菌种及载体 | 第52页 |
| 5.2.3 扩增GmIFS1基因CDS序列的引物设计 | 第52页 |
| 5.2.4 大豆幼苗的叶片RNA的提取与反转录 | 第52页 |
| 5.2.5 IFS1基因的CDS序列扩增 | 第52-53页 |
| 5.2.6 目的片段的回收与连接 | 第53页 |
| 5.2.7 克隆载体的构建 | 第53-54页 |
| 5.2.8 表达载体的构建 | 第54-55页 |
| 5.2.9 农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)K599感受态细胞制备 | 第55页 |
| 5.2.10 质粒转化农杆菌K599 | 第55-56页 |
| 5.2.11 大豆子叶发根的农杆菌转化、培养及盐胁迫 | 第56页 |
| 5.2.12 酶及其它生化试剂 | 第56-57页 |
| 5.3 结果分析 | 第57-61页 |
| 5.3.1 大豆叶片中RNA的提取 | 第57页 |
| 5.3.2 真核表达载体的构建 | 第57-61页 |
| 5.3.3 大豆子叶发根的转化及异黄酮含量的测定 | 第61页 |
| 5.3.4 转GmIFS1发根耐盐性分析 | 第61页 |
| 5.4 讨论 | 第61-63页 |
| 第六章 转GmIFS1烟草的耐盐性分析 | 第63-71页 |
| 6.1 引言 | 第63页 |
| 6.2 材料和方法 | 第63-68页 |
| 6.2.1 转GmIFS1基因烟草的培养 | 第63-68页 |
| 6.2.2.1 转GmIFS1基因烟草的分子鉴定 | 第64页 |
| 6.2.2.2 转GmIFS1基因烟草DNA水平的拷贝数估算 | 第64页 |
| 6.2.2.3 转GmIFS1基因烟草的半定量分析 | 第64页 |
| 6.2.2.4 转GmIFS1基因烟草的盐胁迫 | 第64-65页 |
| 6.2.2.5 转GmIFS1基因烟草叶片提取物的抗氧化分析 | 第65页 |
| 6.2.2.6 数据分析 | 第65-68页 |
| 6.4 讨论 | 第68-71页 |
| 第七章 转GmCHS7基因烟草耐盐性分析 | 第71-83页 |
| 7.1 引言 | 第71页 |
| 7.2 材料和方法 | 第71-75页 |
| 7.2.1 | 第71-73页 |
| 7.2.1.1 无菌烟草的培养 | 第71-72页 |
| 7.2.1.2 大豆材料的培养 | 第72页 |
| 7.2.1.3 GmCHS基因表达载体的构建 | 第72页 |
| 7.2.1.4 含GmCHS7基因的表达载体的构建 | 第72-73页 |
| 7.2.1.5 农杆菌的转化 | 第73页 |
| 7.2.2 | 第73-75页 |
| 7.2.2.1 烟草的转化 | 第73页 |
| 7.2.2.2 转GmCHS7基因烟草的DNA分子鉴定 | 第73-74页 |
| 7.2.2.3 转GmCHS7基因烟草DNA水平的拷贝数估算 | 第74页 |
| 7.2.2.4 转GmCHS7基因烟草的半定量分析 | 第74页 |
| 7.2.2.5 转GmCHS7基因烟草的耐盐性和总黄酮含量测定 | 第74-75页 |
| 7.3 结果分析 | 第75-82页 |
| 7.3.1 表达载体的构建 | 第75-76页 |
| 7.3.2 烟草的转化和PCR分子鉴定 | 第76页 |
| 7.3.3 转GmCHS7基因烟草的耐盐性分析 | 第76页 |
| 7.3.4 转GmCHS7基因烟草叶片中总黄酮含量和抗氧化性测定 | 第76-82页 |
| 7.4 讨论分析 | 第82-83页 |
| 全文讨论 | 第83-85页 |
| 全文结论 | 第85-87页 |
| 创新性 | 第87-89页 |
| 存在的问题和展望 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-99页 |
| 附录 | 第99-101页 |
| 缩略语(Abbreviations) | 第99-100页 |
| 大豆发根的DNA提取 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-103页 |
| 攻读学位期间发表及投稿的学术论文目录 | 第103页 |
