| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-40页 |
| 1.1 外泌体 | 第11-13页 |
| 1.1.1 外泌体概述 | 第11页 |
| 1.1.2 外泌体内容物 | 第11-13页 |
| 1.2 外泌体研究经典技术 | 第13-18页 |
| 1.2.1 外泌体分离技术 | 第13-15页 |
| 1.2.2 外泌体检测技术 | 第15-17页 |
| 1.2.3 外泌体成像技术 | 第17-18页 |
| 1.3 外泌体研究新技术 | 第18-27页 |
| 1.3.1 基于比色分析检测技术 | 第18-20页 |
| 1.3.2 基于SERS分析检测技术 | 第20-22页 |
| 1.3.3 基于SPR分析检测技术 | 第22-23页 |
| 1.3.4 基于核磁共振分析检测技术 | 第23-24页 |
| 1.3.5 基于电化学传感分析检测技术 | 第24-27页 |
| 1.4 微流控技术应用于外泌体分析检测 | 第27-33页 |
| 1.4.1 基于免疫荧光检测外泌体的微流控技术 | 第27-30页 |
| 1.4.2 基于比色法检测外泌体的微流控技术 | 第30-32页 |
| 1.4.3 单个外泌体分析的微流控技术 | 第32-33页 |
| 1.5 外泌体应用于靶向递送 | 第33-38页 |
| 1.5.1 递送药物 | 第33-35页 |
| 1.5.2 递送RNA | 第35-37页 |
| 1.5.3 递送CRISPR/Cas9系统 | 第37-38页 |
| 1.6 选题意义和研究内容 | 第38-40页 |
| 第二章 基于微流控芯片的肿瘤外泌体分离富集与检测的研究 | 第40-62页 |
| 2.1 引言 | 第40页 |
| 2.2 实验原理 | 第40-41页 |
| 2.3 实验试剂与设备 | 第41-43页 |
| 2.3.1 实验探针 | 第41-42页 |
| 2.3.2 实验试剂 | 第42-43页 |
| 2.3.3 实验设备 | 第43页 |
| 2.4 实验方法 | 第43-49页 |
| 2.4.1 肝癌细胞培养 | 第43-44页 |
| 2.4.2 外泌体纯化与定量 | 第44页 |
| 2.4.3 磁珠偶联Tim4蛋白(Tim4 beads)的制备 | 第44页 |
| 2.4.4 微流控芯片设计和制造 | 第44-46页 |
| 2.4.5 芯片捕获和电化学检测外泌体 | 第46页 |
| 2.4.6 验证LGCD与外泌体的结合能力 | 第46-47页 |
| 2.4.7 酶联免疫吸附测定(ELISA) | 第47-48页 |
| 2.4.8 蛋白质印迹(Western Blot) | 第48页 |
| 2.4.9 血清样本分析 | 第48-49页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第49-61页 |
| 2.5.1 微流控捕获外泌体可行性分析 | 第49-50页 |
| 2.5.2 捕获效率计算与优化 | 第50-52页 |
| 2.5.3 外泌体表征 | 第52-53页 |
| 2.5.4 电化学检测外泌体可行性分析 | 第53-54页 |
| 2.5.5 验证探针与外泌体结合能力 | 第54-56页 |
| 2.5.6 电化学检测条件优化 | 第56-57页 |
| 2.5.7 灵敏度分析 | 第57-59页 |
| 2.5.8 酶联免疫吸附测定(ELISA) | 第59页 |
| 2.5.9 血清样本分析 | 第59-60页 |
| 2.5.10 准确度分析 | 第60-61页 |
| 2.6 本章小结 | 第61-62页 |
| 第三章 CPPS表面修饰外泌体用于药物递送的研究 | 第62-80页 |
| 3.1 引言 | 第62页 |
| 3.2 实验原理 | 第62-63页 |
| 3.3 实验试剂与设备 | 第63-65页 |
| 3.3.1 实验探针 | 第63-64页 |
| 3.3.2 实验试剂 | 第64-65页 |
| 3.3.3 实验设备 | 第65页 |
| 3.4 实验方法 | 第65-69页 |
| 3.4.1 外泌体富集纯化与荧光标记 | 第65-66页 |
| 3.4.2 外泌体改造修饰 | 第66页 |
| 3.4.3 R9多肽与G3139修饰量计算 | 第66-67页 |
| 3.4.4 外泌体修饰表征 | 第67页 |
| 3.4.5 荧光共聚焦拍摄 | 第67-68页 |
| 3.4.6 流式细胞仪分析 | 第68页 |
| 3.4.7 qRT-PCR定量Bcl-2 mRNA表达 | 第68页 |
| 3.4.8 Western blot定量Bcl-2蛋白表达 | 第68-69页 |
| 3.4.9 细胞毒性实验 | 第69页 |
| 3.5 结果与讨论 | 第69-79页 |
| 3.5.1 去除游离多肽和G3139可行性 | 第69页 |
| 3.5.2 表面修饰条件优化 | 第69-70页 |
| 3.5.3 单个外泌体上R9与G3139修饰条数 | 第70-71页 |
| 3.5.4 修饰前后外泌体表征 | 第71-72页 |
| 3.5.5 外泌体被细胞摄取时间梯度 | 第72-74页 |
| 3.5.6 探究修饰前后细胞摄取外泌体途径 | 第74-76页 |
| 3.5.7 修饰后外泌体递送G3139胞内定位 | 第76-77页 |
| 3.5.8 修饰后外泌体递送G3139后Bcl-2 mRNA水平 | 第77-78页 |
| 3.5.9 修饰后外泌体递送G3139后Bcl-2蛋白水平 | 第78-79页 |
| 3.5.10 细胞毒性实验 | 第79页 |
| 3.6 本章小结 | 第79-80页 |
| 第四章 总结与展望 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 附录 | 第93页 |
