| 英文缩写词表 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 第1章 绪论 | 第14-23页 |
| 1.1 缺氧损伤研究现状 | 第14-18页 |
| 1.1.1 缺氧引起的症状及其危害 | 第14-15页 |
| 1.1.2 抗缺氧损伤的生理机制 | 第15-17页 |
| 1.1.3 抗缺氧损伤治疗的研究现状 | 第17-18页 |
| 1.2 初级纤毛 | 第18-20页 |
| 1.2.1 初级纤毛简介 | 第18-19页 |
| 1.2.2 与初级纤毛相关的信号通路 | 第19-20页 |
| 1.3 缺氧与初级纤毛 | 第20-21页 |
| 1.3.1 缺氧与初级纤毛长度及发生率的关系 | 第20-21页 |
| 1.3.2 抗缺氧途径与初级纤毛 | 第21页 |
| 1.4 课题研究内容及意义 | 第21-23页 |
| 第2章 缺氧对PMVEC细胞初级纤毛及氧化/抗氧化的影响 | 第23-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 2.2.1 PMVEC细胞培养与形态学观察 | 第25页 |
| 2.2.2 PMVEC细胞的物理性缺氧处理 | 第25-26页 |
| 2.2.3 免疫荧光染色观察初级纤毛 | 第26页 |
| 2.2.4 细胞全蛋白的提取 | 第26页 |
| 2.2.5 氧化产物MDA、ROS的检测 | 第26-27页 |
| 2.2.6 抗氧化酶GSH-PX、SOD酶活力值检测 | 第27-28页 |
| 2.2.7 统计学分析 | 第28页 |
| 2.3 结果 | 第28-34页 |
| 2.3.1 缺氧对PMVEC细胞形态的影响 | 第28页 |
| 2.3.2 缺氧后初级纤毛发生率的变化 | 第28-30页 |
| 2.3.3 缺氧后初级纤毛长度的变化 | 第30页 |
| 2.3.4 缺氧对氧化产物含量的影响 | 第30-32页 |
| 2.3.5 缺氧对抗氧化酶活力的影响 | 第32-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-36页 |
| 第3章 siRNA干扰法建立去除初级纤毛PMVEC细胞模型 | 第36-46页 |
| 3.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 实验细胞 | 第36页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-42页 |
| 3.2.1 PMVEC细胞培养 | 第37页 |
| 3.2.2 siRNA法干扰初级纤毛的发生 | 第37-39页 |
| 3.2.3 RT-PCR基因检测 | 第39-41页 |
| 3.2.4 Western Blot蛋白检测 | 第41页 |
| 3.2.5 统计学分析 | 第41-42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-45页 |
| 3.3.1 质粒转染效率分析 | 第42页 |
| 3.3.2 干扰前后初级纤毛的变化 | 第42-43页 |
| 3.3.3 干扰前后IFT-88 的基因和蛋白表达情况 | 第43-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-46页 |
| 第4章 初级纤毛对在PMVEC抗缺氧损伤中的作用及其机制 | 第46-57页 |
| 4.1 实验材料 | 第46页 |
| 4.1.1 实验细胞 | 第46页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第46页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-48页 |
| 4.2.1 siRNA法干扰初级纤毛的发生 | 第46-47页 |
| 4.2.2 PMVEC细胞的物理性缺氧处理 | 第47页 |
| 4.2.3 抗氧化酶GSH-PX、SOD酶活力值检测 | 第47页 |
| 4.2.4 氧化产物MDA、ROS含量检测 | 第47页 |
| 4.2.5 免疫荧光染色 | 第47页 |
| 4.2.6 Western Blot蛋白检测 | 第47页 |
| 4.2.7 RT-PCR基因检测 | 第47页 |
| 4.2.8 统计学分析 | 第47-48页 |
| 4.3 结果与分析 | 第48-55页 |
| 4.3.1 去除初级纤毛前后胞内氧化产物的变化 | 第48-50页 |
| 4.3.2 去除初级纤毛前后胞内抗氧化酶活力的变化 | 第50-51页 |
| 4.3.3 去除初级纤毛前后Nrf2、HIF-1α和HIF-2α基因表达变化情况 | 第51-53页 |
| 4.3.4 去除初级纤毛前后Nrf2、HIF-1α和HIF-2α蛋白表达量的变化 | 第53-54页 |
| 4.3.5 去除初级纤毛前后Nrf2、HIF-1α和HIF-2α发生核转位情况 | 第54-55页 |
| 4.4 讨论 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第67页 |
