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低频脉冲电磁场通过初级纤毛调控的IGF-1R/NO信号通路促进骨形成的研究

英文缩写词表第8-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-12页
第1章 绪论第13-22页
    1.1 骨质疏松症的防治现状第13-15页
        1.1.1 骨与骨重建第13页
        1.1.2 骨质疏松症的定义第13-14页
        1.1.3 骨质疏松症的分类和发病原因第14-15页
        1.1.4 骨质疏松症的防治现状第15页
    1.2 骨质疏松症的低频脉冲电磁场疗法第15-19页
        1.2.1 电磁场具有防治骨质疏松症的潜力第15-16页
        1.2.2 电磁场的“生物窗效应”第16-17页
        1.2.3 电磁场与初级纤毛第17-19页
            1.2.3.1 初级纤毛第17-18页
            1.2.3.2 初级纤毛内的信号通路第18页
            1.2.3.3 初级纤毛与电磁场第18-19页
    1.3 本论文假说及开展的研究工作第19-22页
第2章 PEMFs促进成骨细胞成熟矿化须激活定位于初级纤毛内的IGF-1R第22-41页
    2.1 实验材料第22-23页
        2.1.1 实验动物第22页
        2.1.2 主要试剂第22-23页
        2.1.3 主要仪器设备第23页
    2.2 实验方法第23-31页
        2.2.1 新生大鼠颅骨成骨细胞(ROBs)的提取、分离与培养第23页
        2.2.2 电磁场发生装置第23-24页
        2.2.3 ROBs的电磁场处理第24页
        2.2.4 碱性磷酸酶(ALP)活性测定第24-25页
        2.2.5 ALP组织化学染色第25页
        2.2.6 钙化结节染色第25-26页
        2.2.7 Western Blotting第26-27页
        2.2.8 免疫荧光染色第27-28页
        2.2.9 siRNA干扰质粒的构建及其制备第28-29页
        2.2.10 干扰质粒的转染第29-30页
        2.2.11 一氧化氮含量测定(NO)第30-31页
        2.2.12 统计学分析第31页
    2.3 结果与分析第31-39页
        2.3.1 PEMFs能够促进IGF-1R蛋白表达分析结果第31-32页
        2.3.2 IGF-1R阻断剂可以拮抗PEMFs促进成骨形成活性结果检测第32-34页
            2.3.2.1 碱性磷酸酶活性测定结果第32页
            2.3.2.2 碱性磷酸酶染色结果第32-33页
            2.3.2.3 茜素红钙化结节染色结果第33-34页
        2.3.3 初级纤毛与IGF-1R共定位结果第34-35页
        2.3.4 干扰初级纤毛后IGF-1R下游信号途径检测结果第35-39页
            2.3.4.1 细胞形态变化检测结果第35页
            2.3.4.2 初级纤毛形态变化检测结果第35-36页
            2.3.4.3 干扰初级纤毛后ALP活性检测结果第36-37页
            2.3.4.4 干扰初级纤毛后NO含量检测结果第37页
            2.3.4.5 干扰初级纤毛后IGF-1R下游PI3K信号途径蛋白表达分析结果第37-39页
            2.3.4.6 干扰初级纤毛后IGF-1R下游NO信号途径蛋白表达分析结果第39页
    2.4 讨论第39-41页
第3章 PEMFs促进成骨细胞成熟矿化依赖于IGF-1R/PI3K/AKT/NO信号通路第41-51页
    3.1 实验材料第41-42页
        3.1.1 实验动物第41页
        3.1.2 主要试剂第41-42页
        3.1.3 主要仪器设备第42页
    3.2 实验方法第42页
        3.2.1 大鼠乳鼠颅骨成骨细胞的提取、换液和传代培养第42页
        3.2.2 PEMFs 处理第42页
        3.2.3 ALP 活性测定及染色第42页
        3.2.4 茜素红钙化结节染色第42页
        3.2.5 Western Blotting第42页
        3.2.6 一氧化氮含量测定(NO)第42页
        3.2.7 统计学分析第42页
    3.3 结果与分析第42-49页
        3.3.1 GSK阻断IGF-1R后下游PI3K/AKT信号通路蛋白表达分析结果第42-44页
        3.3.2 GSK阻断IGF-1R后下游NO信号通路蛋白表达分析结果第44-45页
        3.3.3 NO 信号通路位于 PI3K/AKT 信号途径下游检测结果第45-49页
            3.3.3.1 PI3K阻断剂筛选结果第45页
            3.3.3.2 阻断ATR位点后ALP活性检测结果第45-46页
            3.3.3.3 阻断ATR位点后碱性磷酸酶染色结果第46-47页
            3.3.3.4 阻断ATR位点后茜素红钙化结节染色结果第47-48页
            3.3.3.5 NO信号途径与PI3K/AKT信号途径蛋白表达分析结果第48-49页
    3.4 讨论第49-51页
结论第51-53页
参考文献第53-61页
致谢第61-62页
附录 A 攻读学位期间所发表的学术论文目录第62页

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