英文缩写词表 | 第8-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第1章 绪论 | 第13-22页 |
1.1 骨质疏松症的防治现状 | 第13-15页 |
1.1.1 骨与骨重建 | 第13页 |
1.1.2 骨质疏松症的定义 | 第13-14页 |
1.1.3 骨质疏松症的分类和发病原因 | 第14-15页 |
1.1.4 骨质疏松症的防治现状 | 第15页 |
1.2 骨质疏松症的低频脉冲电磁场疗法 | 第15-19页 |
1.2.1 电磁场具有防治骨质疏松症的潜力 | 第15-16页 |
1.2.2 电磁场的“生物窗效应” | 第16-17页 |
1.2.3 电磁场与初级纤毛 | 第17-19页 |
1.2.3.1 初级纤毛 | 第17-18页 |
1.2.3.2 初级纤毛内的信号通路 | 第18页 |
1.2.3.3 初级纤毛与电磁场 | 第18-19页 |
1.3 本论文假说及开展的研究工作 | 第19-22页 |
第2章 PEMFs促进成骨细胞成熟矿化须激活定位于初级纤毛内的IGF-1R | 第22-41页 |
2.1 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.1 实验动物 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-31页 |
2.2.1 新生大鼠颅骨成骨细胞(ROBs)的提取、分离与培养 | 第23页 |
2.2.2 电磁场发生装置 | 第23-24页 |
2.2.3 ROBs的电磁场处理 | 第24页 |
2.2.4 碱性磷酸酶(ALP)活性测定 | 第24-25页 |
2.2.5 ALP组织化学染色 | 第25页 |
2.2.6 钙化结节染色 | 第25-26页 |
2.2.7 Western Blotting | 第26-27页 |
2.2.8 免疫荧光染色 | 第27-28页 |
2.2.9 siRNA干扰质粒的构建及其制备 | 第28-29页 |
2.2.10 干扰质粒的转染 | 第29-30页 |
2.2.11 一氧化氮含量测定(NO) | 第30-31页 |
2.2.12 统计学分析 | 第31页 |
2.3 结果与分析 | 第31-39页 |
2.3.1 PEMFs能够促进IGF-1R蛋白表达分析结果 | 第31-32页 |
2.3.2 IGF-1R阻断剂可以拮抗PEMFs促进成骨形成活性结果检测 | 第32-34页 |
2.3.2.1 碱性磷酸酶活性测定结果 | 第32页 |
2.3.2.2 碱性磷酸酶染色结果 | 第32-33页 |
2.3.2.3 茜素红钙化结节染色结果 | 第33-34页 |
2.3.3 初级纤毛与IGF-1R共定位结果 | 第34-35页 |
2.3.4 干扰初级纤毛后IGF-1R下游信号途径检测结果 | 第35-39页 |
2.3.4.1 细胞形态变化检测结果 | 第35页 |
2.3.4.2 初级纤毛形态变化检测结果 | 第35-36页 |
2.3.4.3 干扰初级纤毛后ALP活性检测结果 | 第36-37页 |
2.3.4.4 干扰初级纤毛后NO含量检测结果 | 第37页 |
2.3.4.5 干扰初级纤毛后IGF-1R下游PI3K信号途径蛋白表达分析结果 | 第37-39页 |
2.3.4.6 干扰初级纤毛后IGF-1R下游NO信号途径蛋白表达分析结果 | 第39页 |
2.4 讨论 | 第39-41页 |
第3章 PEMFs促进成骨细胞成熟矿化依赖于IGF-1R/PI3K/AKT/NO信号通路 | 第41-51页 |
3.1 实验材料 | 第41-42页 |
3.1.1 实验动物 | 第41页 |
3.1.2 主要试剂 | 第41-42页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第42页 |
3.2 实验方法 | 第42页 |
3.2.1 大鼠乳鼠颅骨成骨细胞的提取、换液和传代培养 | 第42页 |
3.2.2 PEMFs 处理 | 第42页 |
3.2.3 ALP 活性测定及染色 | 第42页 |
3.2.4 茜素红钙化结节染色 | 第42页 |
3.2.5 Western Blotting | 第42页 |
3.2.6 一氧化氮含量测定(NO) | 第42页 |
3.2.7 统计学分析 | 第42页 |
3.3 结果与分析 | 第42-49页 |
3.3.1 GSK阻断IGF-1R后下游PI3K/AKT信号通路蛋白表达分析结果 | 第42-44页 |
3.3.2 GSK阻断IGF-1R后下游NO信号通路蛋白表达分析结果 | 第44-45页 |
3.3.3 NO 信号通路位于 PI3K/AKT 信号途径下游检测结果 | 第45-49页 |
3.3.3.1 PI3K阻断剂筛选结果 | 第45页 |
3.3.3.2 阻断ATR位点后ALP活性检测结果 | 第45-46页 |
3.3.3.3 阻断ATR位点后碱性磷酸酶染色结果 | 第46-47页 |
3.3.3.4 阻断ATR位点后茜素红钙化结节染色结果 | 第47-48页 |
3.3.3.5 NO信号途径与PI3K/AKT信号途径蛋白表达分析结果 | 第48-49页 |
3.4 讨论 | 第49-51页 |
结论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
附录 A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第62页 |