| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略语 | 第12-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-34页 |
| 1.1 固有免疫与模式识别受体 | 第14-18页 |
| 1.1.1 固有免疫 | 第14-15页 |
| 1.1.2 模式识别受体 | 第15-18页 |
| 1.2 炎症小体 | 第18-27页 |
| 1.2.1 NLRP1炎症小体 | 第19-20页 |
| 1.2.2 NLRP3炎症小体 | 第20-23页 |
| 1.2.3 非经典NLRP3炎症小体 | 第23-24页 |
| 1.2.4 NLRC4炎症小体 | 第24-25页 |
| 1.2.5 AIM2炎症小体 | 第25-26页 |
| 1.2.6 Pyrin炎症小体 | 第26-27页 |
| 1.3 长非编码RNA | 第27-31页 |
| 1.3.1 长非编码RNA的概述 | 第27-28页 |
| 1.3.2 长非编码RNA的分类 | 第28页 |
| 1.3.3 长非编码RNA的功能和作用机制 | 第28-30页 |
| 1.3.4 长非编码RNA与炎症小体 | 第30-31页 |
| 1.4 长非编码RNA Neat1 | 第31-34页 |
| 1.4.1 Neat1与旁斑 | 第31-32页 |
| 1.4.2 Neat1与癌症 | 第32-33页 |
| 1.4.3 Neat1与固有免疫 | 第33-34页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第34-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-39页 |
| 2.1.1 实验小鼠 | 第34页 |
| 2.1.2 细胞系和细胞培养基 | 第34页 |
| 2.1.3 表达载体和质粒 | 第34页 |
| 2.1.4 药物、试剂和试剂盒 | 第34-35页 |
| 2.1.5 抗体 | 第35-36页 |
| 2.1.6 引物、探针和siRNA | 第36-39页 |
| 2.1.7 实验用仪器 | 第39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-54页 |
| 2.2.1 质粒提取 | 第39页 |
| 2.2.2 聚合酶链式反应(PCR)及其产物的凝胶回收 | 第39-40页 |
| 2.2.3 感受态细胞制备 | 第40-41页 |
| 2.2.4 质粒构建、转化、培养和测序 | 第41页 |
| 2.2.5 细胞复苏、培养、传代和冻存 | 第41-42页 |
| 2.2.6 质粒转染 | 第42-43页 |
| 2.2.7 慢病毒包装、感染细胞并获得稳转细胞系 | 第43页 |
| 2.2.8 小鼠的骨髓来源巨噬细胞(BMDM)的分离和培养 | 第43-44页 |
| 2.2.9 炎症小体激活 | 第44页 |
| 2.2.10 细胞总RNA的提取 | 第44-45页 |
| 2.2.11 细胞核质组分分离 | 第45页 |
| 2.2.12 RNA逆转录成cDNA | 第45页 |
| 2.2.13 实时荧光定量PCR (Real-time Quantitative PCR,qPCR) | 第45-46页 |
| 2.2.14 蛋白质免疫印迹(WB) | 第46-47页 |
| 2.2.15 细胞培养上清中的蛋白纯化分离 | 第47页 |
| 2.2.16 胞质颗粒制备和ASC寡聚化检测 | 第47-48页 |
| 2.2.17 RNA探针合成和标记 | 第48页 |
| 2.2.18 基于biotin标记DNA探针的内源RNA富集实验 | 第48-49页 |
| 2.2.19 基于外源转录合成的biotin标记RNA的结合蛋白富集实验 | 第49页 |
| 2.2.20 免疫共沉淀(co-IP)和RNA免疫沉淀(RIP) | 第49-50页 |
| 2.2.21 紫外交联免疫沉淀(CLIP) | 第50-51页 |
| 2.2.22 酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第51页 |
| 2.2.23 小鼠体内腹膜炎模型构建 | 第51页 |
| 2.2.24 小鼠体内肺炎模型构建 | 第51-52页 |
| 2.2.25 流式细胞术 | 第52页 |
| 2.2.26 免疫荧光(IF) | 第52页 |
| 2.2.27 RNA荧光原位杂交(RNA-FISH) | 第52-53页 |
| 2.2.28 数据处理与误差分析 | 第53-54页 |
| 第3章 实验结果 | 第54-84页 |
| 3.1 Neat1促进NLRP3炎症小体激活 | 第54-59页 |
| 3.2 Neat1促进NLRC4和AIM2炎症小体激活 | 第59-61页 |
| 3.3 Neat1对NLRP3炎症小体的作用不依赖于IL-6 | 第61-63页 |
| 3.4 Neat1与caspase-1 p20结构域直接结合 | 第63-67页 |
| 3.5 Neat1稳定caspase-1异源四聚体 | 第67-69页 |
| 3.6 Neat1促进细胞焦亡 | 第69-71页 |
| 3.7 炎症小体激活伴随着Neat1出核入质 | 第71-73页 |
| 3.8 细胞核中旁斑解离导致Neat1出核 | 第73-77页 |
| 3.9 Neat1介导低氧条件下HIF-2α在炎症小体激活中的功能 | 第77-81页 |
| 3.10 Neat1敲除缓解体内炎症 | 第81-84页 |
| 第4章 实验结果总结与讨论 | 第84-88页 |
| 参考文献 | 第88-106页 |
| 附录 已发表论文首页 | 第106-110页 |
| 致谢 | 第110-112页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第112-113页 |
