摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 前言 | 第16-34页 |
1.1 ULK1/2概述 | 第16-22页 |
1.1.1 ULK的结构 | 第16-17页 |
1.1.2 ULK的功能 | 第17-20页 |
1.1.3 ULK的研究现状 | 第20-22页 |
1.2 CD4~+T细胞的发育,活化及分化过程 | 第22-28页 |
1.2.1 CD4~+T细胞的发育 | 第22-25页 |
1.2.2 CD4~+T细胞的活化过程 | 第25-27页 |
1.2.3 CD4~+T细胞的分化过程 | 第27-28页 |
1.3 滤泡辅助性T细胞辅助B细胞的免疫应答反应 | 第28-34页 |
1.3.1 生发中心反应 | 第28-30页 |
1.3.2 滤泡辅助性T细胞简述 | 第30-31页 |
1.3.3 滤泡辅助性T细胞辅助B细胞的免疫应答 | 第31-34页 |
第二章 材料与方法 | 第34-58页 |
2.1 常用的相关试剂和仪器 | 第34-37页 |
2.1.1 流式相关试剂 | 第34页 |
2.1.2 细胞纯化相关试剂 | 第34-35页 |
2.1.3 细胞实验相关试剂 | 第35页 |
2.1.4 蛋白实验相关试剂 | 第35-36页 |
2.1.5 常用实验仪器 | 第36-37页 |
2.2 实验动物 | 第37-38页 |
2.3 RNA相关实验 | 第38-40页 |
2.3.1 细胞总RNA提取 | 第38页 |
2.3.2 mRNA逆转录成cDNA | 第38-39页 |
2.3.3 Real-Time PCR(实时荧光定量PCR) | 第39-40页 |
2.4 动物及细胞相关实验方法 | 第40-55页 |
2.4.1 小鼠基因型鉴定 | 第40-42页 |
2.4.2 OVA/Alum/LPS免疫小鼠并进行流式分析 | 第42-46页 |
2.4.3 LCMV病毒免疫小鼠并流式分析 | 第46-47页 |
2.4.4 NP-OVA免疫小鼠并检测抗体滴度 | 第47-49页 |
2.4.5 从小鼠体内分离纯化Naive CD4~+T细胞 | 第49-50页 |
2.4.6 Naive CD4~+T细胞的体外活化 | 第50-52页 |
2.4.7 Naive CD4~+T细胞体外增殖实验 | 第52页 |
2.4.8 流式分选细胞 | 第52-53页 |
2.4.9 OT- Ⅱ小鼠transfer实验 | 第53-55页 |
2.5 蛋白相关实验方法 | 第55-57页 |
2.5.1 细胞蛋白的提取 | 第55页 |
2.5.2 BCA法测蛋白浓度 | 第55-56页 |
2.5.3 Western blot(蛋白免疫印迹) | 第56-57页 |
2.6 数据分析 | 第57-58页 |
第三章 结果与分析 | 第58-78页 |
3.1 ULK1~(fl/fl);ULK2~(-/-);CD4cre小鼠基因型鉴定 | 第58-59页 |
3.2 ULK基因在不同组织中的表达水平 | 第59-61页 |
3.2.1 ULK1/2在不同组织中的表达水平 | 第59-61页 |
3.2.2 ULK1/2基因在CD4~+T细胞中是可诱导表达的 | 第61页 |
3.3 ULK抑制剂影响CD4~+T细胞的活化、功能和增殖 | 第61-65页 |
3.3.1 ULK1能影响CD4~+T细胞的活化 | 第62-63页 |
3.3.2 ULK1能影响CD4~+T细胞的增殖 | 第63-64页 |
3.3.3 ULK1能影响CD4~+T细胞分泌细胞因子的能力 | 第64-65页 |
3.4 用LCMV病毒免疫小鼠的结果 | 第65-68页 |
3.4.1 ULK的敲除不影响CD4~+T细胞的活化 | 第65-66页 |
3.4.2 ULK的敲除不影响CD4~+T细胞的分化和生发中心反应 | 第66-68页 |
3.5 用OVA/Alum/LPS免疫小鼠的结果 | 第68-71页 |
3.5.1 ULK的敲除不影响CD4~+T细胞的活化 | 第68-69页 |
3.5.2 ULK的敲除不影响CD4~+T细胞的分化和生发中心反应 | 第69-71页 |
3.6 体外TCR信号刺激下ULK对CD4~+T细胞活化和增殖的影响 | 第71-73页 |
3.6.1 ULK的敲除不影响CD4~+T细胞的活化 | 第71-72页 |
3.6.2 ULK的敲除不影响CD4~+T细胞的分化 | 第72页 |
3.6.3 ULK的敲除可能影响CD4~+T细胞的增殖 | 第72-73页 |
3.7 体外细胞转移实验证明ULK的敲除能影响T_(FH)的生存 | 第73-76页 |
3.8 NP-OVA/Alum免疫小鼠的结果 | 第76-78页 |
第四章 总结与讨论 | 第78-80页 |
附录1 图表引索 | 第80-83页 |
附录2 缩略语及中英文对照 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-89页 |
致谢 | 第89页 |