中文摘要 | 第11-15页 |
Abstract | 第15-18页 |
引言 | 第19-21页 |
第一部分 ASIC3在痫性发作大鼠模型和细胞模型中的表达研究 | 第21-50页 |
1 材料和方法 | 第21-41页 |
1.1 癫痫发作动物模型建立及分组 | 第21-22页 |
1.2 蛋白印迹实验 | 第22-29页 |
1.3 RT-PCR实验 | 第29-33页 |
1.4 免疫组织化学实验 | 第33-34页 |
1.5 原代海马神经元培养及免疫荧光染色鉴定 | 第34-37页 |
1.6 无镁外液诱导癫痫样放电细胞模型建立 | 第37-39页 |
1.7 统计学分析 | 第39-41页 |
2 结果 | 第41-46页 |
2.1 蛋白印迹检测ASIC3在癫痫发作动物模型海马中的表达 | 第41页 |
2.2 RT-PCR检测ASIC3在癫痫发作动物模型海马中的表达 | 第41-42页 |
2.3 免疫组织化学检测ASIC3在癫痫发作动物模型海马中的表达 | 第42-43页 |
2.4 原代海马神经元形态和鉴定 | 第43-44页 |
2.5 无镁外液诱导癫痫样放电细胞模型的建立 | 第44-45页 |
2.6 蛋白印迹检测ASIC3在无镁外液诱导癫痫样放电细胞模型中的表达 | 第45-46页 |
3 讨论 | 第46-49页 |
4 小结 | 第49-50页 |
第二部分 抑制ASIC3对大鼠病性发作行为学的影响 | 第50-61页 |
1 材料和方法 | 第50-53页 |
1.1 主要仪器和试剂 | 第50页 |
1.2 实验动物和分组 | 第50-51页 |
1.3 大鼠侧脑室置管及药物注射 | 第51页 |
1.4 大鼠癫痫发作造模 | 第51-52页 |
1.5 统计学分析 | 第52-53页 |
2 结果 | 第53-57页 |
2.1 大鼠侧脑室给药及造模流程示意图 | 第53页 |
2.2 抑制ASIC3对大鼠癫痫发作潜伏期的影响 | 第53-54页 |
2.3 抑制ASIC3对大鼠癫痫发作最大强度的影响 | 第54-55页 |
2.4 抑制ASIC3对大鼠全面性强直阵挛发作(GTCS)发生率的影响 | 第55-56页 |
2.5 抑制ASIC3对大鼠注射匹罗卡品后不同时间点痫性发作强度的影响 | 第56-57页 |
3 讨论 | 第57-60页 |
4 小结 | 第60-61页 |
第三部分 ASIC3在大鼠痫性发作中作用的分子生物学机制探讨 | 第61-87页 |
1 材料和方法 | 第61-75页 |
1.1 蛋白印迹实验 | 第61-68页 |
1.2 免疫共沉淀实验 | 第68-73页 |
1.3 阻断NMDA受体对癫痫发作动物行为学的影响 | 第73-74页 |
1.4 统计学分析 | 第74-75页 |
2 结果 | 第75-82页 |
2.1 蛋白印迹检测APETx2预处理对海马组织NMDA受体膜表达的影响 | 第75-76页 |
2.2 蛋白印迹检测APETx2预处理对海马组织AMPA受体膜表达的影响 | 第76-77页 |
2.3 免疫共沉淀分别检测ASIC3和NMDA受体、AMPA受体的相互作用 | 第77-78页 |
2.4 蛋白印迹检测APETx2预处理对CaMKⅡ信号通路的影响 | 第78-79页 |
2.5 蛋白印迹检测APETx2预处理对CREB信号通路的影响 | 第79-80页 |
2.6 抑制NMDA受体功能对癫痫发作动物行为学的影响 | 第80-82页 |
3 讨论 | 第82-86页 |
4 小结 | 第86-87页 |
第四部分 ASIC3在大鼠痫性发作中作用的电生理学机制探讨 | 第87-106页 |
1 材料和方法 | 第87-96页 |
1.1 抑制ASIC3对无镁外液中原代海马神经元兴奋性的影响 | 第87-92页 |
1.2 抑制ASIC3对癫痫发作动物海马脑片NMDA受体介导的微小兴奋性突触后电流(mEPSC)和诱发兴奋性突触后电流(eEPSC)的影响 | 第92-95页 |
1.3 统计学分析 | 第95-96页 |
2 结果 | 第96-103页 |
2.1 原代海马神经元基本电生理特征 | 第96-97页 |
2.2 无镁外液中抑制ASIC3对原代海马神经元自发AP的影响 | 第97-98页 |
2.3 无镁外液中抑制ASIC3对原代海马神经元诱发AP的影响 | 第98-99页 |
2.4 脑片海马区基本形态特征 | 第99-100页 |
2.5 抑制ASIC3对癫痫发作动物海马脑片NMDA受体介导的mEPSC的影响 | 第100-101页 |
2.6 抑制ASIC3对癫痫发作动物海马脑片NMDA受体介导的eEPSC的影响 | 第101-103页 |
3 讨论 | 第103-105页 |
4 小结 | 第105-106页 |
全文总结 | 第106-108页 |
参考文献 | 第108-115页 |
综述 | 第115-126页 |
参考文献 | 第121-126页 |
攻读学位期间发表文章 | 第126-127页 |
致谢 | 第127-128页 |