致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第16-25页 |
1.1 茄子黄萎病研究现状 | 第16-18页 |
1.1.1 茄子生产概况 | 第16页 |
1.1.2 茄子黄萎病 | 第16-18页 |
1.2 病原菌在植物组织中的侵染过程 | 第18-20页 |
1.2.1 病原菌在植物根部表面的附着定殖 | 第18-19页 |
1.2.2 病原菌的侵入 | 第19页 |
1.2.3 病原菌在寄主体内的扩展及症状形成 | 第19-20页 |
1.3 绿色荧光蛋白标记病原菌在植物病害研究中的应用 | 第20页 |
1.4 植物病害对植物生长和生理特性的影响 | 第20-23页 |
1.4.1 植物生长 | 第20-21页 |
1.4.2 叶绿素 | 第21页 |
1.4.3 可溶性糖、可溶性蛋白 | 第21页 |
1.4.4 丙二醛 | 第21-22页 |
1.4.5 植物防御酶 | 第22-23页 |
1.5 转录组学 | 第23-24页 |
1.5.1 转录组学研究技术 | 第23页 |
1.5.2 转录组学在病原菌侵染中的应用 | 第23-24页 |
1.6 研究的目的及意义 | 第24-25页 |
第二章 大丽轮枝菌在茄子植株中扩展的时间进程 | 第25-29页 |
2.1 材料与方法 | 第25-26页 |
2.1.1 供试茄子品种及菌株 | 第25页 |
2.1.2 实验材料和试剂 | 第25页 |
2.1.3 主要仪器和设备 | 第25页 |
2.1.4 供试茄子的培育、菌液制备及接种 | 第25-26页 |
2.1.5 取样时间 | 第26页 |
2.1.6 石蜡切片的制备 | 第26页 |
2.1.7 切片观察 | 第26页 |
2.2 结果与分析 | 第26-27页 |
2.3 讨论 | 第27-29页 |
第三章 利用GFP标记大丽轮枝菌 | 第29-42页 |
3.1 材料 | 第29页 |
3.1.1 植物材料、菌株和质粒 | 第29页 |
3.1.2 主要试剂 | 第29页 |
3.1.3 主要培养基以及溶液 | 第29页 |
3.1.4 主要仪器 | 第29页 |
3.2 方法 | 第29-35页 |
3.2.1 GFP真菌表达载体的构建 | 第29-32页 |
3.2.2 PEG介导的大丽轮枝菌原生质体遗传转化 | 第32-33页 |
3.2.3 转化子的筛选及鉴定 | 第33-34页 |
3.2.4 侵染过程研究 | 第34-35页 |
3.3 结果与分析 | 第35-40页 |
3.3.1 重组质粒pSilent-EGFP检测 | 第35页 |
3.3.2 转化子荧光镜检结果 | 第35-36页 |
3.3.3 转化子GFP的PCR检验 | 第36-37页 |
3.3.4 转化子的菌落形态 | 第37页 |
3.3.5 转化子的生长速度 | 第37-38页 |
3.3.6 转化子的致病力检测 | 第38-39页 |
3.3.7 转化子在茄子组织中的扩展 | 第39-40页 |
3.4 小结 | 第40-42页 |
第四章 大丽轮枝菌侵染对茄子植株生长及生理特性的影响 | 第42-55页 |
4.1 材料和方法 | 第42-46页 |
4.1.1 供试茄子品种及菌株 | 第42页 |
4.1.2 试验材料和试剂 | 第42页 |
4.1.3 主要仪器和设备 | 第42页 |
4.1.4 茄子植株培育及接种菌液制备 | 第42页 |
4.1.5 接种方法及取样时间 | 第42页 |
4.1.6 茄子干鲜重、株高及茎粗的测定 | 第42-43页 |
4.1.7 叶绿素含量的测定 | 第43页 |
4.1.8 可溶性糖、可溶性蛋白含量的测定 | 第43-44页 |
4.1.9 丙二醛含量的测定 | 第44页 |
4.1.10 防御酶SOD、PPO和POD活性的测定 | 第44-46页 |
4.1.11 H_2O_2和O_(2-)的组织化学检测 | 第46页 |
4.1.12 茄子叶片中胼胝质的积累 | 第46页 |
4.1.13 数据分析 | 第46页 |
4.2 结果与分析 | 第46-53页 |
4.2.1 大丽轮枝菌侵染对茄子生长量的影响 | 第46-47页 |
4.2.2 大丽轮枝菌侵染对茄子幼苗叶片叶绿素含量的影响 | 第47-48页 |
4.2.3 大丽轮枝菌侵染对茄子幼苗叶片MDA含量的影响 | 第48页 |
4.2.4 大丽轮枝菌侵染对茄子幼苗叶片可溶性糖及可溶性蛋白含量的影响 | 第48-50页 |
4.2.5 大丽轮枝菌侵染对茄子幼苗叶片防御酶SOD、PPO和POD活性的影响 | 第50-51页 |
4.2.6 大丽轮枝菌侵染对茄子叶片过氧化氢、超氧阴离子的影响 | 第51-52页 |
4.2.7 大丽轮枝菌侵染对茄子叶片胼胝质积累的影响 | 第52-53页 |
4.3 讨论 | 第53-55页 |
第五章 RNA-seq分析大丽轮枝菌侵染后茄子植株基因表达的差异 | 第55-91页 |
5.1 材料与方法 | 第55-59页 |
5.1.1 供试的茄子品种及菌株 | 第55页 |
5.1.2 试剂和仪器 | 第55页 |
5.1.3 茄子样品处理 | 第55页 |
5.1.4 茄子叶片总RNA的提取 | 第55-56页 |
5.1.5 RNA测序 | 第56-57页 |
5.1.6 数据分析 | 第57-59页 |
5.2 结果与分析 | 第59-88页 |
5.2.1 茄子叶片Total RNA的提取及检测 | 第59页 |
5.2.2 转录组测序质量评估 | 第59-60页 |
5.2.3 参考基因组比对分析 | 第60-61页 |
5.2.4 新转录本的预测结果 | 第61-62页 |
5.2.5 参考基因比对及基因表达个数统计 | 第62页 |
5.2.6 转录组差异表达基因统计 | 第62-64页 |
5.2.7 差异表达基因GO功能分析 | 第64-75页 |
5.2.8 差异表达基因KEGG功能分析 | 第75-83页 |
5.2.9 SOD、PPO、POD基因表达结果 | 第83-84页 |
5.2.10 胼胝质相关基因的表达 | 第84-85页 |
5.2.11 病原相关蛋白的表达 | 第85页 |
5.2.12 接种大丽轮枝菌后|log2FoldChange(V/C)|>10的差异表达基因 | 第85-88页 |
5.3 讨论 | 第88-91页 |
第六章 总结与展望 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-99页 |
附录1: 试验使用的主要仪器和设备 | 第99-100页 |
附件2: 试验用的培养基及相关溶液配方 | 第100页 |