| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第10-23页 |
| 1.1 巴西橡胶树研究概况 | 第10-15页 |
| 1.1.1 巴西橡胶树种质资源现状 | 第10-11页 |
| 1.1.2 巴西橡胶树重要栽培品种热研7-33-97品种概况 | 第11页 |
| 1.1.3 巴西橡胶树细胞学研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.4 巴西橡胶树分子生物学研究进展 | 第12-15页 |
| 1.2 染色体微分离和微克隆技术的研究进展 | 第15-21页 |
| 1.2.1 染色体微分离、微克隆技术的发展概况 | 第15-16页 |
| 1.2.2 植物单染色体微分离及微克隆技术的方法 | 第16-19页 |
| 1.2.3 单染色体微分离及微克隆技术在植物中的应用 | 第19页 |
| 1.2.4 单染色体微克隆文库构建的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3 本研究的目的意义及技术路线 | 第21-23页 |
| 1.3.1 研究的目的意义 | 第21-22页 |
| 1.3.2 技术路线 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-36页 |
| 2.1 试验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 供试材料 | 第23页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 试验的主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-36页 |
| 2.2.1 基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.2 染色体标本的制备 | 第25-26页 |
| 2.2.3 单染色体的显微分离 | 第26页 |
| 2.2.4 单染色体的体外扩增 | 第26-28页 |
| 2.2.5 单染色体扩增产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第28页 |
| 2.2.6 单染色体扩增产物的Dot-blot杂交验证 | 第28-31页 |
| 2.2.7 单染色体扩增产物的FISH检测及分析 | 第31-33页 |
| 2.2.8 单染色体微克隆文库的构建 | 第33-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-64页 |
| 3.1 巴西橡胶树热研7-33-97中期细胞染色体标本的制备 | 第36页 |
| 3.2 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体的显微分离 | 第36-38页 |
| 3.3 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体的LA-PCR体外扩增结果 | 第38-39页 |
| 3.4 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体LA-PCR扩增产物的鉴定 | 第39-44页 |
| 3.4.1 基因组DNA提取和酶切 | 第39页 |
| 3.4.2 Dot-blot探针效率评估结果 | 第39-40页 |
| 3.4.3 单染色体第二轮LA-PCR扩增产物的Dot-blot杂交验证 | 第40-41页 |
| 3.4.4 单染色体第二轮LA-PCR扩增产物的FISH杂交检测 | 第41-44页 |
| 3.5 巴西橡胶树热研7-33-97第4、12、17及18号染色体文库的构建与初步分析 | 第44-64页 |
| 3.5.1 第4、12、17及18号染色体文库的构建 | 第44-45页 |
| 3.5.2 插入片段的PCR检测结果 | 第45-46页 |
| 3.5.3 单染色体文库部分阳性克隆子序列的Blast分析及注释 | 第46-56页 |
| 3.5.4 第4、12、17和18号染色体文库序列的Blast2GO分析 | 第56-64页 |
| 4 讨论 | 第64-69页 |
| 4.1 关于制备染色体标本的讨论 | 第64页 |
| 4.2 关于染色体微分离和微克隆问题的讨论 | 第64-66页 |
| 4.2.1 关于染色体微分离的问题讨论 | 第64-65页 |
| 4.2.2 关于染色体微克隆的问题讨论 | 第65页 |
| 4.2.3 关于外源污染的防控问题讨论 | 第65-66页 |
| 4.3 关于扩增产物的验证问题的讨论 | 第66-67页 |
| 4.3.1 关于Dot-blot验证的讨论 | 第66页 |
| 4.3.2 关于FISH验证中关键步骤的讨论 | 第66-67页 |
| 4.4 关于文库质量的讨论 | 第67页 |
| 4.5 关于部分测序序列的Blast2GO分析讨论 | 第67-69页 |
| 5 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-79页 |
| 附录Ⅰ | 第79-87页 |
| 附录Ⅱ | 第87-88页 |
| 附录Ⅲ | 第88-92页 |
| 项目资金来源与论文发表情况 | 第92-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
