中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 引言 | 第13-26页 |
1.1 核糖核蛋白(RNP)的研究进展 | 第13-17页 |
1.1.1 植物中核糖核蛋白(RNP)的研究进展 | 第13-14页 |
1.1.1.1 植物中常见的核糖核蛋白 | 第13页 |
1.1.1.2 常见的核糖核蛋白的功能 | 第13-14页 |
1.1.2 动物与人中核不均一核糖核蛋白(hnRNP)的研究进展 | 第14-17页 |
1.1.2.1 动物与人中hnRNP的分类与功能简介 | 第14页 |
1.1.2.2 hnRNP A/B亚家族的功能简介 | 第14-15页 |
1.1.2.3 hnRNP A1的结构特征 | 第15页 |
1.1.2.4 hnRNP A1的功能简介 | 第15-17页 |
1.2 植物中其他RNA结合蛋白(RBP)的研究进展 | 第17-19页 |
1.2.1 调控基因的表达 | 第18页 |
1.2.2 调控植物的光合作用 | 第18-19页 |
1.2.3 参与植物对生物与非生物胁迫耐受 | 第19页 |
1.2.4 参与调控植物的开花 | 第19页 |
1.2.5 参与植物的激素信号通路 | 第19页 |
1.3 植物干旱耐受研究进展 | 第19-23页 |
1.3.1 干旱对于植物的影响 | 第19-21页 |
1.3.2 植物响应干旱胁迫的生理和分子机制 | 第21页 |
1.3.3 干旱胁迫下植物的信号转导途径与相关基因 | 第21-22页 |
1.3.3.1 干旱胁迫下植物的信号转导途径 | 第22页 |
1.3.3.2 干旱胁迫下植物的响应基因 | 第22页 |
1.3.4 脯氨酸的合成与降解 | 第22-23页 |
1.4 荧光原位杂交技术 | 第23-24页 |
1.4.1 荧光原位杂交技术原理 | 第23页 |
1.4.2 荧光原位杂交技术的优点与应用 | 第23-24页 |
1.4.3 细胞内总mRNA亚细胞定位实验 | 第24页 |
1.5 本论文的研究目的与意义 | 第24-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-35页 |
2.1 实验材料 | 第26-27页 |
2.1.1 植物材料 | 第26页 |
2.1.2 菌类材料及载体 | 第26-27页 |
2.2 实验室常用仪器与试剂 | 第27-28页 |
2.2.1 主要实验仪器 | 第27页 |
2.2.2 常用酶,试剂及各种耗材 | 第27-28页 |
2.3 实验方法 | 第28-32页 |
2.3.1 拟南芥的培养 | 第28页 |
2.3.1.1 拟南芥种子的消毒与春化 | 第28页 |
2.3.1.2 拟南芥的种植 | 第28页 |
2.3.2 土壤干旱实验 | 第28-29页 |
2.3.3 拟南芥的常规表型分析 | 第29-30页 |
2.3.3.1 拟南芥的萌发率统计 | 第29页 |
2.3.3.2 拟南芥的子叶变绿统计 | 第29页 |
2.3.3.3 拟南芥幼苗的根长统计 | 第29页 |
2.3.3.4 拟南芥的开花时间统计 | 第29页 |
2.3.3.5 拟南芥的成株的株高统计 | 第29-30页 |
2.3.3.6 拟南芥的离体叶片失水统计 | 第30页 |
2.3.3.7 拟南芥的叶片的气孔数目与开度统计 | 第30页 |
2.3.4 DNA的提取 | 第30页 |
2.3.4.1 CTAB法提取植物中总的DNA | 第30页 |
2.3.4.2 Edward's法简单提取植物中总的DNA | 第30页 |
2.3.5 细胞内总mRNA的亚细胞定位 | 第30-31页 |
2.3.6 拟南芥中游离的脯氨酸的测定 | 第31页 |
2.3.7 拟南芥根吸水量的测定 | 第31-32页 |
2.3.8 拟南芥成株根长的统计 | 第32页 |
2.3.9 其他简易实验方法 | 第32页 |
2.4 附录 | 第32-34页 |
2.4.1 实验所用试剂配制 | 第32-33页 |
2.4.1.1 常见试剂的配方 | 第32页 |
2.4.1.2 DNA的简易提取方法中Edward's Buffer的配制 | 第32-33页 |
2.4.1.3 细胞内总mRNA亚细胞定位实验中固定液的配制 | 第33页 |
2.4.1.4 拟南芥中游离的脯氨酸的测定实验中相关试剂的配制 | 第33页 |
2.4.2 实验所用培养基配制 | 第33-34页 |
2.5 本文所用引物清单 | 第34-35页 |
第三章 结果 | 第35-60页 |
3.1 AtRNP1的表达模式 | 第35-37页 |
3.1.1 AtRNP1是一个在拟南芥组织中广泛表达的蛋白 | 第35页 |
3.1.2 AtRNP1是一个干旱、渗透胁迫与ABA处理的响应基因 | 第35-37页 |
3.2 AtRNP1的过表达植株的表型分析 | 第37-41页 |
3.2.1 AtRNP1的过表达植株的构建 | 第37页 |
3.2.2 AtRNP1的过表达导致了拟南芥幼苗的根长的缩短 | 第37-38页 |
3.2.3 AtRNP1的过表达导致了拟南芥的成株株高降低 | 第38-39页 |
3.2.4 AtRNP1的过表达导致了拟南芥植株的开花提前 | 第39-40页 |
3.2.5 AtRNP1的过表达植株中过表达水平与表型、生理和功能指标上的联系 | 第40-41页 |
3.3 AtRNP1的过表达植株的生理分析 | 第41-48页 |
3.3.1 AtRNP1的表达下调突变体对干旱胁迫的适应性与野生型无明显区别 | 第41-42页 |
3.3.2 AtRNP1过表达植株对干旱胁迫敏感 | 第42-44页 |
3.3.3 AtRNP1过表达植株的叶片的气孔数目减少 | 第44-45页 |
3.3.4 AtRNP1过表达植株的离体叶片失水率与野生型无明显区别 | 第45页 |
3.3.5 AtRNP1过表达植株在干旱胁迫下的根系建成(Root Architecture)存在缺陷 | 第45-47页 |
3.3.6 M9结构域与干旱胁迫的关系分析 | 第47-48页 |
3.4 AtRNP1参与干旱胁迫的功能分析 | 第48-51页 |
3.4.1 干旱胁迫下,AtRNP1过表达株系的游离脯氨酸水平相比野生型明显降低 | 第48-49页 |
3.4.2 利用嫁接实验分析AtRNP1过表达植株对于干旱胁迫敏感的原因 | 第49-51页 |
3.4.2.1 AtRNP1的过表达植株与野生型的嫁接植株在干旱胁迫下的适应 | 第49-50页 |
3.4.2.2 AtRNP1的过表达植株与野生型的嫁接中游离脯氨酸的水平 | 第50-51页 |
3.4.3 干旱胁迫下,AtRNP1过表达株系中干旱相关基因与脯氨酸合成相关基因表达水平明显降低 | 第51页 |
3.5 AtRNP1过表达植株对其他胁迫与处理环境的适应 | 第51-58页 |
3.5.1 AtRNP1过表达植株对盐胁迫环境敏感 | 第52页 |
3.5.2 AtRNP1过表达植株对渗透胁迫环境敏感 | 第52页 |
3.5.3 AtRNP1过表达植株对ABA处理环境敏感 | 第52-55页 |
3.5.4 AtRNP1过表达植株在盐和渗透胁迫与ABA处理条件下吸水能力降低 | 第55-56页 |
3.5.5 AtRNP1过表达植株在盐和渗透胁迫与ABA处理条件下,相比野生型,游离脯氨酸水平较低 | 第56-58页 |
3.6 AtRNP1的过表达影响了细胞内总mRNA的亚细胞定位 | 第58-60页 |
3.6.1 AtRNP1的过表达影响了细胞内总mRNA的核质分布 | 第58页 |
3.6.2 干旱胁迫环境中AtRNP1过表达植株的细胞内总mRNA的核质分布比例异常 | 第58-60页 |
第四章 结论 | 第60-61页 |
第五章 讨论 | 第61-69页 |
5.1 AtRNP1与植物的生长发育 | 第61页 |
5.2 AtRNP1与植物对于干旱胁迫的响应 | 第61-63页 |
5.3 AtRNP1与植物对于盐胁迫、渗透胁迫的响应 | 第63-64页 |
5.4 AtRNP1与植物对于外源ABA处理的响应 | 第64页 |
5.5 AtRNP1表达水平下调突变体rnp1-1对胁迫与处理的响应 | 第64-65页 |
5.6 AtRNP1与植物细胞内总mRNA的亚细胞定位 | 第65-66页 |
5.7 AtRNP1与AtGRP7在植物对于胁迫与处理中响应的相同与不同 | 第66-68页 |
5.8 未来工作 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
致谢 | 第76页 |