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AtRNP1参与植物干旱胁迫耐受的机理研究

中文摘要第3-5页
Abstract第5页
第一章 引言第13-26页
    1.1 核糖核蛋白(RNP)的研究进展第13-17页
        1.1.1 植物中核糖核蛋白(RNP)的研究进展第13-14页
            1.1.1.1 植物中常见的核糖核蛋白第13页
            1.1.1.2 常见的核糖核蛋白的功能第13-14页
        1.1.2 动物与人中核不均一核糖核蛋白(hnRNP)的研究进展第14-17页
            1.1.2.1 动物与人中hnRNP的分类与功能简介第14页
            1.1.2.2 hnRNP A/B亚家族的功能简介第14-15页
            1.1.2.3 hnRNP A1的结构特征第15页
            1.1.2.4 hnRNP A1的功能简介第15-17页
    1.2 植物中其他RNA结合蛋白(RBP)的研究进展第17-19页
        1.2.1 调控基因的表达第18页
        1.2.2 调控植物的光合作用第18-19页
        1.2.3 参与植物对生物与非生物胁迫耐受第19页
        1.2.4 参与调控植物的开花第19页
        1.2.5 参与植物的激素信号通路第19页
    1.3 植物干旱耐受研究进展第19-23页
        1.3.1 干旱对于植物的影响第19-21页
        1.3.2 植物响应干旱胁迫的生理和分子机制第21页
        1.3.3 干旱胁迫下植物的信号转导途径与相关基因第21-22页
            1.3.3.1 干旱胁迫下植物的信号转导途径第22页
            1.3.3.2 干旱胁迫下植物的响应基因第22页
        1.3.4 脯氨酸的合成与降解第22-23页
    1.4 荧光原位杂交技术第23-24页
        1.4.1 荧光原位杂交技术原理第23页
        1.4.2 荧光原位杂交技术的优点与应用第23-24页
        1.4.3 细胞内总mRNA亚细胞定位实验第24页
    1.5 本论文的研究目的与意义第24-26页
第二章 材料与方法第26-35页
    2.1 实验材料第26-27页
        2.1.1 植物材料第26页
        2.1.2 菌类材料及载体第26-27页
    2.2 实验室常用仪器与试剂第27-28页
        2.2.1 主要实验仪器第27页
        2.2.2 常用酶,试剂及各种耗材第27-28页
    2.3 实验方法第28-32页
        2.3.1 拟南芥的培养第28页
            2.3.1.1 拟南芥种子的消毒与春化第28页
            2.3.1.2 拟南芥的种植第28页
        2.3.2 土壤干旱实验第28-29页
        2.3.3 拟南芥的常规表型分析第29-30页
            2.3.3.1 拟南芥的萌发率统计第29页
            2.3.3.2 拟南芥的子叶变绿统计第29页
            2.3.3.3 拟南芥幼苗的根长统计第29页
            2.3.3.4 拟南芥的开花时间统计第29页
            2.3.3.5 拟南芥的成株的株高统计第29-30页
            2.3.3.6 拟南芥的离体叶片失水统计第30页
            2.3.3.7 拟南芥的叶片的气孔数目与开度统计第30页
        2.3.4 DNA的提取第30页
            2.3.4.1 CTAB法提取植物中总的DNA第30页
            2.3.4.2 Edward's法简单提取植物中总的DNA第30页
        2.3.5 细胞内总mRNA的亚细胞定位第30-31页
        2.3.6 拟南芥中游离的脯氨酸的测定第31页
        2.3.7 拟南芥根吸水量的测定第31-32页
        2.3.8 拟南芥成株根长的统计第32页
        2.3.9 其他简易实验方法第32页
    2.4 附录第32-34页
        2.4.1 实验所用试剂配制第32-33页
            2.4.1.1 常见试剂的配方第32页
            2.4.1.2 DNA的简易提取方法中Edward's Buffer的配制第32-33页
            2.4.1.3 细胞内总mRNA亚细胞定位实验中固定液的配制第33页
            2.4.1.4 拟南芥中游离的脯氨酸的测定实验中相关试剂的配制第33页
        2.4.2 实验所用培养基配制第33-34页
    2.5 本文所用引物清单第34-35页
第三章 结果第35-60页
    3.1 AtRNP1的表达模式第35-37页
        3.1.1 AtRNP1是一个在拟南芥组织中广泛表达的蛋白第35页
        3.1.2 AtRNP1是一个干旱、渗透胁迫与ABA处理的响应基因第35-37页
    3.2 AtRNP1的过表达植株的表型分析第37-41页
        3.2.1 AtRNP1的过表达植株的构建第37页
        3.2.2 AtRNP1的过表达导致了拟南芥幼苗的根长的缩短第37-38页
        3.2.3 AtRNP1的过表达导致了拟南芥的成株株高降低第38-39页
        3.2.4 AtRNP1的过表达导致了拟南芥植株的开花提前第39-40页
        3.2.5 AtRNP1的过表达植株中过表达水平与表型、生理和功能指标上的联系第40-41页
    3.3 AtRNP1的过表达植株的生理分析第41-48页
        3.3.1 AtRNP1的表达下调突变体对干旱胁迫的适应性与野生型无明显区别第41-42页
        3.3.2 AtRNP1过表达植株对干旱胁迫敏感第42-44页
        3.3.3 AtRNP1过表达植株的叶片的气孔数目减少第44-45页
        3.3.4 AtRNP1过表达植株的离体叶片失水率与野生型无明显区别第45页
        3.3.5 AtRNP1过表达植株在干旱胁迫下的根系建成(Root Architecture)存在缺陷第45-47页
        3.3.6 M9结构域与干旱胁迫的关系分析第47-48页
    3.4 AtRNP1参与干旱胁迫的功能分析第48-51页
        3.4.1 干旱胁迫下,AtRNP1过表达株系的游离脯氨酸水平相比野生型明显降低第48-49页
        3.4.2 利用嫁接实验分析AtRNP1过表达植株对于干旱胁迫敏感的原因第49-51页
            3.4.2.1 AtRNP1的过表达植株与野生型的嫁接植株在干旱胁迫下的适应第49-50页
            3.4.2.2 AtRNP1的过表达植株与野生型的嫁接中游离脯氨酸的水平第50-51页
        3.4.3 干旱胁迫下,AtRNP1过表达株系中干旱相关基因与脯氨酸合成相关基因表达水平明显降低第51页
    3.5 AtRNP1过表达植株对其他胁迫与处理环境的适应第51-58页
        3.5.1 AtRNP1过表达植株对盐胁迫环境敏感第52页
        3.5.2 AtRNP1过表达植株对渗透胁迫环境敏感第52页
        3.5.3 AtRNP1过表达植株对ABA处理环境敏感第52-55页
        3.5.4 AtRNP1过表达植株在盐和渗透胁迫与ABA处理条件下吸水能力降低第55-56页
        3.5.5 AtRNP1过表达植株在盐和渗透胁迫与ABA处理条件下,相比野生型,游离脯氨酸水平较低第56-58页
    3.6 AtRNP1的过表达影响了细胞内总mRNA的亚细胞定位第58-60页
        3.6.1 AtRNP1的过表达影响了细胞内总mRNA的核质分布第58页
        3.6.2 干旱胁迫环境中AtRNP1过表达植株的细胞内总mRNA的核质分布比例异常第58-60页
第四章 结论第60-61页
第五章 讨论第61-69页
    5.1 AtRNP1与植物的生长发育第61页
    5.2 AtRNP1与植物对于干旱胁迫的响应第61-63页
    5.3 AtRNP1与植物对于盐胁迫、渗透胁迫的响应第63-64页
    5.4 AtRNP1与植物对于外源ABA处理的响应第64页
    5.5 AtRNP1表达水平下调突变体rnp1-1对胁迫与处理的响应第64-65页
    5.6 AtRNP1与植物细胞内总mRNA的亚细胞定位第65-66页
    5.7 AtRNP1与AtGRP7在植物对于胁迫与处理中响应的相同与不同第66-68页
    5.8 未来工作第68-69页
参考文献第69-76页
致谢第76页

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