| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表(ABBREVIATION) | 第11-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-38页 |
| 1 研究背景 | 第12-13页 |
| 2 病原学 | 第13-21页 |
| 2.1 RHDV的分类地位 | 第13页 |
| 2.2 RHDV的基因组结构及功能 | 第13-14页 |
| 2.3 衣壳蛋白VP60的结构 | 第14-16页 |
| 2.4 RHDV的系统进化及其与宿主的共进化 | 第16-17页 |
| 2.5 RHDV的遗传多样性 | 第17-19页 |
| 2.6 抵抗RHD机制的形成 | 第19-20页 |
| 2.7 RHDV的预防和控制 | 第20-21页 |
| 3 杯状病毒与HBGAs的研究进展 | 第21-25页 |
| 3.1 组织血型抗原 | 第21-22页 |
| 3.2 诺如病毒与HBGAs | 第22-23页 |
| 3.3 RHDV与HBGAs的研究进展 | 第23-25页 |
| 参考文献 | 第25-38页 |
| 第二篇 实验部分 | 第38-88页 |
| 第一章 RHDV衣壳蛋白VP60结合HBGAS酶联免疫方法的建立 | 第38-54页 |
| 1 材料与方法 | 第38-42页 |
| 1.1 主要试剂 | 第38-39页 |
| 1.2 主要仪器 | 第39页 |
| 1.3 蛋白样品的准备 | 第39页 |
| 1.4 O型血个体唾液样品的采集及处理 | 第39页 |
| 1.5 唾液中H型组织血型抗原物质(HBGAs)的检测 | 第39-40页 |
| 1.6 衣壳蛋白VP60与唾液HBGAs结合试验方法最适条件的筛选 | 第40-41页 |
| 1.7 VP60蛋白与H2型合成HBGAs多糖结合试验最适条件的筛选 | 第41-42页 |
| 2 结果 | 第42-47页 |
| 2.1 血凝试验测定抗H试剂的效价 | 第42-43页 |
| 2.2 血凝抑制试验检测唾液中的H型HBGAs | 第43页 |
| 2.3 VP60蛋白与唾液HBGAs结合试验方法最适条件的筛选 | 第43-45页 |
| 2.4 H2型合成HBGAs多糖结合试验最适条件的筛选 | 第45-47页 |
| 2.5 HBGAs结合试验阳性值的判定方法 | 第47页 |
| 3 讨论 | 第47-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 第二章 VP60蛋白P2亚区的截短表达及其与受体HBGAS结合位点的初步分析 | 第54-68页 |
| 1 材料与方法 | 第55-60页 |
| 1.1 质粒、菌种及蛋白 | 第55页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第55页 |
| 1.3 VP60蛋白截短表达设计方案 | 第55-56页 |
| 1.4 截短表达构建示意图 | 第56页 |
| 1.5 引物设计 | 第56页 |
| 1.6 目的质粒的构建 | 第56-59页 |
| 1.7 VP60截短片段的原核表达及鉴定 | 第59页 |
| 1.8 VP60截短蛋白与HBGAs的结合试验 | 第59-60页 |
| 2 结果 | 第60-64页 |
| 2.1 目的质粒的构建 | 第60-61页 |
| 2.2 SDS-PAGE分析重组VP60蛋白及其截短蛋白 | 第61-62页 |
| 2.3 重组VP60蛋白及其截短蛋白的Western Blot分析 | 第62-63页 |
| 2.4 VP60截短蛋白与HBGAs的结合 | 第63-64页 |
| 3 讨论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 第三章 VP60嵌合蛋白的表达及血凝性分析 | 第68-88页 |
| 1 材料与方法 | 第68-77页 |
| 1.1 质粒、菌株及细胞 | 第68-69页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第69页 |
| 1.3 序列分析 | 第69页 |
| 1.4 引物设计 | 第69-70页 |
| 1.5 突变体VP60-411-417aa和VP60-502-510aa的构建 | 第70-72页 |
| 1.6 重组穿梭载体Bacmid的构建及鉴定 | 第72-74页 |
| 1.7 重组杆状病毒的构建及筛选 | 第74-75页 |
| 1.8 重组杆状病毒表达产物的鉴定 | 第75-76页 |
| 1.9 两种嵌合蛋白的血凝性分析试验 | 第76-77页 |
| 2 结果 | 第77-84页 |
| 2.1 两种嵌合蛋白穿梭质粒的构建及鉴定 | 第77-79页 |
| 2.2 重组杆状病毒的构建及鉴定 | 第79-80页 |
| 2.3 嵌合蛋白的表达及鉴定 | 第80-82页 |
| 2.4 嵌合蛋白血凝性分析实验 | 第82-84页 |
| 3 讨论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-88页 |
| 全文总结 | 第88-90页 |
| 附录 | 第90-94页 |
| 致谢 | 第94-96页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第96页 |
