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不同基因型小麦对水分胁迫的生理响应及相关miRNAs的调控机制

致谢第4-11页
摘要第11-13页
第一章 文献综述第13-43页
    1 作物抗旱机制的形态指标研究进展第13-14页
        1.1 水分胁迫对作物叶片生长的影响第13-14页
        1.2 水分胁迫对作物根系生长的影响第14页
    2 作物抗旱机制的生理学研究进展第14-20页
        2.1 作物水分状况研究第14-15页
        2.2 作物抗旱性与渗透调节的相关研究第15-17页
            2.2.1 脯氨酸第15-16页
            2.2.2 甜菜碱第16页
            2.2.3 K+和其他无机离子第16-17页
            2.2.4 其他渗透调节物质第17页
        2.3 作物抗旱性与光合作用的相关研究第17-19页
            2.3.1 水分胁迫对光合速率的影响第17-18页
            2.3.2 水分胁迫对叶绿素含量的影响第18页
            2.3.3 水分胁迫对气孔行为的影响第18-19页
        2.4 作物抗旱性与抗氧化体系的相关研究第19-20页
            2.4.1 酶促抗氧化清除系统第19页
            2.4.2 非酶促抗氧化清除系统第19-20页
        2.5 作物抗旱性与植物激素的调控研究第20页
    3 作物抗旱机制的分子生物学研究进展第20-29页
        3.1 功能蛋白和渗透调节因子第21-23页
            3.1.1 LEA蛋白第21页
            3.1.2 水孔蛋白第21-22页
            3.1.3 脯氨酸及其合成基因第22页
            3.1.4 季铵类化合物及其合成的相关基因第22页
            3.1.5 与毒性降解、抗氧化防御能力有关的酶基因第22-23页
        3.2 信号转导和转录因子第23-26页
            3.2.1 水分胁迫信号的感知第23-24页
            3.2.2 胞间信使的转导第24页
            3.2.3 水分胁迫诱导的基因表达及转录调控第24-26页
            3.2.4 水分胁迫诱导的基因转录后调控及交互作用第26页
        3.3 microRNA(miRNA)在干旱响应中的相关研究第26-29页
            3.3.1 miRNA的生物合成第27页
            3.3.2 miRNA的作用方式第27-28页
            3.3.3 miRNA与干旱胁迫第28-29页
    4 本课题研究的目的和意义第29页
    参考文献第29-43页
第二章 小麦幼苗耐水分胁迫的基因型差异第43-54页
    1.引言第43页
    2.材料与方法第43-45页
        2.1 供试材料第43页
        2.2 材料培养第43-44页
        2.3 试验设计第44页
        2.4 测定项目及方法第44-45页
            2.4.1 幼苗的根系形态及植株生物量的测定第44页
            2.4.2 叶片相对含水量第44页
            2.4.3 叶绿素总含量第44页
            2.4.4 可溶性蛋白含量第44-45页
        2.5 数据处理第45页
    3.结果分析第45-50页
        3.1 水分胁迫对不同基因型小麦地上部外观形态的影响第45-46页
        3.2 水分胁迫对不同基因型小麦根系外观形态的影响第46-47页
        3.3 水分胁迫对不同基因型小麦侧根生长和发育的影响第47-48页
        3.4 水分胁迫对不同基因型小麦叶片相对含水量的影响第48页
        3.5 水分胁迫对不同基因型小麦叶片总叶绿素含量的影响第48-49页
        3.6 水分胁迫对不同基因型小麦可溶性蛋白含量的影响第49页
        3.7 水分胁迫对不同基因型小麦根系活力的影响第49-50页
    4.结论与讨论第50-51页
    参考文献第51-54页
第三章 水分胁迫对不同基因型小麦幼苗内源激素含量的影响第54-62页
    1.引言第54页
    2.材料与方法第54-55页
        2.1 供试材料第54页
        2.2 材料培养第54页
        2.3 试验设计第54-55页
        2.4 测定项目及方法第55页
        2.5 数据处理第55页
    3.结果分析第55-58页
        3.1 水分胁迫对不同基因型小麦ABA含量的影响第55-56页
        3.2 水分胁迫对不同基因型小麦IAA含量的影响第56页
        3.3 水分胁迫对不同基因型小麦GA含量的影响第56-57页
        3.4 水分胁迫对不同基因型小麦ZR含量的影响第57-58页
    4.结论与讨论第58-59页
    参考文献第59-62页
第四章 水分胁迫对不同基因型小麦叶片解剖结构的影响第62-71页
    1.引言第62页
    2.材料与方法第62-64页
        2.1 供试材料第62页
        2.2 材料培养第62页
        2.3 试验设计第62-63页
        2.4 测定项目及方法第63-64页
            2.4.1 叶片的解剖结构第63-64页
            2.4.2 叶片的气孔状态第64页
        2.5 数据处理第64页
    3.结果分析第64-68页
        3.1 水分胁迫对不同基因型小麦叶片维管组织细胞分化的影响第64-66页
        3.2 水分胁迫对不同基因型小麦叶片维管组织细胞数目的影响第66页
        3.3 水分胁迫对不同基因型小麦叶片气孔运动的影响第66-67页
        3.4 水分胁迫对不同基因型小麦叶片气孔开放程度的影响第67-68页
    4.结论与讨论第68-69页
    参考文献第69-71页
第五章 水分胁迫对不同基因型小麦幼苗抗氧化酶活性及相关基因表达的影响第71-84页
    1.引言第71页
    2.材料与方法第71-75页
        2.1 供试材料第71页
        2.2 材料培养第71页
        2.3 试验设计第71-72页
        2.4 测定项目及方法第72-75页
            2.4.1 H2O2含量的测定第72页
            2.4.2 O2-产生速率的测定第72页
            2.4.3 MDA含量测定第72页
            2.4.4 SOD活性测定第72-73页
            2.4.5 POD活性测定第73页
            2.4.6 CAT活性测定第73页
            2.4.7 TotalRNA的提取第73-74页
            2.4.8 反转录反应第74页
            2.4.9 引物第74-75页
    3.结果分析第75-80页
        3.1 水分胁迫对不同基因型小麦H2O2含量的影响第75页
        3.2 水分胁迫对不同基因型小麦O2-产生速率的影响第75-76页
        3.3 水分胁迫对不同基因型小麦MDA含量的影响第76页
        3.4 水分胁迫对不同基因型小麦SOD活性的影响第76-77页
        3.5 水分胁迫对不同基因型小麦POD活性的影响第77页
        3.6 水分胁迫对不同基因型小麦CAT活性的影响第77-78页
        3.7 水分胁迫对不同基因型小麦Cu-ZnSOD基因相对表达的影响第78-79页
        3.8 水分胁迫对不同基因型小麦POD基因相对表达的影响第79页
        3.9 水分胁迫对不同基因型小麦CAT基因相对表达的影响第79-80页
    4.结论与讨论第80-81页
    参考文献第81-84页
第六章 水分胁迫下不同基因型小麦叶片差异表达miRNAs的鉴定和比较分析第84-117页
    1.引言第84-85页
    2.材料方法第85页
        2.1 供试材料第85页
        2.2 材料培养第85页
        2.3 试验设计第85页
    3.测定项目和方法第85-93页
        3.1 TotalRNA的提取第85页
        3.2 小RNA库的构建和测序第85-88页
            3.2.1 连接3'端接头第85-86页
            3.2.2 反转录引物退火第86页
            3.2.3 连接5'端接头第86页
            3.2.4 反转录第86-87页
            3.2.5 PCR扩增第87页
            3.2.6 PAGE凝胶电泳回收第87页
            3.2.7 切胶回收第87-88页
            3.2.8 上机测序第88页
        3.3 miRNAs的鉴定第88页
        3.4 差异表达miRNAs的筛选第88-89页
        3.5 miRNAs靶基因的预测和功能的注释第89页
        3.6 Poly(A)加尾反应和反转录反应第89页
        3.7 RealTimePCR反应(定量验证)第89-90页
        3.8 miRNA的northern blot验证第90-91页
            3.8.1 TotalRNA的提取第90页
            3.8.2 上样及准备工作第90页
            3.8.3 杂交及检测第90-91页
        3.9 靶基因的定量验证第91-92页
            3.9.1 TotalRNA的提取第91页
            3.9.2 反转录反应第91页
            3.9.3 qPCR第91-92页
        3.10 本试验中使用的所有引物第92-93页
            3.10.1 miRNAs引物第92页
            3.10.2 靶基因引物第92-93页
    4.结果分析第93-107页
        4.1 水分胁迫下不同基因型小麦sRNA高通量测序结果分析第93-94页
        4.2 水分胁迫下不同基因型小麦sRNA的注释第94-96页
        4.3 水分胁迫下不同基因型小麦中差异表达miRNAs的鉴定第96-97页
        4.4 水分胁迫下不同基因型小麦中差异表达miRNAs的比较第97-100页
        4.5 水分胁迫下不同基因型小麦新型miRNAs的鉴定和比较第100-102页
        4.6 差异表达miRNAs的qPCR验证第102-104页
        4.7 差异表达miRNAs的Northernblot验证第104页
        4.8 差异表达miRNAs靶基因的预测和功能的注释第104-105页
        4.9 差异表达miRNAs靶基因的qPCR验证第105-107页
    5.结论与讨论第107-111页
    参考文献第111-117页
第七章 主要结论与创新点第117-120页
    7.1 主要结论第117-118页
        7.1.1 小麦幼苗耐水分胁迫的基因型差异第117页
        7.1.2 水分胁迫对不同基因型小麦幼苗内源激素含量的影响第117页
        7.1.3 水分胁迫对不同基因型小麦叶片维管组织发育和气孔行为的影响第117-118页
        7.1.4 水分胁迫对不同基因型小麦幼苗抗氧化酶活性及相关基因表达的影响第118页
        7.1.5 水分胁迫下不同基因型小麦叶片差异表达miRNAs的鉴定和比较分析第118页
    7.2 论文创新点第118-120页
附录第120-128页
英文摘要第128-131页

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