| 摘要 | 第4-9页 |
| Abstract | 第9-15页 |
| 英文缩略语 | 第16-21页 |
| 第一部分 ：高氧对BPD新生鼠肺成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响 | 第21-36页 |
| 1 前言 | 第21-22页 |
| 2 实验材料与方法 | 第22-29页 |
| 2.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 实验对象、分组及BPD模型的建立 | 第23页 |
| 2.2.2 体外肺成纤维细胞的分离、培养及鉴定 | 第23-25页 |
| 2.2.3 采用流式细胞仪测细胞周期 | 第25-26页 |
| 2.2.4 免疫组化技术检测PCNA蛋白表达 | 第26页 |
| 2.2.5 ELISA法检测细胞上清中Ⅰ型胶原蛋白含量 | 第26页 |
| 2.2.6 Real-time PCR法检测肺成纤维细胞的ColⅠmRNA水平 | 第26-29页 |
| 2.3 统计学分析 | 第29页 |
| 3 结果 | 第29-33页 |
| 3.1 鼠肺成纤维细胞的原代培养及鉴定 | 第29-30页 |
| 3.2 空气和高氧各组LF细胞周期的变化 | 第30页 |
| 3.3 空气和高氧各组LF细胞PCNA增殖细胞核抗原表达 | 第30-31页 |
| 3.4 空气和高氧各组LF细胞上清中Ⅰ型胶原蛋白含量 | 第31页 |
| 3.5 空气和高氧各组LF细胞Ⅰ型胶原蛋白mRNA水平 | 第31-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 5 结论 | 第35-36页 |
| 第二部分 ：ERK1/2蛋白信号在BPD新生鼠肺组织及成纤维细胞中的同步研究 | 第36-48页 |
| 1 前言 | 第36页 |
| 2 实验材料与方法 | 第36-40页 |
| 2.1 材料 | 第36-37页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第36页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第37页 |
| 2.2 方法 | 第37-40页 |
| 2.2.1 BPD大鼠动物模型的建立 | 第37页 |
| 2.2.2 体外LF的原代细胞培养及鉴定 | 第37页 |
| 2.2.3 免疫组化法检测肺组织及成纤维细胞p-ERK1/2蛋白表达 | 第37-38页 |
| 2.2.4 Western blot法检测肺组织及成纤维细胞ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达 | 第38-39页 |
| 2.2.5 Real-time PCR法检测肺组织及成纤维细胞ERK1及ERK2的mRNA水平 | 第39-40页 |
| 2.3 统计学分析 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-45页 |
| 3.1 免疫组化法观察肺组织及成纤维细胞p-ERK1/2蛋白表达 | 第40-42页 |
| 3.1.1 肺组织p-ERK1/2蛋白的表达 | 第40-41页 |
| 3.1.2 肺成纤维细胞p-ERK1/2蛋白的表达 | 第41-42页 |
| 3.2 Western blot法观察肺组织及成纤维细胞ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达 | 第42-43页 |
| 3.3 Real-time PCR法检测肺组织及成纤维细胞ERK1/2mRNA表达 | 第43-45页 |
| 3.3.1 肺组织ERK1/2的mRNA表达 | 第43页 |
| 3.3.2 肺成纤维细胞ERK1/2的mRNA表达 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 第三部分 ：ERK1/2蛋白信号影响肺成纤维细胞增殖、转化及迁移的体外研究 | 第48-61页 |
| 1 前言 | 第48页 |
| 2 材料和方法 | 第48-52页 |
| 2.1 材料 | 第48-50页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第48-49页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第49页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第49-50页 |
| 2.2 方法 | 第50-52页 |
| 2.2.1 研究对象 | 第50页 |
| 2.2.2 细胞分组 | 第50页 |
| 2.2.3 免疫组化法检测各组LF中p-ERK1/2蛋白表达 | 第50页 |
| 2.2.4 Western blot法检测各组LF中ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达 | 第50页 |
| 2.2.5 Real-time PCR法检测各组LF中ERK1及ERK2mRNA水平 | 第50页 |
| 2.2.6 CCK-8法测细胞的增殖活力 | 第50-51页 |
| 2.2.7 流式细胞仪测细胞周期 | 第51页 |
| 2.2.8 免疫组化法检测各组LF中PCNA蛋白表达 | 第51页 |
| 2.2.9 免疫组化法检测各组LF中α-SMA蛋白表达 | 第51页 |
| 2.2.10 Western blot法检测各组LF中α-SMA蛋白表达 | 第51页 |
| 2.2.11 Real-time PCR法检测各组LF中α-SMAmRNA水平 | 第51页 |
| 2.2.12 Transwell小室法检测细胞各组LF细胞的迁移能力 | 第51-52页 |
| 2.3 统计学分析 | 第52页 |
| 3 结果 | 第52-59页 |
| 3.1 ERK激动剂及抑制剂对其表达的影响 | 第52-53页 |
| 3.1.1 免疫组织化学技术检测p-ERK1/2蛋白表达 | 第52-53页 |
| 3.1.2 Western blot技术检测ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达 | 第53页 |
| 3.1.3 Real-time PCR法检测ERK1/2mRNA表达 | 第53页 |
| 3.2 ERK激活剂及抑制剂对LF增殖的影响 | 第53-55页 |
| 3.2.1 CCK-8比色法测定细胞增殖变化情况 | 第53-54页 |
| 3.2.2 流式细胞仪测定各组LF细胞周期 | 第54-55页 |
| 3.2.3 免疫组化法检测各组LF中PCNA蛋白表达 | 第55页 |
| 3.3 ERK激活剂及抑制剂对LF转分化的影响 | 第55-57页 |
| 3.3.1 免疫组织化学技术测定α-SMA的蛋白表达 | 第55-56页 |
| 3.3.2 Western blot技术检测α-SMA的蛋白表达 | 第56-57页 |
| 3.3.3 Real-time PCR检测α-SMA的mRNA表达 | 第57页 |
| 3.4 ERK激活剂及抑制剂对LF迁移的影响 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 综述 | 第67-79页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 个人简历 | 第82页 |
