摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 绪论 | 第8-13页 |
1.1 BAP1概述 | 第8-9页 |
1.1.1 BAP1与癌症 | 第8-9页 |
1.2 G-四链体 | 第9-10页 |
1.2.1 G-四链体结构的功能 | 第9-10页 |
1.2.2 G-四链体结构与解旋酶 | 第10页 |
1.3 染色质解旋酶DNA结合蛋白 | 第10-11页 |
1.3.1 解旋酶CHD2和CHD7在发育中的作用 | 第11页 |
1.4 本论文的研究目的及研究意义 | 第11-13页 |
1.4.1 研究目的 | 第11-12页 |
1.4.2 研究意义 | 第12-13页 |
2 实验材料与实验方法 | 第13-30页 |
2.1 实验材料与实验仪器 | 第13-15页 |
2.1.1 材料 | 第13页 |
2.1.2 仪器 | 第13-14页 |
2.1.3 实验试剂的配置 | 第14-15页 |
2.2 实验方法 | 第15-30页 |
2.2.1 细胞培养与瞬转 | 第15-16页 |
2.2.2 载体的构建 | 第16-20页 |
2.2.3 慢病毒感染细胞 | 第20-21页 |
2.2.4 实时定量PCR测定RNA表达 | 第21-22页 |
2.2.5 模板处理 | 第22-23页 |
2.2.6 圆二色谱分析 | 第23页 |
2.2.7 DNA银染 | 第23-24页 |
2.2.8 基因组DNA提取 | 第24-25页 |
2.2.9 引物的设计 | 第25-26页 |
2.2.10 Gluc荧光素酶活性检测 | 第26页 |
2.2.11 SEAP值的检测 | 第26页 |
2.2.12 斑点杂交实验 | 第26-27页 |
2.2.13 ChIP实验 | 第27-28页 |
2.2.14 半定量PCR | 第28-30页 |
3 实验结果 | 第30-41页 |
3.1 BAP1基因启动子区域G-四链体预测 | 第30-32页 |
3.1.1 BAP1启动子序列分析 | 第30-31页 |
3.1.2 利用QGRS Mapper预测G-四链体 | 第31页 |
3.1.3 设计G-四链体潜在序列及突变体 | 第31-32页 |
3.2 圆二色谱检测G-四链体结构 | 第32-34页 |
3.2.1 寡核苷酸链的摩尔椭圆率检测 | 第32-33页 |
3.2.2 寡核苷酸链的热稳定性检测 | 第33-34页 |
3.3 凝胶电泳检测G-四链体结构 | 第34-35页 |
3.4 ChIP检测G-四链体结构 | 第35-36页 |
3.5 G-四链体结构调控BAP1启动子活性 | 第36-38页 |
3.5.1 BAP1启动子Gluc报告载体的构建 | 第36-37页 |
3.5.2 BAP1启动子上G-四链体对基因表达的调控 | 第37-38页 |
3.6 CHD2和CHD7对BAP1启动子中G-四链体结构的作用 | 第38-41页 |
3.6.1 BAP1表达相关解旋酶预测 | 第38-39页 |
3.6.2 解旋酶对外源BAP1启动子的活性影响 | 第39页 |
3.6.3 解旋酶对内源BAP1基因表达的调控 | 第39-41页 |
讨论 | 第41-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |