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BAP1基因启动子区G-四链体的结构鉴定及其对基因表达调控的研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
1 绪论第8-13页
    1.1 BAP1概述第8-9页
        1.1.1 BAP1与癌症第8-9页
    1.2 G-四链体第9-10页
        1.2.1 G-四链体结构的功能第9-10页
        1.2.2 G-四链体结构与解旋酶第10页
    1.3 染色质解旋酶DNA结合蛋白第10-11页
        1.3.1 解旋酶CHD2和CHD7在发育中的作用第11页
    1.4 本论文的研究目的及研究意义第11-13页
        1.4.1 研究目的第11-12页
        1.4.2 研究意义第12-13页
2 实验材料与实验方法第13-30页
    2.1 实验材料与实验仪器第13-15页
        2.1.1 材料第13页
        2.1.2 仪器第13-14页
        2.1.3 实验试剂的配置第14-15页
    2.2 实验方法第15-30页
        2.2.1 细胞培养与瞬转第15-16页
        2.2.2 载体的构建第16-20页
        2.2.3 慢病毒感染细胞第20-21页
        2.2.4 实时定量PCR测定RNA表达第21-22页
        2.2.5 模板处理第22-23页
        2.2.6 圆二色谱分析第23页
        2.2.7 DNA银染第23-24页
        2.2.8 基因组DNA提取第24-25页
        2.2.9 引物的设计第25-26页
        2.2.10 Gluc荧光素酶活性检测第26页
        2.2.11 SEAP值的检测第26页
        2.2.12 斑点杂交实验第26-27页
        2.2.13 ChIP实验第27-28页
        2.2.14 半定量PCR第28-30页
3 实验结果第30-41页
    3.1 BAP1基因启动子区域G-四链体预测第30-32页
        3.1.1 BAP1启动子序列分析第30-31页
        3.1.2 利用QGRS Mapper预测G-四链体第31页
        3.1.3 设计G-四链体潜在序列及突变体第31-32页
    3.2 圆二色谱检测G-四链体结构第32-34页
        3.2.1 寡核苷酸链的摩尔椭圆率检测第32-33页
        3.2.2 寡核苷酸链的热稳定性检测第33-34页
    3.3 凝胶电泳检测G-四链体结构第34-35页
    3.4 ChIP检测G-四链体结构第35-36页
    3.5 G-四链体结构调控BAP1启动子活性第36-38页
        3.5.1 BAP1启动子Gluc报告载体的构建第36-37页
        3.5.2 BAP1启动子上G-四链体对基因表达的调控第37-38页
    3.6 CHD2和CHD7对BAP1启动子中G-四链体结构的作用第38-41页
        3.6.1 BAP1表达相关解旋酶预测第38-39页
        3.6.2 解旋酶对外源BAP1启动子的活性影响第39页
        3.6.3 解旋酶对内源BAP1基因表达的调控第39-41页
讨论第41-44页
结论第44-45页
参考文献第45-52页
攻读学位期间发表的学术论文第52-53页
致谢第53-54页

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