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玉米ZmNAOD基因的克隆与功能分析

致谢第4-9页
摘要第9-11页
第一章 文献综述第11-20页
    1.1 玉米产量性状相关基因的研究进展第11-14页
        1.1.1 玉米产量性状QTL的分析第11-12页
        1.1.2 玉米产量性状的主效QTL研究进展第12-13页
        1.1.3 玉米籽粒大小相关基因的克隆第13-14页
            1.1.3.1 基于突变体的玉米籽粒大小相关基因的克隆研究第13-14页
            1.1.3.2 玉米籽粒相关基因的同源克隆第14页
    1.2 玉米光周期相关基因的研究进展第14-15页
    1.3 乙酰鸟氨酸脱酰酶及其产物在植物中作用的研究进展第15-18页
        1.3.1 乙酰鸟氨酸脱酰酶在植物中的作用第15-16页
        1.3.2 鸟氨酸与多胺类化合物在植物中的作用第16-18页
    1.4 本研究的基础和计划第18-20页
第二章 玉米Zm NAOD基因的克隆第20-36页
    2.1 材料与方法第20-24页
        2.1.1 实验材料第20-21页
            2.1.1.1 实验材料及取样第20页
            2.1.1.2 实验所需试剂耗材及仪器第20-21页
        2.1.2 实验方法第21-24页
            2.1.2.1 实验相关试剂配制方法第21-22页
            2.1.2.2 玉米籽粒RNA提取方法第22页
            2.1.2.3 cDNA第一链合成与检测第22页
            2.1.2.4 SLS法提取玉米叶片DNA第22-23页
            2.1.2.5 ZmNAOD基因的克隆第23-24页
            2.1.2.6 生物信息学分析方法第24页
    2.2 结果与分析第24-33页
        2.2.1 ZmNAOD基因CDS区域序列的获得第24页
        2.2.2 ZmNAOD基因DNA序列的获得第24-25页
        2.2.3 ZmNAOD基因的序列分析与比对第25-30页
            2.2.3.1 cDNA序列分析与比对第25-27页
            2.2.3.2 DNA序列分析第27-30页
        2.2.4 ZmNAOD蛋白的生物信息学分析第30-33页
            2.2.4.1 ZmNAOD蛋白理化性质分析第30页
            2.2.4.2 ZmNAOD蛋白的保守结构域预测第30-31页
            2.2.4.3 ZmNAOD蛋白的二级结构预测第31页
            2.2.4.4 ZmNAOD蛋白的信号肽预测第31-32页
            2.2.4.5 ZmNAOD蛋白的跨膜结构预测第32页
            2.2.4.6 ZmNAOD蛋白的磷酸化位点预测第32-33页
            2.2.4.7 ZmNAOD蛋白进化树的构建第33页
    2.3 小结与讨论第33-36页
第三章 ZmNAOD基因在玉米中的表达分析第36-43页
    3.1 材料与方法第36-38页
        3.1.1 实验材料第36-37页
            3.1.1.1 实验材料的取样第36页
            3.1.1.2 实验所需试剂耗材及仪器第36-37页
        3.1.2 实验方法第37-38页
            3.1.2.1 玉米籽粒及器官RNA提取方法第37页
            3.1.2.2 cDNA第一链合成及检测第37页
            3.1.2.3 荧光定量PCR的体系及程序第37页
            3.1.2.4 荧光定量引物设计及检测第37-38页
            3.1.2.5 ZmNAOD相对表达量计算方法第38页
    3.2 结果与分析第38-40页
        3.2.1 荧光定量引物分析第38-39页
        3.2.2 ZmNAOD基因在玉米不同器官中的相对表量分析第39-40页
        3.2.3 ZmNAOD基因在授粉后不同时期籽粒中的表达分析第40页
    3.3 讨论与小结第40-43页
第四章 ZmNAOD基因启动子区域的克隆与分析第43-51页
    4.1 材料与方法第43-45页
        4.1.1 实验材料第43-44页
            4.1.1.1 实验材料及种植方法第43页
            4.1.1.2 实验所需试剂耗材及仪器第43-44页
        4.1.2 实验方法第44-45页
            4.1.2.1 实验相关试剂的配制方法第44页
            4.1.2.2 SLS法提取叶片基因组DNA第44页
            4.1.2.3 ZmNAOD基因启动子区域的克隆第44-45页
            4.1.2.4 生物信息学分析方法第45页
    4.2 结果与分析第45-49页
        4.2.1 ZmNAOD基因启动子区域序列的获得第45-47页
        4.2.2 ZmNAOD基因启动子区域调控元件预测分析第47-49页
    4.3 小结与讨论第49-51页
第五章 ZmNAOD基因的功能分析第51-65页
    5.1 材料与方法第52-58页
        5.1.1 实验材料第52页
            5.1.1.1 实验材料及种植条件第52页
            5.1.1.2 实验菌株及相关载体第52页
            5.1.1.3 实验所需试剂耗材及仪器第52页
        5.1.2 实验方法第52-58页
            5.1.2.1 实验相关试剂及配制方法第52-53页
            5.1.2.2 过表达载体及亚细胞定位载体构建方法第53-54页
            5.1.2.3 农杆菌感受态的转化及检测第54-55页
            5.1.2.4 拟南芥植株的转化第55页
            5.1.2.5 转基因拟南芥阳性植株的筛选第55-57页
            5.1.2.6 ZmNAOD蛋白亚细胞定位的预测及观察第57页
            5.1.2.7 转基因拟南芥组织取样第57页
            5.1.2.8 转基因拟南芥的暗处理第57页
            5.1.2.9 转基因拟南芥生育期调查第57页
            5.1.2.10 转基因拟南芥籽粒性状调查第57-58页
    5.2 结果与分析第58-63页
        5.2.1 过表达载体与亚细胞定位载体的构建第58-59页
        5.2.2 纯合转基因植株的获得第59-60页
        5.2.3 ZmNAOD蛋白的亚细胞定位第60-61页
        5.2.4 ZmNAOD基因在不同器官中的表达分析第61-62页
        5.2.5 暗培养对转基因植株生长的影响第62页
        5.2.6 转基因植株的生育期第62-63页
        5.2.7 转基因拟南芥籽粒性状分析第63页
    5.3 小结与讨论第63-65页
全文总结第65-66页
参考文献第66-78页
附录:攻读硕士学位期间研究成果第78-79页
ABSTRACT第79-80页

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